西南桦节间茎段植株再生体系的建立

[目的]探究西南桦间接器官发生过程的愈伤组织诱导、不定芽分化、生根诱导等各阶段的适宜培养基配方,建立西南桦高频再生体系,为其遗传转化和良种繁育提供理论依据和技术支持。[方法]以西南桦TC2号无性系的节间茎段为外植体开展愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根培养基筛选试验,并优化了预培养条件,揭示了愈伤组织诱导阶段基本培养基、激素浓度、暗培养时间,愈伤组织分化阶段激素组合,以及预培养条件等因素对不定芽分化的影响。[结果](1)预培养的适宜条件为:弱光培养(1000 lx)15 d后转至暗培养7 d,再正常光照(2000 lx)培养8 d,该条件下可获得适度黄化的植株,其平均株高和节间长度分别为6.6 cm和3.1 cm;(2)适合西南桦节间茎段愈伤组织诱导的培养基为WPB5+1.0 mg·L^(-1) TDZ+0.2 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),适宜暗培养时间为15 d;(3)适合愈伤组织分化的培养基为WPM+0.8 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) GA3+30 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8);(4)采用上述最优方案,其茎段诱导的愈伤组织分化率和净增殖系数为88.9%和6.2以上,平均每个预培养植株可产生56.8个不定芽;(5)适宜生根培养基为WPM+0.1 mg·L^(-1) NAA+20 g·L^(-1)蔗糖+5.8 g·L^(-1)琼脂(pH5.8),培养30 d后生根率可达100%。[结论]本研究完整构建了高效稳定、重复性好的西南桦节间茎段高频再生体系,该体系不仅愈伤组织分化率和增殖系数较高,还可提升节间茎段取材的效率,为今后开展西南桦组培快繁以及利用基因工程进行其遗传性状改良奠定了基础。

甘薯不同茎蔓节段栽培效果研究

为研究不同茎蔓节段的栽培效果,以4个甘薯品种1 m长的茎蔓为材料,按30 cm平均分为一(尖)、二(中)、三(近基部)3个苗段,分别测定其种植效果。结果表明,一段苗、二段苗的分枝数高于三段苗,产量也显著高于三段苗。所以,在甘薯生产上应尽量选用近顶端的一段苗、二段苗来进行栽培;提倡分段栽插,第三段苗不宜与第一、二段苗混合栽插,以便采用不同的栽培措施,提高甘薯的产量。通过试验为南方地区采用老茎或宿根育苗的甘薯生产提供科学依据。

椪柑成年态节间茎段再生体系的建立

为了建立椪柑成年态离体高效再生体系,比较了7种消毒方法的灭菌效果和4种培养基配方,结果表明:改良消毒法能有效降低成年态椪柑节间茎段的污染率(约12.2%)和死亡率(约27.2%),增加外植体的萌芽率(约12.8%)和成功率(约30.6%);MS+BA1mg/L+NAA0.5mg/L最适合椪柑成年态节间茎段生长,萌芽率达12%;另外,1cm左右的成年态接穗茎尖嫁接的成活率仅约10%,选用5mm以下的茎尖可明显提高嫁接成活率,使用1mm左右茎尖进行微芽嫁接成活率最高,这可能与柑橘接穗越大携带的内生菌越多有关.

柿树无节茎段培养和植株再生

柿树无节茎段培养和植株再生＊孔祥生张妙霞张国海张益民（河南省洛阳农业高等专科学校，４７１００３）柿树采用传统的嫁接方法，繁殖速度慢，优良品种难以快速推广。利用组织培养技术可加快繁殖速度，１９９２年，作者以柿树休眠芽为外植体，试管繁殖成功〔１〕，用柿树...

