加味茵陈四逆汤对胆道闭锁肝纤维化幼鼠IL-17、IL-6与Th17及其特异性转录因子RORγt之间的影响

目的 探讨加味茵陈四逆汤对胆道闭锁(Biliary atresia, BA)肝纤维化幼鼠白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)与辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)及其特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RetinoicAcid-relatedOrphangammat, RORγt)之间的影响。方法 雄性SD大鼠幼鼠48只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。建立幼鼠胆道结扎模型,5 d后进行灌胃给药。用药10 d后,计算肝脏指数;各组行苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin, HE)及Masson染色观察肝组织病理改变;采用酶联免疫吸附试验测定血清IL-17和IL-6水平;采用流式细胞仪测定Th17细胞占CD+4T细胞比例;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)法测定RORγt mRNA表达。结果 模型组及各给药组肝脏指数高于假手术组(P<0.05);各给药组肝脏指数低于模型组(P<0.05);各给药组肝纤维化程度较模型组减轻;模型组及各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达高于假手术组(P<0.05);各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达低于模型组(P<0.05);中剂量组和高剂量组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD+4T细胞比例和RORγt mRNA表达低于熊去氧胆酸组和低剂量组(P<0.05)。结论 加味茵陈四逆汤可有效改善BA幼鼠肝纤维化程度,可能是通过降低血清IL-17和IL-6水平,从而降低Th17细胞水平及下调RORγt表达来发挥作用的。

加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠Smad7和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)基因表达的影响。方法:雄性ICR小鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。采用腹腔注射30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,计算肝脏指数;试剂盒检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;各组行HE染色观察肝组织病理改变并进行肝纤维化分级;RT-q PCR法检测肝组织Smad7、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA表达。结果:(1)加味茵陈四逆汤中、低剂量组肝脏指数和HA、LN水平较模型组显著降低(P<0.05);(2)加味茵陈四逆汤各剂量组肝纤维化较模型组减轻(P<0.05);(3)与模型组比较,各给药组CollagenⅠmRNA表达显著降低(P<0.05),除加味茵陈四逆汤高剂量组外,各给药组Smad7 mRNA表达显著升高(P<0.05),除加味茵陈四逆汤低剂量组外,各给药组CollagenⅢmRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠Smad7表达,抑制CollagenⅠ、CollagenⅢ表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响

目的:观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)基因表达的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)腹腔注射建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,各组行HE染色,观察肝脏病理组织学改变。RT-q PCR法检测MMP1、TIMP1和TIMP2 mRNA表达。结果:(1)病理结果显示模型组肝纤维化明显,中药高、中、低剂量组较模型组纤维化减轻;(2)MMP1 mRNA模型组表达量与正常组比较明显减少(P<0.05),与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少(P<0.05);(3)TIMP1 mRNA、TIMP2 mRNA模型组表达量比正常组明显增多(P<0.05),与阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达,抑制TIMP1、TIMP2表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。

加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠TGF-β_1/Smads通路的影响

目的:探讨加味茵陈四逆汤预防肝纤维化过程中对TGF-β_1/Smads通路的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.1 g/kg)阳性对照组及加味茵陈四逆汤高(41.6 g/kg)、中(20.8 g/kg)、低(10.4 g/kg)剂量组,每组8只。除正常对照组外,其余各组采用腹腔注射30%CCl4复制肝纤维化模型,造模同时给予相应药物,正常对照组与模型组给予等体积蒸馏水。给药14 d后,比较小鼠体质量和肝脏组织病理学改变;试剂盒检测血清ALT、AST水平;采用RT-q PCR检测肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低,血清ALT、AST水平显著升高,肝组织呈明显的纤维化改变,肝组织TGF-β_1、TβRⅠ、Smad3 mRNA表达显著升高。加味茵陈四逆汤能不同程度提高模型小鼠体质量,降低血清ALT、AST水平,改善肝组织病理学改变,并降低肝组织TβRⅠ、Smad3 mRNA表达。结论:加味茵陈四逆汤能预防CCl4诱导的肝纤维化,其作用机制可能与下调肝脏组织TβRⅠ、Smad3 mRNA的表达,从而阻滞TGF-β_1/Smads通路转导有关。

