滇池金线鲃(Sinocyclocheilus grahami)耳石的茜素红及茜素络合物标志

该文使用不同浓度梯度(50~200 mg/L)和浸泡时间(4~24 h)的茜素络合物(ALC)及茜素红(ARS)水溶液对6、20及90日龄滇池金线鲃(Sinocyclocheilus grahami)仔稚鱼进行标志。两种标志物均能在其耳石上形成深红色标记环带,510~560 nm绿色激发光下,标志带呈猩红色荧光反应。50 mg/L ALC或ARS溶液浸泡6日龄仔鱼8 h、50 mg/L ALC溶液或100 mg/L ARS溶液浸泡20日龄仔鱼24 h及100 mg/L ALC或150 mg/L ARS溶液浸泡90日龄稚鱼24 h,可见光下即可见清晰深红色标记带。50 mg/L ARS或ALC溶液浸泡6日龄仔鱼4 h或浸泡20、90日龄仔鱼24 h,绿色激光下即绿色可见猩红色标记带。且以上浸泡条件均可保证100%标记率和存活率。

茜素络合物浸泡标记秦岭细鳞鲑发眼卵及仔鱼耳石

采用茜素络合物(ALC)在秦岭细鳞鲑(Brachymystax lenok tsinlingensis)发眼卵和仔鱼阶段进行浸泡标记试验,为确定合适浸泡浓度和持续浸泡时间,试验设置了6个的浓度组和4个时间梯度组。结果显示:在荧光显微镜下观察被浸泡的仔鱼和经浸泡处理的发眼卵而出膜后的仔鱼,其耳石都出现橘红色荧光标记。浸泡发眼卵组最适处理条件是茜素络合物溶液浓度30 mg/L持续浸泡18 h,标记率100%,孵化率91%,出膜后15 d仔鱼存活率91%,标记环"非常明显";仔鱼浸泡组最适处理条件是茜素络合物溶液浓度120 mg/L持续浸泡12 h,标记率83.3%,处理15 d后仔鱼存活率92.3%,相比对照组统计检验无差异(P<0.05),标记环"较明显"。相比上述两种方法,浸泡发眼卵试验组相比浸泡30日龄仔鱼试验组所需要的茜素络合物(ALC)溶液浓度更低,而且在标记成功率、标记效果、标记后仔鱼存活率以及标记成本等方面也更为理想。因此,用茜素络合物(ALC)在秦岭细鳞鲑发眼卵阶段进行荧光标记是可行的,这种方法也可在其它鱼类标记中尝试,同时将人工繁育鱼苗与野生鱼苗加以区别,有利于开展人工增殖放流效果及早期生活史等研究。

茜素络合物(ALC)标记翘嘴鲌耳石的效果研究

用翘嘴鲌稚鱼作为实验材料,用茜素络合物作为标记材料,浸泡标记翘嘴鲌,通过测定翘嘴鲌稚鱼的存活率和耳石的标记率等,讨论不同浓度的茜素络合物对翘嘴鲌耳石的标记效果和对其生长和存活的影响,确定合适的浸泡标记时间及浓度,为翘嘴鲌的增殖放流提供理论依据和实际参考.

茜素络合物对鲤仔鱼耳石标记特征研究

利用100 mg/L的茜素络合物(alizarin complexone,ALC)对鲤仔鱼进行48 h的水环境浸泡标记,以探讨该ALC标记方法的特征,及其对矢耳石、星耳石和微耳石的标记效果以及鱼体ALC浸泡、续养恢复与耳石ALC标记区域形成和消失的时滞进行研究。结果显示,3种耳石在可见光和荧光下均能检测到明显的标记环。其中星耳石的标记效果最佳,微耳石次之。耳石上荧光信号出现和消失的时间与鱼体ALC浸泡开始和结束的时间均存在1 d的时滞。此外,浸泡标记过的鲤仔鱼在进行了长达50 d的续养恢复后,其耳石上的ALC标记环仍清晰可见。研究表明,ALC标记法所形成的标记环在耳石上可长期存在,使用ALC对鲤仔鱼进行生态标记具有很强的可行性。

