茎段和穴盘大小对北方叶用甘薯越冬育苗的影响

为探索北方叶用甘薯越冬穴盘育苗,设置4个茎段大小(4、6、8、10 cm,用D1、D2、D3、D4表示)和5种穴盘规格(32、50、72、105、128孔),搭配14个处理,研究不同搭配对种苗成活率、幼苗长势(茎粗、株高等)和鲜重等指标的影响。结果表明:相同穴盘下,随着茎段增长,幼苗的成活率、叶片数、基部茎粗和株高呈现增加的趋势,进而地上部鲜重和整株鲜重也随之增加,以D4处理最高。相同茎段下,随着穴盘孔数增加,幼苗的叶片数、基部茎粗、株高、地上部鲜重和全株鲜重减少,源于穴盘对地下部的影响,以32孔处理最高。不同茎段和穴盘搭配下,D4-32处理的生长情况最好,3月中旬,对于地上部鲜重而言,D2-72处理(9.79 g)可达到与D4-32处理相同的效果(两者间无显著性差异),其叶片数、基部茎粗和株高等指标满足移栽水平;对于整株鲜重而言,D2-105处理(10.21 g)可达到与D4-32处理相同的效果,且可节省228.1%的育苗面积,参考其重量,1月中旬,D3-72处理下的地上部和整株鲜重接近上述两个处理的水平,可节省125.0%的育苗面积。综合秧苗生长情况与经济效益,3月中旬移栽时,推荐D2-105,即含2个腋芽茎段与105孔穴盘的搭配,如有生产条件在1月中旬移栽,推荐D3-72,即含3个腋芽茎段与72孔穴盘的搭配。

软枣猕猴桃“奇异莓6号”无芽茎段离体再生技术研究

取无芽茎段为外植体进行离体培养,具有成本低、取材方便、材料充足等优点。为克服软枣猕猴桃无芽茎段诱导再生率低的问题,以“奇异莓6号”软枣猕猴桃无菌苗无芽茎段为外植体,探究了不同植物生长调节剂、光照强度、温度、苗龄对不定芽诱导的影响,以及不同浓度IBA对生根的影响。结果表明,最佳外植体为苗龄30 d的无芽茎段,在光照12 h/d、光照强度50 lx、20℃下不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg/L ZT,不定芽以间接途径发生,培养40 d无芽茎段两端开始形成淡绿色愈伤组织,培养45 d愈伤组织表面出现红色小点,开始形成不定芽,培养55 d愈伤组织诱导率、愈伤组织分化率及不定芽数均到最大,分别为100%、100%及18.87个/块。待苗长至3 cm左右时转到MS+0.4 mg/L IBA中进行生根培养,培养30 d生根率可达100%,平均根数为8.53条/株,根长1.68 cm,根粗0.14 cm。

柠檬醛猴樟组培苗幼态茎段扦插研究

以柠檬醛猴樟组培苗枝条为材料,研究其茎段、IBA、扦插基质和扦插时间对生根的影响。结果表明,柠檬醛猴樟组培苗幼态茎段的生根率达89.58%,其生根率、根数和根长均显著高于扦插苗茎段;IBA能够显著促进柠檬醛猴樟组培苗幼态茎段的生根,组培苗幼态茎段生根最适IBA浓度为3000 mg/L,生根率达94.79%;清水处理组培苗幼态茎段的生根率为67.71%,高于扦插苗茎段的生根率(54.17%),这是由于柠檬醛猴樟组培苗被诱导恢复了生根能力;蛭石和松树皮混合基质对柠檬醛猴樟组培苗幼态茎段的生根有显著影响,蛭石和松树皮按2∶1或1∶1配比混合茎段的生根率较高,分别为94.79%和91.67%;扦插时间对柠檬醛猴樟组培苗幼态茎段的生根也有显著影响,5月底和7月底扦插,茎段的生根率达到85%以上,9月底扦插茎段的生根率稍低,为72.92%。