磨盘柿无节茎段不定芽的再生研究

以磨盘柿组培苗的无节茎段为外植体,通过3因素3水平正交试验,研究了基础培养基、激素种类及浓度对磨盘柿无节茎段不定芽再生的影响。同时,首次就无节茎段在组培苗上的着生节位、切段大小及接种方式对不定芽再生的影响进行了研究。结果表明:ZT对分化率和平均不定芽数的作用最大,基础培养基次之,IAA的作用最小。IAA对愈伤组织形成的作用大于ZT和基础培养基;组培苗顶端前2节位伸长无节茎段,切成4 mm左右,平放于培养基中可以获得最高的再生效率。组培苗无节茎段在MS(1/2N)+ZT4.0 mg/L+IAA0.1 mg/L培养基中、直接光照培养条件下分化率可达到83.65%,平均不定芽数为2.25。

纽荷尔脐橙成年态节间茎段遗传转化研究

建立柑橘成年态节间茎段的离体再生和遗传转化系统是实现柑橘转基因育种实用化的前提基础。本试验以纽荷尔脐橙成年态节间茎段为试材,初步建立了脐橙成年态节间茎段的离体再生和遗传转化系统。结果表明采用改良的预处理灭菌法对成年态茎段进行消毒处理,污染率明显降低。节间茎段在MS+3mg/L6-BA的培养基上,不定芽再生率较高。采用根癌农杆菌介导法将外源抗真菌病基因chit42导入其中,抗性芽通过二次嫁接后获得再生植株,PCR检测4株抗性植株中有2株扩增出该特异性条带,RT-PCR分析进一步确认外源基因chit42能够在转基因植株的基因组中表达。

冰糖橙成年态节间茎段遗传转化体系的建立

以柑橘成年态材料作为外植体进行遗传转化试验对遗传改良性状的早期评估是非常有利的,尤其是无核的品种如冰糖橙。本试验旨在建立一套冰糖橙成年态节间茎段再生及遗传转化体系,材料取自温室中嫁接于枳上的成年态植株。结果表明:新改良消毒处理可将外植体死亡率从27.2%降低为0,成活率从60%升高到80%左右;当采用MS+2ip 2 mg.L-1+2,4-D 2 mg.L-1共培培养基及MS+6-BA 3 mg.L-1再生培养基进行不定芽的诱导时,不定芽再生率最高为47.89%,在进行转化试验时,再生培养基需加入30 mg.L-1卡拉霉素和500 mg.L-1头孢霉素;采用3种方法将不定芽嫁接到14 d枳橙砧木上,其中微型嫁接中"改进的‘⊥’压法"可使嫁接成活率达到90%;通过上述方法,本试验将chit42基因转入冰糖橙中,并通过PCR检测,表明目的基因的成功导入,其转化率达到了7.6%。

铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究

目的：建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法：以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果：最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS＋ 2.0mg L-1 6-BA＋ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3％;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS＋ 1.5mgL-1 6-BA ＋0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS＋0.5mgL-1 IBA ＋0.5mgL-1 NAA＋ 0.2％ AC,组培苗生根多,生根率达到72％.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8％,蔗糖浓度均为2％,pH5.6 ～5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88％.结论：利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.

绞股蓝的茎段培养及试管繁殖

绞股蓝有节茎段试管快速繁殖技术研究结果表明 :适宜的芽诱导培养基为MS +BA 4.0mg/L +IAA 0 .5mg/L ;生根培养基为 1 / 2MS +NAA 1 .0mg/L。在适宜的培养条件下 ,绞股蓝的诱导增殖、继代培养、生根及移植成活都比较容易进行。繁殖苗木周期短繁殖速度快 ,繁殖系数高。

影响马铃薯单叶节茎段形成腋芽薯的因素

探讨东农303马铃薯组培栽植苗不同状态下的单叶节茎段对腋芽薯形成的影响,并对腋芽薯形成过程中叶片中叶绿素和N、P、K含量变化进行研究。结果表明,1.0倍液MS大量元素浇灌栽植的植株单叶节茎段形成腋芽薯效果最佳,移栽40d植株的上部单叶节茎段形成的腋芽薯重为0.79g;植株下部的茎段,扦插5d即可形成腋芽薯;去顶芽6d的植株上部茎段形成的腋芽薯重为0.93g。腋芽薯形成过程中,叶绿素a和b含量呈下降趋势,下降幅度较大时期分别为扦插后3~5d和4~5d,但叶绿素a和b间比值较平稳。扦插苗叶片中K含量最高,P含量最低,且腋芽薯形成过程中,N、P、K含量变化均呈下降趋势。