茵陈蒿汤和茵陈四逆汤抗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的方证比较研究

目的:通过观察茵陈蒿汤和茵陈四逆汤对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化模型的效应,探讨该模型的证候病机。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、茵陈蒿汤组和茵陈四逆汤组,采用腹腔注射DMN 4周诱导大鼠肝纤维化,于造模第3周开始,各给药组在继续造模的同时予以相应的药物干预,正常组和模型组给以等量生理盐水。4周末杀鼠取材,观察各组大鼠一般情况、肝组织病理学、羟脯氨酸(Hyp)含量及肝功能变化。结果:与正常组相比,模型组出现显著的肝损伤和肝纤维化,肝组织Hyp含量显著升高(P<0.01),肝功能显著异常(P<0.01)。与模型组比较,茵陈蒿汤可显著改善肝组织病理,降低肝组织Hyp含量及肝脏胶原增生程度(P<0.01),显著改善肝功能(P<0.05或P<0.01);而茵陈四逆汤不但不能改善任何指标,而且还加重了DMN诱导的大鼠肝脏的炎症和肝纤维化。结论:茵陈蒿汤对DMN诱导的大鼠肝纤维化模型的治疗效果显著优于茵陈四逆汤;DMN诱导的大鼠肝纤维化模型在其形成期的病机以"湿热内蕴"为主,且湿热并重,与茵陈蒿汤方证高度相关。

加味茵陈四逆汤含药血清影响肝星状细胞胶原蛋白表达的机制研究

目的:探讨加味茵陈四逆汤对大鼠肝星状细胞Collagen1及MMP-1/TIMP-1的影响。方法:以HSC-T6细胞株为主要研究对象,将其依据实验目的分为6组,分别为空白组,模型组,阳性药物组,中药高、中、低剂量组。除空白组无需特殊处理外,其余5组给予含药血清培养同时给予细胞因子TGF-β1促进细胞增殖,培养48h后收集细胞,提取蛋白,并采用Western blot方法检测各观察组细胞Collagen1及MMP-1/TIMP-1的表达,并比较其差异。结果:与空白组比较,模型组MMP-1/TIMP-1、Collagen1蛋白表达均升高(P<0.05);与模型组比较,加味茵陈四逆汤中、低剂量组MMP-1蛋白表达升高(P<0.05),而Collagen1在中药中、低剂量组表达明显降低(P<0.05),TIMP-1在中药低剂量组明显降低(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤含药血清可能通过提高MMP-1的表达以及降低TIMP-1从而降低胶原蛋白表达,最终延缓肝纤维化的发生。

茵陈四逆汤对阴黄证模型大鼠的治疗作用研究

目的:建立中医阴黄证动物模型,系统评价茵陈四逆汤对大黄、乙醇、α-异硫氰酸萘酯(ANIT)三因素复合诱导的大鼠阴黄证的治疗作用。方法:70只Wistar大鼠随机分为7组,分别为空白组、模型组、模型恢复组、茵陈四逆汤低剂量组、茵陈四逆汤中剂量组、茵陈四逆汤高剂量组、阳性药对照组。观察大鼠一般生物学状态,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-L-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、总胆汁酸(TAB)、血清白介素2(IL-2)的活性和效价以及环磷酸腺苷与环磷酸鸟苷比值(cAMP/cGMP),同时观察大鼠肝脏组织病理学情况。结果:阴黄证大鼠出现明显阳虚表现。模型组、模型恢复组ALT、AST、ALP、γ-GT、TB、DB、TAB、IL-2活性显著高于正常对照组(P<0.01),治疗组上述指标,与模型组及模型恢复组比下降显著(P<0.01);模型组、模型恢复组cAMP/cGMP比值显著低于正常对照组(P<0.01),治疗组cAMP/cGMP比值与模型组及模型恢复组比升高显著(P<0.01)。同时,组织病理学也得出上述相同的结论。结论:茵陈四逆汤对阴黄证大鼠具有良好的治疗作用。

川芎嗪联合加味茵陈四逆汤防治胆道闭锁肝门空肠吻合术后肝纤维化临床观察

目的观察川芎嗪联合加味茵陈四逆汤防治胆道闭锁肝门空肠吻合术后肝纤维化的临床疗效。方法将40例胆道闭锁肝门空肠吻合术后患儿分为试验组和对照组各20例,对照组予西医基础治疗,试验组在基础治疗的基础上加用静脉滴注川芎嗪及服用加味茵陈四逆汤中药汤剂,观察治疗前后两组患儿血清肝纤维化指标[透明质酸(hyalaronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PC-Ⅲ)]及肝脾彩超检查(肝门静脉主干直径、肝门静脉血流量、脾厚度及脾静脉直径),以评价其疗效。结果两组治疗后血清PC-Ⅲ、HA、LN、Ⅳ-C含量均较治疗前明显下降(P<0.05);试验组PC-Ⅲ、HA、LN、Ⅳ-C的治疗前后差值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组治疗后肝门静脉主干直径、肝门静脉血流量、脾厚度、脾静脉直径与治疗前比较均明显降低(P<0.05),对照组治疗后脾静脉直径、肝门静脉血流量与治疗前比较明显降低(P<0.05);试验组肝门静脉主干直径、肝门静脉血流量及脾厚度的治疗前后差值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相对于西医基础治疗,加用川芎嗪联合加味茵陈四逆汤治疗胆道闭锁术后患儿,能更显著地改善胆道闭锁术后肝纤维化。