树番茄茎段无菌培养及植株再生研究

以树番茄带腋芽茎段为外植体,研究杀菌剂对外植体消毒及生长激素对愈伤组织、不定芽及不定根诱导的影响,同时探寻合适的组培苗移栽基质,为构建高效的树番茄无菌培养及植株再生体系提供参考。结果表明:用0.1%HgCl2消毒外植体15 min,成活率达97.8%;愈伤组织诱导最适宜激素配比为6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率达100%,不定芽诱导最适宜激素配比为6-BA0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L,不定芽诱导率达92.5%,平均分化芽数达到3个/块;不定根诱导最适宜激素配比为NAA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L,生根率达100%,平均生根数达4.2条,平均根长2.9 cm。炼苗7 d后移栽于腐殖土∶育苗基质∶椰糠(体积比2∶2∶1)的混合基质中,成活率达96%。

牛尾山药病毒病危害情况调查与茎段脱毒方法

为探究云南特色品种牛尾山药携带的病毒及其危害情况,明确病毒抑制剂、热处理和低温处理对山药病毒的脱毒效果,以期得到较好的脱毒方法。研究调查了牛尾山药病毒病发病率、植株病症,采用分子生物学方法检测了病毒种类,研究了不同脱毒处理下山药斑驳病毒的脱毒效果。结果表明:牛尾山药携带山药斑驳病毒,叶片可见明显的褪绿斑,发病率为41.67%~43.33%。RT-PCR检测结果显示,60 mol·L^(-1)盐酸吗啉胍处理、60 mol·L^(-1)利巴韦林药剂处理能降低山药成活率和生长量,但能有效脱除山药斑驳病毒。采用高温处理(45℃12 h、40℃24 h、45℃24 h)结合顶芽培养能有效脱除山药斑驳病毒,40℃处理24 h的山药生长量显著降低,而45℃处理12 h、45℃处理24 h的山药生长量和成活率均显著降低。低温处理(0℃24 h、5℃24 h)结合顶芽培养能显著降低山药成活率和生长量,但能有效脱除山药斑驳病毒。综合考虑成活率、生长量和脱毒效果,建议采用60 mol·L^(-1)盐酸吗啉胍处理或40℃高温处理24 h。

芫花叶片和茎段离体再生体系的构建

【目的】芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)是野生名优乡土花木和传统药用植物,具有很高的生态、观赏和药用价值。研究和解决芫花的快速繁殖技术,是对其进行资源保护和开发利用的首要条件。【方法】以芫花健壮植株的叶片和茎段为外植体,研究不同消毒方法对芫花外植体的消毒效果,以及不同激素配比对其愈伤组织的诱导、不定芽增殖和生根的影响,从而构建其高效的离体组织再生体系。【结果】分别用75%乙醇溶液消毒25~35 s,2%NaClO、0.1%HgCl_(2)溶液处理芫花外植体15 min,芫花茎段外植体的污染率为52.7%,芫花叶片外植体的污染率为49.0%。MS+0.8 mg/L 6-BA+0.35 mg/L NAA为芫花茎段外植体最佳初代诱导培养基,愈伤组织诱导率达79.7%,不定芽诱导率达96.4%;MS+0.8 mg/L IBA+0.85 mg/L NAA为芫花叶片外植体最佳初代诱导培养基,愈伤组织诱导率达99.8%,不定芽诱导率达94.5%。MS+0.35 mg/L 6-BA+0.35 mg/L IBA为芫花茎段和叶片最佳继代增殖培养基,增殖系数最高达7.36,平均芽高最高为2.47 cm;MS+0.6 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA+0.08 g/L抗坏血酸为芫花茎段外植体最佳生根培养基,平均生根3.67条,根长2.16 cm;MS+0.6 mg/L IBA+0.6 mg/L NAA+0.07 g/L抗坏血酸为芫花叶片外植体最佳生根培养基,平均生根1.33条,根长1.95 cm。【结论】建立了以芫花叶片和茎段为外植体的离体组织再生体系,其愈伤组织诱导率、不定芽诱导率、增殖系数和生根率均较高,有效的解决了芫花的苗木高效繁殖技术难题。