毕克齐山药离体培养诱导再生植株的研究

分别以毕克齐山药零余子、带节茎段为外植体,通过离体培养研究不同激素、不同浓度MS培养基对诱导再生植株的影响。结果表明:以零余子做外植体时,无附加激素的1/4MS培养基效果最好,再生植株诱导率达到40%。以节间为外植体时,MS+NAA2.0mg/L+KT0.5mg/L培养基再生植株诱导率达到95%。

非洲菊离体快繁条件的优化

以非洲菊无菌苗带节茎段为外植体,比较各种不同激素组合、浓度大小对非洲菊芽苗的诱导、增殖和生根的影响。结果表明,以0.8-1.2 cm的非洲菊带节茎段为外植体,可以不通过愈伤组织途径,直接诱导出芽。非洲菊带节茎段诱导芽苗的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1。较高浓度的6-BA有利于增殖系数的提高,但容易出现玻璃化现象,高浓度的NAA会使芽苗叶色退绿,故最适合的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA0.3 mg.L-1。非洲菊芽苗生根的浓度范围较宽,最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg.L-1。

参薯组织培养快繁技术

以参薯的带节茎段为外植体、MS为基本培养基,研究了参薯的组织培养快速繁殖技术。结果表明,不含任何激素的MS培养基能诱导外植体的腋芽萌发,萌芽率达100%;萌发的茎段在MS+AD80mg·L-1的培养基上增殖效果较好,50d可增殖4倍;继代培养得到的带节茎段在MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+AD80mg·L-1的培养基上能诱导出不定芽,将其芽点转接到MS+80mg·L-1AD培养基上,不定芽能抽生,且芽体健壮;不定芽在MS+NAA0.1mg·L-1的培养基上能形成完整植株,生根率达100%;V土:V沙:V草木灰=2:2:1的混合基质移栽参薯组培苗的效果较佳,移栽存活率可达88.3%。

墨西哥菊叶薯蓣离体快繁技术研究

报道了墨西哥菊叶薯蓣组培快繁的研究结果,试验表明:菊叶薯蓣组织培养较适宜的基本培养基是MS培养基;MS+6-BA0.5 mg.L-1能够诱导菊叶薯蓣嫩茎段萌发出新芽;增殖阶段以6-BA3.0 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1的增殖效果为好,在此基础上附加φ=10%的椰子水效果更好,增殖倍数可达3.9倍;生根阶段以1/2MS+IBA2.0 mg.L-1的生根效果为好,生根率可达90.6%,且植株生长健壮;试管苗在河沙与表土(V河沙∶V表土=1∶1)的混合基质中成活率较高,若管理得当成活率可达84.0%.

马铃薯试管苗快繁方法改进试验

以马铃薯品种大西洋、无花的试管苗为材料,将剪去根部和顶芽的多茎节切段,直接横放,接种于含有不同激素及配比的培养基中培养。研究结果表明,MS培养基附加1.0mg/L6-BA和1.0mg/LNAA,可使得每个腋芽快速萌发并生根、成苗,大大提高效率。

Efficient in vitro Propagation of an Endangered Species Kolkwitzia amabilis Graebn