茜素络合物在青鱼幼鱼耳石上的标记效果评价

放流标记技术研究是支撑增殖放流效果评估的重要内容。该研究用质量浓度为100 mg·L^(−1)的茜素络合物(ALC)对约2月龄的青鱼(Mylopharyngodon piceus)幼鱼进行48 h浸泡,随后移入正常水体中恢复续养20 d。对其3种耳石在可见光和不同的激发光下进行比较分析,评价了茜素络合物在不同耳石上的沉积情况与标记效果。结果表明,通过在可见光和不同的激发光下进行观察,其3种耳石上均可见明显的标记区,标记率达100%。在对标记鱼恢复续养20 d后发现,耳石上的荧光标记区强度仍很高,表现出了较好的标记效果。此外,相关标记的最佳检测光源为蓝色激发光,绿色激发光次之。微耳石是用于青鱼幼鱼耳石荧光标记观察的最适类型,同时也是用于时滞检测的最适类型,其次是星耳石。此外,将鱼体浸泡入茜素络合物溶液中至其在耳石上形成标记沉积,以及将鱼体移出浸泡溶液至其耳石上标记区域消失,均存在1 d时滞。

草鱼仔鱼耳石茜素络合物标记特征研究

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国主要增殖放流经济鱼种之一,探索有效的标志方法对其增殖放流的技术保障和效果评价无疑至关重要。本研究对草鱼仔鱼耳石进行了1 d茜素络合物(ALC)荧光标记,以确认该方法的可行性及适宜条件。结果显示,微耳石、矢耳石和星耳石均能被标记。标记环在可见光及荧光下均能被观察到。其中,后者使用蓝色激发光(WBS)观察效果最佳。总体上,微耳石的标记效果最好,矢耳石次之。ALC浸泡对鱼体的生存及生长无显著影响,耳石上荧光信号出现和消失与鱼体开始浸泡和结束均存在约12h的时滞。浸泡标记过的实验鱼在经过长达60 d的恢复续养后,标记环仍清晰可见,表明ALC标记效果明显且可长期存在。该方法对草鱼仔鱼的增殖放流标记具有较强的可行性。

茜素络合物对青海湖裸鲤幼鱼的耳石标记研究

青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)属鲤科、裂腹鱼亚科、裸鲤属,是青海湖中唯一的水生经济鱼种,也是国家重点保护物种,在青海湖鱼鸟共生生态系统中发挥重要的作用。由于生态环境的恶化以及过度捕捞等因素的影响,其种群构成日益低龄化,资源面临枯竭,已严重影响青海湖及周边流域生态系统的良性循环(张金兰等,1997;史建全等,2016)。

茜素络合物对鳙耳石的标志效果研究

利用不同浓度梯度(50~150mg/L)的茜素络合物(ALC)水溶液对20日龄的鳙幼鱼浸泡8h进行标志。结果显示,ALC溶液浓度不高于100mg/L时,鳙幼鱼存活率为100%,150mg/L浓度下幼鱼全部死亡。茜素络合物在其耳石上能形成标记环带,随着ALC溶液浓度的增加,在可见光下标记色越来越明显,50mg/L ALC溶液中幼鱼耳石略见淡红色标记,75mg/L浓度组有清晰的淡红色标记环,100mg/L ALC溶液中幼鱼标记环带明显,鳙幼鱼最适的ALC标记浓度为100mg/L。

使用茜素络合物标记鳙耳石

探究茜素络合物(Alizarin complex,ALC)对鳙(Aristichthys nobilis)的标记效果,评估其作为鳙增殖放流检测手段的价值,为鱼类的大规模标记提供理论依据和技术支撑。选用不同质量浓度的ALC(50、100和200 mg/L)分别对不同饲养密度(20、40和50尾/L)的鳙进行24 h和48 h的浸泡标记,确定最适标记条件后进行增殖放流。结果表明,ALC对鳙的最适标记条件是:质量浓度100 mg/L,浸泡时间48 h,饲养密度50尾/L;微耳石是检测ALC对鳙荧光标记最适宜的耳石类型,且在蓝色荧光下观察效果最佳。标记的鳙在为期1 a的灞河放流过程中生长情况良好,标记环清晰可见,说明ALC标记法标记效果稳定,可用于对鳙增殖放流的检测。

