西藏茎直黄芪对山羊的毒性研究

本试验经瘤胃瘘管每天给6只山羊投股茎直黄芪粉(20g/kgB·W),并且给每只山羊茎直黄芪干草(200g/day),令其自由采食。第40～47天受试山羊出现以中枢神经系统机能紊乱为特征的中毒症状,表现为精神沉郁,摇头,目光呆滞,反应迟钝,步态蹒珊。继之,后肢无力,后躯麻痹,卧地不起。实验室检查发现,中毒羊血清AKP、GOT活性和BUN含量明显升高。病理组织学变化主要表现为神经细胞广泛空泡化。经分析茎直黄芪含苦马豆素,不含脂肪族硝基化合物,不是聚硒植物,从而证实苦马豆素可能是茎直黄芪的主要有毒成分。

茎直黄芪中苦马豆素的提取工艺研究

以茎直黄芪(Astragalus strictus)为原料,通过单因素试验、正交试验和方差分析确定了苦马豆素的酶法提取工艺条件,并用气相色谱法测定了提取物中苦马豆素的含量。结果表明,优化后的茎直黄芪中苦马豆素最佳提取条件为,粉碎目数80目、料液比1∶40、纤维素酶添加量3.5%、酶解时间3.0 h。在此提取条件下,苦马豆素的提取率可达到39.41 mg/kg。该法快速、高效、方便、节能,有利于茎直黄芪中苦马豆素的提取。

茎直黄芪内生真菌分离鉴定及其多样性分析

为探明茎直黄芪(Astragalus strictus)不同组织部位内生真菌种群分布及其物种多样性,对采自西藏工布江达县的茎直黄芪样品,运用形态学和rDNA-ITS序列分析技术鉴定其种属,并计算多样性指数。结果表明:从茎直黄芪424个组织块中分离到内生真菌336株,分属7纲、9目、10科、13属,其中Alternaria tenuissima分离率最高为32.14%,是优势种属,其次是Undifilum oxytropis,分离率为19.05%;多样性指数显示,茎直黄芪不同组织部位内生真菌多样性指数不同,花中内生真菌香农-维纳指数(2.16)及辛普森指数(0.154)及均匀度指数(0.80)均最高,表明其多样性最高,叶次之,茎最低。表明茎直黄芪不同组织内生真菌的数量、种属组成及多样性存在明显差异,花是内生真菌定植的主要部位,且其多样性最高。

茎直黄芪提取物的体外抑菌作用

为研究茎直黄芪提取物的体外抑菌作用,采用琼脂扩散和试管稀释法对其抑菌效果进行了研究。结果显示茎直黄芪石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌等5种细菌有不同程度的抑菌作用,其中正丁醇部分抑菌作用较强。通过进一步试验表明正丁醇部分主要抑菌活性成分集中在20%乙醇和40%乙醇部分,尤其以后者抑菌活性最佳。40%乙醇部分对5种细菌的MIC均为6.25 mg/mL,对大肠埃希菌的MBC为6.25 mg/mL。对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌的MBC均为12.25 mg/mL,对无乳链球菌的MBC为25.00mg/mL。通过研究发现茎直黄芪提取物在体外具有明显的抑菌作用。

茎直黄芪人工中毒解毒实验家兔病理模型的建立及病理学观察

为对由茎直黄芪引起的牲畜中毒病理情况以及解毒治疗效果做进一步评价研究,以茎直黄芪人工饲喂2月龄实验家兔中毒,设置4个实验组,分别为空白对照组、攻毒组、解毒治疗a组、解毒治疗b组,建立中毒及解毒病理模型,并在28天(中毒死亡)、45天(中毒死亡)、49天(解毒a、b组及空白组处死),分别采取心、肝、脾、肺、肾和脑等进行病理组织学检查,利用常规病理学方法对比研究实验家兔体内的病理变化规律。结果表明,实验家兔均在18天左右出现中毒症状,28天左右出现中毒死亡,人工中毒解毒实验家兔病理模型成功建立。攻毒组试验家兔表现为大部分脏器均出现淤血、炎症、坏死等病理变化,解毒治疗a、b组,出现轻度淤血、轻度的细胞变性。