黄百香果茎段组培快繁技术研究

为筛选黄百香果组培快繁方案,为百香果组培苗繁育提供技术支撑,以黄百香果茎段为外植体,研究不同灭菌时间对外植体成活率的影响,不同培养基配方对初代芽诱导、继代增殖、生根移栽的影响。结果表明,0.1%HgCl_(2)处理6 min对百香果茎段外植体的灭菌效果最佳,外植体成活率为66.67%。MS+6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.3 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.1 mg/L+抗坏血酸300 mg/L为芽诱导最佳培养基,芽诱导率79.14%。MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L+谷氨酸20 mg/L为继代增殖最佳培养基,增殖倍数3.21。MS+IBA 0.5 mg/L生根培养基的组培苗生根率100%,且有利于组培生根苗移栽成活。

基于茎段外植体的茶树组培苗快繁技术研究

【目的】目前,茶树组培苗繁育存在诱导出芽效率不高、繁殖系数较低等问题。因此,为提高茶树种质资源保存繁育效率,丰富保存手段与技术,建立一种高效、快速、实用的基于茎段外植体的茶树组织培养高效快繁技术体系非常必要。【方法】选用来自安徽省六安市舒城县鲍家村群体种的一个国家级品种‘报春1号’作为研究试材,对该品种进行组织培养快繁技术的探索,包括消毒、定芽诱导、不定芽诱导(I期和II期)、芽伸长、以及生根等阶段。【结果】离体快繁:最佳定芽诱导培养基为MS+3 mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA),诱导率达82.2%;不定芽增殖I期最佳培养基为MS基础培养基(MS)+2 mg·L^(-1)6-BA+0.2 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA),诱导率为77.78%,平均芽数为5.4个;不定芽增殖II期最佳培养基为MS+1 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)NAA+2 mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ),诱导芽数最多(平均值为10.43个),芽苗呈绿色,叶片舒展;不定芽伸长最佳培养基为MS+0.8 mg·L^(-1)6-BA+0.08 mg·L^(-1)NAA,伸长率为63.33%;不定根诱导培养基以1/2MS培养基+3 mg·L^(-1)IBA效果较佳。【结论】本研究结果建立了一种基于茎段外植体的茶树组织培养高效快繁技术,将对优良茶树品种的保存繁育及其高效利用提供理论基础。

紫薇带芽茎段的离体培养及快速增殖

以花瓣深粉红色的紫薇品种‘彩霞满天’(Lagerstroemia indica‘Caixia Mantian’)的半木质化带芽茎段为外植体,从消毒灭菌、初代培养基、增殖培养基等方面进行离体培养体系的优化。结果表明:各处理中紫薇茎段最佳消毒方案为先用75%酒精浸泡18 s,再用5%NaClO溶液浸泡8 min;腋芽茎段最佳启动培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.1 mg·L^(-1)+蔗糖20 g·L^(-1)+琼脂6.3 g·L^(-1),该培养基的平均诱导率达到45%,芽长势最好且叶色嫩绿;以基本培养基、6-BA浓度、KT浓度3个因素进行L9(33)正交试验,得出影响紫薇组培苗有效增殖系数的三因素主次程度为:6-BA>基本培养基>KT;对紫薇组培苗增殖及生长效果最好的培养基为MS+NAA 0.05 mg·L^(-1)+6-BA 2.0 mg·L^(-1)+KT 4.0 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.3 g·L^(-1)和WPM+NAA 0.05 mg·L^(-1)+6-BA 2.0 mg·L^(-1)+KT 4.0 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6.3 g·L^(-1)。