醋酸洗必泰与茜素络合物显色反应的研究

目的： 通过醋酸洗必泰与茜素络合物的显色反应来测定洗必泰栓中醋酸洗必泰的含量。方法： 用７２１ 型分光光度计， 利用分光光度法测定洗必泰的药物含量。结果： 在乙醇—丙酮介质中醋酸洗必泰与茜素络合物发生显色反应， 反应产物的λｍ ａｘ＝ ５３５ｎｍ ， 表观摩尔吸光系数为１２７×１０３ Ｌ·ｍ ｏｌ－ １ ·ｃｍ － １， 相对标准偏差为０７％ （ｎ＝ ６）， 药物浓度在２０～１００ｍ ｇ· Ｌ－ １ 范围内呈线性关系。结论： 本方法操作简便， 条件易于控制， 灵敏度较高， 对药物的测定结果令人满意。

茜素络合物对唐鱼耳石标记效果以及生长和存活率的影响

用茜素络合物（ALC）对唐鱼（Tanichthys albonubes）进行荧光标记,通过测定唐鱼耳石的标记率、死亡率、SGR和DWG等指标,讨论不同浓度ALC对唐鱼耳石标记效果和对其生长和存活的影响,探讨应用该标记技术追踪唐鱼野外种群迁移行为的可行性。结果表明：在温度28~30℃,浓度50 mg·L-1、80 mg·L-1茜素络合物溶液中浸泡24 h,唐鱼仔鱼、稚鱼死亡率为0,其中80 mg·L-1浓度处理组耳石荧光标记环检出率为100%,而在100mg·L-1浓度下,仔、稚鱼死亡率均达到80%;幼鱼在浓度为80、100 mg·L-1条件下无死亡,其中100 mg·L-1浓度处理组耳石标记环检出率为100%,而150 mg·L-1浓度下幼鱼死亡率为44%;成鱼在100、150 mg·L-1浓度下无死亡,且耳石标记率均为100%,而在200mg·L-1浓度下成鱼死亡率达到100%;此外,稚鱼在80 mg·L-1最适浓度下浸泡24 h后继续饲养90 d,标记组和对照组死亡率均为0,两组体质量、SGR和DWG差异不显著;唐鱼仔稚鱼、幼鱼和成鱼耳石标记的最适茜素络合物浓度分别为80、100和150 mg·L-1。

铜(Ⅱ)-茜素红S络合物与蛋白质作用的光谱性质及应用研究

在pH 3.80～4.20的Clark-Lubs缓冲介质中,蛋白质与Cu(Ⅱ)-ARS络合物作用,其吸收光谱发生大幅度变化,生成的深红色三元复合物,λmax为538nm,比试剂本身红移118 nm,比络合物λmax红移30 nm.研究了有生物大分子参与的三元复合物反应体系的光谱性质及其影响因素,解释了初步机理,在确定的最佳实验条件下,建立了以Cu(Ⅱ)-ARS络合物为光谱探针光度法测定人血清蛋白质的新方法.蛋白质在0～300mg/L的范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数ε538=2.37×105L·mol-1·cm-1(人血清白蛋白).用于实际人血清样品的测定基本无干扰,灵敏度比茜素红S探针法高23.7倍.

血红蛋白与铜(Ⅱ)-茜素红S络合物相互作用的研究

采用UV-Vis光谱法,研究在pH4·2的H3PO4-KH2PO4缓冲溶液中血红蛋白(Hb)与铜(Ⅱ)-茜素红S(ARS)络合物的反应。结果表明:Hb与Cu(Ⅱ)-ARS络合物相互作用形成红色的离子缔合复合物,该复合物的最大吸收波长为537nm。在此波长下测得复合物的组成为nHb:nCu(Ⅱ):nARS=1:4:8,表观摩尔吸光系数为1·52×105L·mol-1·cm-1,Hb浓度在1·0×10-7～2·0×10-6mol·L-1范围内与吸光度呈线性关系,回归方程为A=0·0269+151675c(mol·L-1),相关系数r=0·9972。考察了溶液酸度、试剂用量、反应时间与温度、离子强度、表面活性剂等因素对Hb-Cu(Ⅱ)-ARS复合物形成的影响,并对反应机理做了初步探讨,发现Hb与Cu(Ⅱ)-ARS络合物之间主要以静电引力相结合。进一步考察了常见氨基酸及金属离子对Hb-Cu(Ⅱ)-ARS复合物形成的影响。