茵陈四逆汤对ANIT诱导肝内胆汁淤积症小鼠肝损伤保护作用及机制研究

目的探讨茵陈四逆汤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积模型小鼠肝损伤保护作用及其机制。方法雄性C57BL/6小鼠灌胃给予茵陈四逆汤,每日1次,连续10 d,用ANIT油溶液(75 mg/kg)造模,采集血液和肝脏样品测定血生化、肝脏病理、肝脏中胆汁酸含量以及炎症通路相关蛋白表达量。结果与模型对照组比较,茵陈四逆汤组小鼠肝脏坏死明显好转,炎性细胞浸润减少,血浆TBA、TBiL、DBIL、IBIL、AST、ALT和ALP明显下降,肝脏游离和结合胆汁酸均明显减少(P<0.05),肝脏IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论茵陈四逆汤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积模型小鼠肝损伤具有保护作用,其机制可能与其减少肝内胆汁酸淤积和抑制炎症反应有关。

茵陈四逆汤的化学及药理学特性研究现状与未来研究构想

本文通过国内外关于茵陈四逆汤研究的文献回顾,综述了茵陈四逆汤及其组方药物的化学成分、药理作用及临床应用等现代研究的现状,并对如何在药效物质基础层次诠释茵陈四逆汤及治疗黄疸证类方的配伍规律进行了展望。

茵陈四逆汤在阴黄证治疗体系中的历史沿革考辨

本文以历代医家著述为主线,考证了茵陈四逆汤伴随着阴黄证诊治体系的萌芽、争鸣和完善,也经历了从无到有、由为人质疑到广为接受的渐进发展历程,说明茵陈四逆汤在阴黄证治疗体系中作为基础方剂的重要地位。

茵陈四逆汤治疗胆道感染287例

采用茵陈四逆汤(茵陈、白花蛇舌草、郁金、柴胡、枳实等)治疗胆道感染287例,临床治愈率86％,排石率92.2％。提示本法有清利湿热、理气排石作用。

加味茵陈四逆汤干预肝纤维化/肝硬化的网络药理学作用机制探讨

目的基于网络药理学方法探讨加味茵陈四逆汤(JWYCSNT)干预肝纤维化/肝硬化的作用靶点及通路,预测其潜在作用机制。方法基于TCMSP数据库提取加味茵陈四逆汤的有效活性成分及作用靶点,通过人类基因数据库(GeneCards)获取肝纤维化/肝硬化治疗靶点,并利用R语言筛选共同靶点;使用Cytoscape软件构建"药物有效活性成分-疾病靶点"可视化调控网络图,利用STRING数据库构建蛋白互作网络图(PPI),然后运行R语言对PPI进行核心蛋白的筛选;最后,通过R语言对共同靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共获得132个有效活性成分,93个共同靶点;核心蛋白主要包括MAPK8/JNK、PPARG、RELA/NF-κB等;GO功能富集分析涉及101个,影响核受体活性、基因转录等过程;KEGG通路富集分析得出114条通路,涉及细胞凋亡、乙型肝炎、丙型肝炎、肝细胞性肝癌等通路,涵盖了MAPK、NF-κB、PPAR、Wnt等肝纤维化重要通路。结论通过网络药理学的方法,证实加味茵陈四逆汤具有多成分、多靶点、多通路的作用特点,并预测其干预肝纤维化/肝硬化的潜在作用机制,可为基础及临床研究提供参考依据。

基于方证辨证之茵陈四逆汤治疗慢性乙型肝炎阴黄患者临床观察

目的评价茵陈四逆汤治疗慢性乙型肝炎(CHB)阴黄患者的临床疗效。方法采用随机数字表法将60例CHB患者分为两组,给予30例对照组患者降酶、退黄、抗病毒治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用茵陈四逆汤治疗。结果在治疗8 w末,观察组临床总有效率为96.7%,显著高于对照组的86.7%(P<0.05);观察组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平分别为[(24.0±9.3) U/L、(21.4±8.3) U/L和(26.9±7.8)μmol/L],显著低于对照组[分别为(39.5±8.8) U/L、(33.3±8.5) U/L和(60.6±5.0)μmol/L,P<0.05]。结论在综合治疗的基础上加用茵陈四逆汤治疗CHB阴黄证患者具有显著的临床疗效。