三角梅茎段组织培养快繁技术研究

以三角梅茎段为外植体,通过调整不同阶段培养基中生长素和细胞分裂素的种类和浓度,建立三角梅快繁体系。结果表明,三角梅茎段最佳诱导培养基为MS+6-BA(6-苄氨基嘌呤)0.5 mg/L+IBA(吲哚丁酸)0.1 mg/L,诱导率为80%,7 d左右即可萌发;最适增值培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.2 mg/L,30 d增殖系数为5.28;最适生根培养基为1/2MS+NAA 1.5mg/L,生根率为87.3%,平均生根条数为5.6;炼苗后移栽在珍珠岩∶椰糠=1∶1的基质中,成活率为92%。本研究建立了以茎段为外植体的三角梅组织培养快繁体系,为三角梅多倍体育种和遗传转化等研究奠定良好基础。

液体培养甘薯组培苗对培养基分装量和接种茎段的优化

为降低甘薯组培苗生产成本,提高快繁效率,以甘薯脱毒组培苗茎段为外植体,以MS+IBA(0.1 mg/L)+蔗糖(30 g/L)为扩繁培养基,文章研究了培养方式、培养基分装量及接种茎段长度与形态对甘薯组培苗生长的影响.结果表明:液体培养优于同等培养条件下的固体培养和玻璃棉支撑培养.采用液体培养快繁甘薯组培苗,以30 mL/瓶的扩繁培养基分装量最有利于组培苗的生长与增殖,保留半截叶柄且长度为1.5~2.0 cm的茎段是最适宜的外植体,不仅便于切割与接种,且成苗率高,组培苗生长茁壮、迅速.因此,甘薯脱毒苗最佳的离体快繁方法是截取1.5~2.0 cm长并保留半截叶柄的茎段,接种于30 mL/瓶液体培养基,经过一个培养周期的离体培养,不仅茎段腋芽萌发不受影响,成苗率与成苗数高,且组培苗生长迅速,增殖系数高.

霍山石斛茎段培养诱导丛生芽的研究

以霍山石斛2a生嫩茎为外植体,开展霍山石斛茎段离体培养诱导丛生芽的研究。结果表明:在2.5%的次氯酸钠溶液消毒10min的处理效果较好,污染率26.67%,死亡率23.33%;茎段腋芽在MS、N_(6)培养基上萌发率均能达到90%,优于1/2MS、1/2N_(6);5%土豆泥与10%香蕉泥的组合,添加在MS、N_(6)培养基中,促进腋芽生长要优于仅添加一种有机物;在MS+5%土豆泥+10%香蕉泥的培养基上调整,0.7mg/L6-BA与0.07mg/L NAA的激素配比对霍山石斛丛生芽继代增殖作用突出,增殖倍数在4.2,且丛生芽长势良好。综合分析,最终筛选出霍山石斛丛生芽增殖最佳培养基为MS+5%土豆泥+10%香蕉泥+0.7mg/L6-BA+0.07mg/LNAA。

‘茶花’蓝莓茎段初代培养体系建立

以蓝莓(Vaccinium spp.)主栽品种‘茶花’一年生的半木质化茎段外植体为试材,探讨不同消毒时间、不同植物生长调节剂组合对‘茶花’蓝莓初代培养的影响。结果表明:‘茶花’蓝莓茎段用75%乙醇浸泡30 s,再用2.5%次氯酸钠溶液浸泡10 min,灭菌效果最好,成活率最高;改良WPM+6-BA 1.5 mg/L+ZT1.0 mg/L诱导培养基最适宜茎段腋芽诱导;改良WPM+IAA 1.0 mg/L+ZT 1.5 mg/L增殖培养基最适宜再生芽增殖。该研究为‘茶花’蓝莓高效组培快繁体系的建立提供参考依据。