钒-茜素S络合物在碳糊电极上的吸附伏安法研究

研究了钒-茜素S络合物在碳糊电极上的吸附伏安行为。在pH5.1的NH_4OAcHOAc缓冲溶液中,钒-茜素S络合物在-0.52V(vs.SCE)产生一灵敏的吸附还原峰,峰高与钒的浓度在2.0×10^(-9)～1.0×10^(-7)mol·L^(-1)范围内呈线性关系,捡出限为8.0×10^(-10)mol·L^(-1)(富集240s)。讨论了电极反应机理,方法已用于水样中痕量钒的测定,结果满意。

电化学研究茜素络合剂-镨(Ⅲ)二元络合物与蛋白质相互作用

用电化学方法对茜素络合剂-镨（Ⅲ）二元络合物与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用进行了研究，发现在pH4．9的六次甲基四胺[（CH2）5N4]缓冲液中，茜素络合剂-镨（Ⅲ）络合物能与牛血清白蛋白生成一种非电活性的络合物，导致茜素络合剂-镨（Ⅲ）的峰电流降低，峰电流降低值△ip在一定范围内与BSA的浓度呈线性关系，线性范围为1．5～17．5mg·L^-1，相关系数为0．997，检出限为1．5mg·L^-1，RSD为2．1％，回收率为102％，该法可用于蛋白质的测定。

铁(Ⅲ)-茜素红S络合物光度法测定蛋白质

在pH为3．6的Clark—Lub’s（C—L）缓冲溶液中，蛋白质与Fe（Ⅲ）-茜素红S络合物相互作用生成三元复合物，复合物的最大吸收峰波长A=567nm，考察了反应体系的各个影响因素，并对反应机理进行了初步讨论。在确定的最佳试验条件下，BSA浓度在0—200mg／L、HSA在0～125mg／L范围内符合比尔定律，对BSA和HSA的摩尔吸光系数ε567分别为1．61×10^5和1．75×10^5 L·mol^-1·cm^-1，据此建立了一种测定蛋白质的新方法，用于人血清样品中总蛋白的测定，结果与凯氏定氮法基本一致。

稀土-茜素络合剂-乙二胺体系极谱络合吸附波的研究

在pH 10.6的乙二胺底液中,可获得稀土-茜素络合剂的络合吸附波。可用于测定发光材料BaCl F:Gd中的钆含量。测得电活性络合物为RE(Ⅲ):ALC=1:2的单核络合物。

用荧光物质浸泡标记胭脂鱼仔、稚鱼耳石

用茜素络合物和盐酸四环素溶液分别对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)仔、稚鱼浸泡标记,结果表明,100～200mg/L的茜素络合物溶液浸泡24h对胭脂鱼仔、稚鱼耳石有很好的标记效果.相同浸泡浓度下,随着日龄的增长,耳石上的荧光反应强度降低.三对耳石中,微耳石和矢耳石对茜素络合物较敏感,星耳石敏感性则较低.盐酸四环素溶液对仔、稚鱼耳石的标记效果很差,浸泡液浓度为100mg/L和120mg/L时,仅能在微耳石上检测到较弱的荧光标记,而150mg/L及以上浓度的浸泡液对稚鱼有较高的致死作用.因此,茜素络合物是对胭脂鱼早期鱼苗进行化学标记比较合适的荧光物质,而盐酸四环素不适于标记该鱼的耳石.在对标记鱼进行荧光检测时,矢耳石和微耳石是适合的材料.

用荧光物质浸泡标记重口裂腹鱼仔鱼耳石

用荧光物质对重口裂腹鱼仔鱼浸泡标记表明,200～300mg/L的茜素络合物溶液浸泡12h对重口裂腹鱼仔鱼耳石有很好的标记效果,荧光和可见光下均能检测到明显的标记环;100～150mg/L的标记能检测到荧光标记环,但可见光下标记环较微弱。相同浸泡时间,随着浸泡浓度的增加,耳石上标记环强度增加;相同浸泡浓度,随着浸泡时间的增加,耳石上标记环强度增加。3对耳石中,微耳石和矢耳石对茜素络合物较敏感,星耳石敏感性较低。盐酸四环素的标记效果很差,浸泡浓度为50～160mg/L时,3对耳石上均不能检测到标记环,同时110～160mg/L的盐酸四环素浸泡液对仔鱼有较高的致昏或致死作用。因此,茜素络合物是对重口裂腹鱼鱼苗进行化学标记比较合适的荧光物质,而盐酸四环素不适合于标记该鱼的耳石。