速康解毒口服液对家兔茎直黄芪中毒的疗效研究

以茎直黄芪人工饲喂2月龄实验家兔中毒,设置对照组、攻毒组、攻毒解毒治疗组,每组实验家兔4只,建立中毒及解毒病理模型,在28d、45d(中毒死亡)、49d(解毒组及空白组处死),研究实验家兔体内的病理变化规律,并对速康解毒口服液治疗效果进行评估。实验结果表明,攻毒组、攻毒解毒解毒组实验家兔在18d左右出现中毒症状,攻毒组Ⅱ号在28d中毒死亡,在第29d时对解毒组利用速康口服液解毒治疗均成活。病理学切片观察表明,攻毒组试验家兔表现为大部分脏器均出现淤血、炎症、坏死等病理变化,解毒治疗组出现轻度淤血、轻度的细胞变性。研究表明速康解毒口服液能有效提高α-甘露糖甙酶活性,解毒组试验家兔病理组织学观察结果表现轻微,证实速康解毒口服液具有较好的解毒效果。

微波法提取茎直黄芪中苦马豆素工艺的优化

以茎直黄芪(Astragalus strictus)为原料,采用微波法提取其中的苦马豆素,设计正交试验优化提取工艺,并用气相色谱法测定提取物中苦马豆素的含量。结果表明,优化的提取条件为茎直黄芪与甲醇料液比1∶10(m∶V,g/mL)、微波功率280 W、提取时间20 s。在优化的提取条件下茎直黄芪中苦马豆素的提取率可达到0.009 264%。

茎直黄芪化学防除试验

本试验选用国产2.4-DJ酯和美国产Starane两种农药采用不同浓度处理，对茎直黄芪进行了田间灭除。试验证明，2.4-DJ酯以3000～3750μgg-1，每亩用药液50～70ml，对茎在黄芪有良好的杀灭效果，且药害很小;7500μg·g－1以上浓度虽对茎直黄芪灭除效果达100％，但药害严重;美国产Starane各种浓度处理，对茎直黄芪均有优良杀灭效果，660μg·g－1以上浓度当年防除效果达99％以上，且未发现药害现象。

茎直黄芪中毒中药复方预防解毒散急性和亚慢性毒性试验

为评价茎直黄芪中药复方解毒散的安全性,进行了茎直黄芪中药复方解毒散对小鼠的急性毒性和亚慢性毒性试验研究。采用改良Karber法测得茎直黄芪中药复方解毒散对小鼠的口服急性毒性LD50为(176.91±22.70)g/kg,95%可信限为156.60-202.00 g/kg,属低毒;采用经口灌胃法对小鼠连续给药7 d,7 d后对小鼠各项生理指标的测定结果表明,茎直黄芪中药复方解毒散在使用剂量范围内对小鼠的行为、体质量、饮食状况、生理和生化指标均无不良影响。在亚慢性毒性试验中,给药7 d后各给药组小鼠肾脏脏器系数与对照组差异不显著(P>0.05);各种酶指标与对照组亦无显著性差异(P>0.05)。由此可知,茎直黄芪中药复方预防解毒散毒性极低,使用安全。

茎直黄芪化学成分TLC定性与定量分析

为分析茎直黄芪化学成分和吲哚里西啶类生物碱,5kg茎直黄芪草粉经热回流提取,石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取,对各萃取部位化学成分,及氯仿部位和乙酸乙酯部位吲哚里西啶类生物碱进行薄层色谱法(TLC)定性分析,同时用薄层色谱扫描软件,对各成分进行扫描计算相对含量。结果显示,3个萃取部位分别检出13、15、15个显色斑点,其中SYM-12、SYM-10、SYM-6、LF-7、YSYZ-8、YSYZ-6等6种物质相对含量均在15%以上。吲哚里西啶类生物碱专项分析表明,茎直黄芪氯仿部位、乙酸乙酯部位至少含8种和6种吲哚里西啶类生物碱,其中LFSWJ-5、LFSWJ-6、LFSWJ-7、YSYZSWJ-3、YSYZSWJ-4和YSYZSWJ-5等相对含量均在15%以上,LFSWJ-3和YSYZSWJ-4Rf与苦马豆素标准品一致,相对含量分别为10.02%和15.67%。