西南桦节间茎段植株再生体系的建立

[目的]探究西南桦间接器官发生过程的愈伤组织诱导、不定芽分化、生根诱导等各阶段的适宜培养基配方,建立西南桦高频再生体系,为其遗传转化和良种繁育提供理论依据和技术支持。[方法]以西南桦TC2号无性系的节间茎段为外植体开展愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根培养基筛选试验,并优化了预培养条件,揭示了愈伤组织诱导阶段基本培养基、激素浓度、暗培养时间,愈伤组织分化阶段激素组合,以及预培养条件等因素对不定芽分化的影响。[结果](1)预培养的适宜条件为:弱光培养(1000 lx)15 d后转至暗培养7 d,再正常光照(2000 lx)培养8 d,该条件下可获得适度黄化的植株,其平均株高和节间长度分别为6.6 cm和3.1 cm;(2)适合西南桦节间茎段愈伤组织诱导的培养基为WPB5+1.0 mg·L^(-1) TDZ+0.2 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),适宜暗培养时间为15 d;(3)适合愈伤组织分化的培养基为WPM+0.8 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) GA3+30 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8);(4)采用上述最优方案,其茎段诱导的愈伤组织分化率和净增殖系数为88.9%和6.2以上,平均每个预培养植株可产生56.8个不定芽;(5)适宜生根培养基为WPM+0.1 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),培养30 d后生根率可达100%。[结论]本研究完整构建了高效稳定、重复性好的西南桦节间茎段高频再生体系,该体系不仅愈伤组织分化率和增殖系数较高,还可提升节间茎段取材的效率,为今后开展西南桦组培快繁以及利用基因工程进行其遗传性状改良奠定了基础。

芦笋试管苗茎段组培生根的关键技术初探

为实现芦笋组培苗茎尖、茎段同步生根,提高组培快繁效率,在试管苗茎尖生根的基础上,以4个不同的芦笋组培继代增殖试管苗为试验材料,研究了茎段部位、茎段直径大小、不同激素配比对芦笋试管苗茎段生根的影响。结果表明,经过4代以上继代培养的增殖试管苗可通过茎段生根获得完整植株,移栽成活率最高可达85.3%。茎段选取部位以茎尖下1~4节的茎段为宜,对于常规的试管苗,宜选取直径1.5~2.5 mm的茎段;对于特别细的试管苗,宜选取直径1.0~2.0 mm的茎段。在生根培养基中添加适当浓度的Ancymidol能显著提高试管苗的生根率,添加质量浓度以0.10 mg·L^(-1)为宜。

枳雀幼嫩茎段组织培养快速繁殖体系研究

为建立一种高效的枳雀快速无性繁殖体系,以苗龄4个月的枳雀实生苗幼嫩茎段为试材,对诱导茎段分化腋芽、诱导幼芽生根的最适培养基和再生苗移栽驯化的方法进行研究。结果表明,茎段分化腋芽的最适培养基为MT+1.0 mg/mL 6-BA,培养30 d,腋芽诱导率为88.89%,分化系数为1.56;最适生根培养基为1/2 MT+2.0 mg/mL IBA,培养45 d,生根率为86.67%,生根系数为1.15;再生苗移栽在灭菌营养土(泥炭土∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1)的花盆中,在培养室内采用封口膜对花盆进行封口和定期敞口的办法驯化1个月,成活率为96%。枳雀幼嫩茎段快速繁殖体系的建立,为后续枳雀快繁体系的优化、练苗移栽及遗传转化工作奠定了基础。

