茜素红S荧光猝灭法测定壳聚糖含量

在pH 5.0的NaAc-HAc缓冲液中壳聚糖对茜素红S的荧光强度具有明显的猝灭作用,且猝灭程度F0/F与加入的壳聚糖浓度成线性关系,据此建立一种测定壳聚糖含量的荧光猝灭法。确定了最佳测定条件,线性回归方程为F0/F=-0.438 37+0.436 27c(mg·L-1),线性范围为0-16.667 mg·L-1,r=0.996,检测限为0.473 mg·L-1;平均回收率为100.60％,测定了样品中壳聚糖的含量,并考察了干扰因素对测定的影响。采用该方法可测定复杂样品中微量壳聚糖含量。

荧光法研究茜素红S与壳聚糖作用机理及其应用

应用荧光法研究了茜素红S和壳聚糖之间相互作用的机理,测得Kq=2.9581×1011L.(mol.s)-1;KA=3.26×103;n=102。建立了测定壳聚糖含量的茜素红S荧光猝灭方法,线性回归方程为F0/F=-0.43837+0.43627C(mg.L-1),线性范围为0.000～16.667mg.L-1,检测限为0.473;平均回收率为100.60%。

喀什河新疆裸重唇鱼标记方法的研究

2019年12月—2020年9月,对1+~2+龄体质量(3.06±1.18)g、2+~3+龄体质量(51.15±8.43)g和3+~4+龄体质量(124.21±22.87)g新疆裸重唇鱼(Gymnodiptychus dybowskii)眼后缘的透明表皮下,采用可见植入荧光标记(VIE)5 mm、在背鳍前皮下肌肉用金属线码标法(CWT)标记、用浓度100 mg/L茜素红S侵泡荧光标记法(ARS)和背鳍正下方的皮下肌肉中的被动集成应答器标记(PIT),以探究不同标记方法对新疆裸重唇鱼的适用性。标记后各组鱼单独饲养,ARS法的鱼养殖90 d,VIE、CWT和PIT标记法的鱼养殖270 d。首月后,2个月采样一次,测定各组的生长、存活率、标记保持率等。结果表明:ARS标记各组90 d的标记保持率在95%以上,但检测需解剖标记鱼;CWT组小型鱼270 d存活率为76%,存活个体主要为较大个体,对中、大型组存活率影响小;VIE组对小型鱼存活率的影响显著(P<0.05),对中、大型鱼影响小,270 d存活率在97%及以上;PIT组对小型鱼存活率影响显著(P<0.05),对中型鱼生长有一定影响。存活率、标记保持率及生长对比表明,今后大规模标记放流体质量5 g以下的新疆裸重唇鱼应选择ARS浸泡;5 g以上放流可选择CWT;40 g以上短期(150 d)标记可选择VIE;100 g以上小规模放流可选择PIT。

茜素红S对准噶尔雅罗鱼幼鱼的急性毒性与标记效果

采用单因子半静态急性毒性实验法研究了茜素红S(ARS)对准噶尔雅罗鱼幼鱼的毒性效应,旨在科学跟踪和监测增殖放流标记的准噶尔雅罗鱼,以期为ARS标记工作提供理论依据及数据参考。结果表明:在水温17℃~23℃条件下,准噶尔雅罗鱼幼鱼体重为(5.21±0.34)g,中毒症状主要表现为体表黏液腺分泌不断增多、眼球损伤、鳃丝发暗甚至粘连有红色絮状物、肠道充血出血、肝脏功能损伤、胆囊出血肿胀以至发紫发黑等。ARS对准噶尔雅罗鱼幼鱼的24 h、48 h、72 h、96 h的半致死浓度分别为377.2 mg/L、336.7 mg/L、306.2 mg/L、291.7 mg/L,安全浓度为80.5 mg/L。ARS浓度为200 mg/L时,96 h成活率为100%;ARS浓度为450 mg/L时,48 h全部死亡。随着浓度的增加,ARS对准噶尔雅罗鱼幼鱼的毒性也增加,呈正相关性。ARS浓度分别在250 mg/L、300 mg/L、350 mg/L时,中毒后存活的幼鱼经继续养殖30 d,平均摄食率为60.60%,平均成活率为59.91%,97尾幼鱼机体基本恢复活力,能够正常摄食生长。综上,ARS对准噶尔雅罗鱼幼鱼的毒性为低毒性,适合标记放流。ARS能在准噶尔雅罗鱼幼鱼的失耳石、微耳石上形成标记环,在可见光下标记环呈紫红色。ARS浓度为200 mg/L时(浸染24 h)标记效果强烈,幼鱼既未出现死亡,又能达到最佳染色标记效果。