基于网络药理学探讨茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭的分子机制

目的:通过网络药理学和分子对接的方法,初步探讨茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭的潜在机制。方法:从TCMSP数据库收集茵陈四逆汤中各药物的成分和作用靶点;Genecards、OMIM和TTD数据库收集慢加急性肝衰竭相关靶点;STRING数据库构建蛋白相互作用网络,Metascape数据库进行基因本体(GO)分析和基因组百科全书(KEGG)分析,以明确其参与重要生物过程及通路。结果:共筛选出131个茵陈四逆汤中的药物活性成分与236个治疗慢加急性肝衰竭的治疗靶点。PPI网络分析茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭可能与JUN、TNF、IL1B、IL6、STAT3、IL4、CXCL8、CCL2、MAPK3、RELA等蛋白有关,GO和KEGG结果显示茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭的靶点显著富集于AGEs-RAGE通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号等通路。结论:网络药理学初步探讨了茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭的作用机制,为慢加急性肝衰竭治疗提供新思路。

加味茵陈四逆汤治疗药物性肝损害30例总结

目的:观察加味茵陈四逆汤对药物性肝损害的临床疗效。方法:治疗组30例服用加味茵陈四逆汤,对照组30例服用肝泰乐。结果:治疗组的总有效率与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:加味茵陈四逆汤对药物性肝损害具有明显的防治作用。

茵陈四逆汤联合经内镜逆行性胰胆管造影治疗胆总管结石的临床研究

目的:探讨茵陈四逆汤对经内镜逆行性胰胆管造影(Endoscopic Retrograde Cholangiopancreatography,ERCP)术后患者肝功能恢复、胆汁引流及症状改善的影响。方法:将60例单纯胆总管结石拟行ERCP患者随机分为治疗组(30例)和对照组(30例),对照组:接受ERCP+术后常规治疗。治疗组:在对照组基础上,术后第2天予以茵陈四逆汤口服。观察对比两组治疗前后中医症状积分、转氨酶指标、胆汁生化指标、胆汁引流量的变化、随访6个月的结石复发情况。结果:治疗组术后6 d中医症状积分低于同期对照组水平,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组术后6 d转氨酶水平[谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-Glucosyltransferase,γ-GT)]、胆汁生化水平[总胆红素(Total Bilirubin,TB)、直接胆红素(Direct Bilirubin,DB)、总胆汁酸(Total Biliary Acid,TBA)]均低于同期对照组水平(P<0.05);治疗组术后4 d胆汁引流量多于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组术后6 d引流量少于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组术后结石复发率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:茵陈四逆汤联合ERCP治疗胆总管结石疗效显著,可以促进术后肝功能恢复及胆汁引流,缩短住院时间。

加味茵陈四逆汤治疗阳虚瘀毒型乙肝相关慢性肝衰竭30例

目的:观察加味茵陈四逆汤治疗阳虚瘀毒型乙肝相关慢性肝衰竭(CLF)的临床疗效。方法:将60例阳虚瘀毒型乙肝相关CLF患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组采用西医综合疗法治疗,治疗组在对照组的基础上采用加味茵陈四逆汤治疗,2组均治疗8周。比较2组治疗前后的肝功能[血清总胆红素(TBil)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)]、凝血功能[凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)]、终末期肝病模型(MELD)评分、中医证候积分、病死率,评定综合疗效。结果:总有效率治疗组为86.67%(26/30),优于对照组的73.33%(22/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组肝功能、凝血功能、MELD评分、中医证候积分改善情况均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。病死率治疗组为10.00%(3/30),对照组为20.00%(6/30),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可有效减轻阳虚瘀毒型乙肝相关CLF患者的临床症状,改善肝功能及凝血功能,降低病死率,值得临床推广应用。

茵陈四逆汤加减治疗慢加急性肝衰竭

目的:观察茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭阴黄证的临床疗效。方法:将符合纳入标准的260例慢加急性肝衰竭阴黄证患者随机分为对照组及治疗组(各130例),对照组予西医综合治疗为主,治疗组在西医综合治疗基础上予茵陈四逆汤辨证加减治疗,疗程为8周,比较入组前组间基线特征,记录治疗前后患者症状体征积分、肝功能[包括总胆红素(total bilirubin,TBIL),丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),血清白蛋白(serum albumin,ALB)],凝血功能[凝血酶原活动度(primary trait analysis,PTA)],终末期肝病模型(MELD)评分(model for end-stage liver disease)变化情况,比较两组患者中医证候疗效,8周治疗效果及短期(12周)的预后差异。结果:治疗组症状体征积分下降明显优于对照组(P<0.01),中医证候总有效率治疗组为87.90%,对照组为60.83%,差异比较有显著性意义(P<0.05),两组患者治疗后TBIL,ALT,ALB,PTA,MELD评分改善程度比较,差异有显著性意义(P<0.01),8周治疗后总有效率比较,治疗组91.54%,优于对照组53.85%(P<0.01),两组随访12周,治疗组存活率高于对照组(P<0.05)。结论:茵陈四逆汤治疗慢加急性肝衰竭阴黄证能显著改善患者临床症状、保护肝脏功能,提高存活率,优于单一西医综合治疗。