基于二次回归正交旋转探究不同植物生长调节剂对3种葡萄砧木茎段快繁的影响

【目的】通过对5BB、1103P、SO4葡萄砧木在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同培养基和植物生长调节剂的筛选,建立高效茎段快繁体系。【方法】以3种葡萄砧木的单芽茎段为材料,应用二次回归正交旋转组合设计的试验方案进行增殖培养,探究不同的植物生长调节剂对繁殖系数的影响。【结果】适用于3种葡萄砧木的初代培养的培养基均为MS培养基,并添加2.00 mg·L^(-1)6-BA、0.20 mg·L^(-1)IBA、0.20 mg·L^(-1)GA_(3),萌发率均可达100%。影响5BB和1103P葡萄砧木增殖培养的3种植物生长调节剂的主次顺序为IBA>GA_(3)>6-BA,最适宜的增殖培养配方为MS+2.00 mg·L^(-1)6-BA+0.25 mg·L^(-1)IBA+0.50 mg·L^(-1)GA_(3);影响SO4葡萄砧木增殖培养的3种植物生长调节剂的主次顺序为6-BA>GA_(3)>IBA,最适宜的增殖培养配方为MS+1.52 mg·L^(-1)6-BA+0.25 mg·L^(-1)IBA+0.36 mg·L^(-1)GA_(3)。最适宜5BB、SO4葡萄砧木的生根培养配方为1/2MS+1.50 mg·L^(-1)IBA+0.10 g·L^(-1)Ac,并进行7 d暗培养;最适宜1103P砧木的生根培养配方为1/2MS+1.00 mg·L^(-1)IBA+0.10 g·L^(-1)Ac,并进行7 d暗培养。【结论】最适宜3种葡萄砧木初代培养的培养基均为MS培养基。最适宜5BB和1103P葡萄砧木的6-BA质量浓度为2.00 mg·L^(-1)、IBA质量浓度为0.25 mg·L^(-1)、GA_(3)质量浓度为0.50 mg·L^(-1);最适宜SO4葡萄砧木的6-BA质量浓度为1.52 mg·L^(-1)、IBA质量浓度为0.25 mg·L^(-1)、GA_(3)质量浓度为0.36 mg·L^(-1)。最适宜3种葡萄砧木生根培养的暗培养时间均为7 d,Ac质量浓度均为0.10 g·L^(-1),最适宜5BB、SO4葡萄砧木生根培养的IBA质量浓度为1.50 mg·L^(-1),5BB葡萄砧木的生根系数可达2.60,SO4葡萄砧木的生根系数可达1.47;最适宜1103P葡萄砧木生根培养的IBA质量浓度为1.00 mg·L^(-1),生根系数可达2.30。

IBA、基质和扦插时间对油樟茎段扦插生根的影响

油樟是我国重要的经济树种之一,具有较高的经济价值。本文以油樟1年生半木质化枝条为材料,研究IBA、扦插基质和扦插时间对油樟扦插生根的影响,为油樟扦插繁殖提供理论依据。结果表明,IBA能够显著促进油樟茎段的生根,2 000 mg/L IBA是油樟茎段扦插的最适浓度,生根率最高,达73.96%;该处理下茎段根数、根粗、根重和根体积生长也相对较好。蛭石和泥炭混合基质有利于油樟茎段扦插生根;蛭石和泥炭配比2∶1是油樟茎段扦插生根的最适基质,生根率为73.97%。扦插时间对油樟茎段生根也有显著影响,5月和7月穗条生根率较高,分别为70.84%、69.79%,显著高于9月扦插穗条的生根率(29.17%)。

澳洲坚果茎段组织培养研究

本研究以澳洲坚果‘桂热1号’带芽茎段为外植体,MS为基本培养基,探究适宜茎段外植体腋芽萌动的灭菌时间、腋芽萌发生长适宜的培养基种类。结果表明,适宜茎段外植体灭菌的灭菌方法是用洗衣粉浸泡15 min配合0.1%高锰酸钾浸泡10 min进行预处理,再用75%乙醇浸泡30 s、0.2%氯化汞处理9 min,可实现污染率26.92%、腋芽萌动率57.7%;适宜茎段外植体萌发生长的培养基:MS+6-BA(2 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),萌芽率为60%,芽长势好。

‘蒙图桑1号’茎段外植体初代培养研究

以‘蒙图桑1号’一年生茎段为外植体,研究了不同消毒时间、不同基本培养基、不同生长调节剂配比和不同浓度配比作用下‘蒙图桑1号’组织培养初代培养情况。结果表明:‘蒙图桑1号’茎段外植体最佳消毒方法为75%乙醇1min+5%NaClO 10min,外植体存活率为63.33%,显著高于其他对照组;最佳基本培养基为WPM培养基,茎段腋芽萌发率显著高于其他对照组,达到78.33%;初代培养最适启动培养基为WPM+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,其萌发率为83.33%。