鱼类双重荧光标记研究——以中华倒刺鲃幼鱼为例

为探究盐酸四环素(TCH)和茜素红S(ARS)对中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis Bleeker)的影响及标记效果,丰富鱼类荧光标记模式,研究使用TCH(100—500 mg/L)和ARS(100—300 mg/L)对中华倒刺鲃幼鱼进行双重浸染荧光标记,实验共设置5个处理组和1个对照组,浸染时间均为24h。结果显示,经90d的养殖实验后,标记鱼的耳石(包括矢耳石和星耳石)、倒刺、鳍条和鳍棘均能检测到双重荧光标记环,且TCH产生的黄色荧光环比ARS产生的红色荧光环更接近骨质结构内部。较高浓度处理组的矢耳石(≥300 mg/L TCH和≥150 mg/L ARS)、星耳石(≥300 mg/L TCH和≥200 mg/L ARS)和倒刺(400—500 mg/L TCH和150—300 mg/L ARS)中均能检测到明显的标记环(n≥2),但所有处理组的侧线鳞和非侧线鳞的荧光标记不明显(0≤n≤1)。经200—500 mg/L TCH和150—300 mg/L ARS处理的鳍条,及经300—500 mg/L TCH和200—300 mg/L ARS处理的鳍棘中可以同时检测到明显的TCH和ARS的标记环(n≥2)。此外,在整个实验中各处理组标记鱼与对照组相比,在生长和存活率方面均无显著性差异(P>0.05)。结果表明,使用TCH和ARS双重标记中华倒刺鲃幼鱼是可行的。双重荧光标记方法在水生生物标记回捕实验及实验性生物学研究方面具有潜在的应用前景。

荧光染料对短须裂腹鱼早期鱼苗的浸泡标记研究

为探究短须裂腹鱼(Schizothorax wangchiachii)早期鱼苗浸泡标记的合适荧光染料及标记条件,为短须裂腹鱼大规模标记放流及其效果评估提供参考,实验使用茜素络合物(AC)、茜素红S(ARS)、盐酸四环素(TC)、酸性茜素蓝B(AAB)、茜素黄GG(AYG)和钙黄绿素(CAL)溶液分别浸泡标记短须裂腹鱼早期鱼苗(仔、稚鱼),实验结束后摘取耳石检测荧光标记。结果显示:AC、ARS均可在短须裂腹鱼耳石上形成荧光标记,标记在绿光下最明显,呈橘红色;TC、AAB、AYG、CAL均未形成有效的荧光标记;AC标记造成的死亡率和标记质量随着溶液浓度、浸泡时间的增加而升高,随着鱼体全长的增加而降低;AC标记20日龄短须裂腹鱼结束16 d后,与空白对照组相比,除浓度300 mg/L、浸泡时间24 h的这组全长显著较低外,其他各组无显著差异;AC及ARS重复标记均可形成两个橘红色标记环,首次标记时AC造成的死亡率低于ARS,再次标记时前者高于后者。综合考虑标记质量、死亡率及对生长影响等多方面因素,本研究推荐使用AC或ARS浸泡标记短须裂腹鱼早期鱼苗,具体条件为:溶液浓度50~100 mg/L,浸泡时间12~24 h。