This study developed an efficient in vitro cultivation and propagation sys- tem for an endangered species Kolkwitzia amabilis using nodal segments as ex- plants. Multiple shoots were induced through axillary bud formation. The highest fre- quency of multiple shoot induction was achieved when the nodal segment explants were incubated in Murashige and Skoog （MS） medium supplemented with 4.44 pM 6-benzyladenine （6-BA） in combination with 0.54 μM a-naphthaleneacetic acid （NAA）, followed by treatment with 4.44 μM 6-BA in combination with 0.27 μM NAA. Shoot multiplication could be induced in MS medium supplemented with stand-alone 6-BA or 6-BA in combination with indole-3-acetic acid （1.71 μM） or NAA （0.27 or 0.54 μM）, with 6-BA and either compound, exhibiting a stronger effect on shoot multiplication. The optimum combination of plant growth regulators for shoot multiplication was 4.44 μM 6-BA with 0.27 μM NAA. The maximum rooting percentage was obtained in a half-strength MS medium supplemented with indole-3-butyric acid alone and in com- bination with NAA and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, but the best combination of plant growth regulators for rooting was 1.48 μM indole-3-butyric acid with 1.08 μM NAA and 0.05 μM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. The rooted shoots were trans- ferred to a greenhouse with a success rate of 100%.

马铃薯试管苗“藕式”快速繁殖方法研究

传统的马铃薯脱毒苗切繁方法是将带有一个叶片的单茎节切段接种于培养基中培养成苗,本研究以马铃薯品种大西洋、无花的试管苗为材料,用剪去根部和顶芽的多茎节切段,接种于含有不同激素及配比的培养基中培养。结果表明,MS培养基附加1.0mg/L BA和1.0 mg/L的NAA,可使得每个腋芽萌发并快速生根、成苗,按照此程序继续进行继代扩繁,我们称之为"藕式"快速繁殖方法。该方法大大降低了成本,提高了效率。

大麻的离体培养与快速繁殖

以工业大麻品种云麻1号的带节茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究.结果表明,在培养基MS+6BA1.5～2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+GA3 0.1 mg/L中具有较好的萌芽效果,在MS+ZT 1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5～1.0 mg/L+GA3 0.1 mg/L中继代培养, 转入1/2MS+MS全量铁盐+IBA 2.5 ～3.0 mg/L诱导生根,即可获得完整植株.

银柴胡组织培养与植株再生体系的建立

银柴胡是著名的药用植物。以MS为基本培养基,银柴胡种子无菌培养获得外植体,通过添加不同浓度的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、6-呋喃氨基嘌呤(KT)、吲哚丁酸(IBA)等植物激素探究对银柴胡不定芽、不定根诱导的最佳激素配比,并进行炼苗与移栽试验。结果表明,银柴胡种子用15%NaClO处理10 min消毒效果最好,污染率仅为3.37%,萌发率为97.15%;不定芽诱导的最佳培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0 mg/L,诱导率为100%;诱导不定芽生根的最佳培养基为:1/2MS+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.5 mg/L,生根率可达90%;以组培瓶盖半开的方式炼苗5 d后移栽至基质土中,成活率达到100%。采用直接器官发生途径,成功建立了银柴胡组织培养与植株再生体系,研究结果为银柴胡良种繁育和遗传改良提供参考依据。

地皮消愈伤组织诱导及植株高效再生体系的建立

以地皮消(Pararuellia delavayana)无菌实生苗带叶茎尖和带节茎段为外植体,探讨不同植物激素种类及组合对愈伤组织诱导、芽丛发生及植株再生的影响。结果表明,地皮消组织培养和植株再生的适宜外植体为带节茎段,其在MS+1.0mg·L–1 6-BA+0.5 mg·L–1 NAA+0.1 mg·L–1 KT培养基中培养17天后,约85.38%的外植体产生出分化能力较强的愈伤组织;25天后约97.55%的愈伤组织开始分化出绿色芽丛;30天后不定芽分化系数可达15.38。不定芽增殖继代6次后出现玻璃化现象,且随着继代次数的增加,玻璃化现象加重,增殖率明显下降;采用MS和B5培养基交替使用可改善试管苗玻璃化现象并保持较高的增殖率。不定芽生根的适宜培养基为MS+0.5 mg·L–1 NAA,生根率可达100%。再生苗移栽成活率达95%以上。该研究建立了地皮消无性快速繁殖体系,为保护地皮消野生资源及种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了基础。