茎直黄芪化学成分分离与结构鉴定

采用D101大孔树脂、聚酰胺和硅胶柱层析等色谱技术分别对西藏有毒植物茎直黄芪石油醚部位、正丁醇部位和水部位化学成分进行分离纯化,并利用理化常数和波谱等数据进行化学结构鉴定。结果从茎直黄芪中共分离得到9个化合物,经结构鉴定分别为β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、氧化氮苦马豆素(3)、1-羟基吲哚里西啶(4)、斑荚素(5)、山奈酚-4'-甲基醚(6)、鼠李柠檬素-3-氧-β-D-半乳糖苷(7)、角鲨烯(8)和苦马豆素(9),除化合物9外,其他化合物均首次从茎直黄芪中分离得到。

茎直黄芪中生物碱苦马豆素提取方法比较研究

用微波辅助法和纤维素酶法提取茎直黄芪中有效成分苦马豆素,对两种方法提取效果进行比较。结果表明,纤维素酶法和微波辅助提取法提取茎直黄芪中有效成分苦马豆素提取率分别为39.41 mg/kg和92.64 mg/kg,微波辅助提取法提取效果较好。

茎直黄芪亚急性毒性对藏猪血细胞影响研究

本试验将茎直黄芪对藏猪进行为期35 d亚急性攻毒试验,通过对临床症状和主要血液学指标检测,结果表明:试验组藏猪对茎直出现轻微临床中毒症状,红细胞总数显著下降(P<0.05),白细胞总数显著低于对照组(P<0.05);同时血细蛋白浓度也显著降低(P<0.05)。

藏沙蒿与茎直黄芪的竞争效应研究

通过对藏沙蒿和茎直黄芪的相对产量及竞争平衡指数分析,研究两者的竞争效应。结果表明,藏沙蒿的相对产量、竞争平衡系数均显著高于茎直黄芪,并随种植密度增加两者间的差异也逐渐增大。在8株/盆和12株/盆种植条件下,茎直黄芪混种与单种相比单株总生物量降低了16.9%和24.5%且差异显著,而藏沙蒿混种处理单株生物量显著高于单种处理。说明藏沙蒿与茎直黄芪之间存在较强的竞争作用,对茎直黄芪有强烈的抑制,在较高密度的种植条件下,经过长期的竞争演替,茎直黄芪有可能被藏沙蒿取代。

西藏茎直黄芪生物学特性及危害调查

对西藏茎直黄芪的生物学特性和地理分布及危害情况进行了调查研究,并对同类有毒植物 在西藏的种类和分布情况进行调查,查出我区5种有毒黄芪和4种有毒棘豆,其中以茎直黄芪和毛瓣 棘豆分布最广,危害最大。

高寒草甸茎直黄芪物候对模拟季节性不对称增温的响应

植物物候是植物为适应其生长环境而呈现的节律性变化,是气候变化的最敏感指示器之一。为了探讨高寒植物对其生长环境水热变化的响应特征和机制,本研究利用开顶式模拟增温装置进行增温,以茎直黄芪(Astragalus strictus Grah.Ex Bunge)为研究对象,探讨其返青、枯黄物候和生长期长度对2016—2019年季节性不对称性增温(全年、生长季增温)的响应特征和机理。研究发现:茎直黄芪的平均返青物候在年际间差异极显著;2019年与其它年份比较显著提前了茎直黄芪的返青物候;增温未影响茎直黄芪返青物候;与对照比较,全年和生长季增温分别延迟了茎直黄芪枯黄期7.7和1.9 d,缩短了其平均生长期长度1.7和14.5 d;在水分充足条件下增温提前植物的返青物候,延长其枯黄物候,导致生长期延长,自然水分条件相对较低时则相反。综上分析,水分条件是该区域植物生长的主要限制因素之一。

光照和温度对茎直黄芪种子萌发的影响

为揭示西藏草地主要毒草茎直黄芪种子的萌发特性,在不同温度(10、15、20、25℃)和不同光照条件下,采用常规纸上发芽法,研究了茎直黄芪种子发芽率(GR)、发芽势(GE)、发芽指数(GI)、胚芽和胚根长度。结果表明,光照可以提高茎直黄芪种子的发芽率,且20℃条件下茎直黄芪种子萌发效果最好。