LC-MS/MS法同时测定人血浆和尿液中对乙酰氨基酚及其结合物的浓度

目的:建立同时测定人血浆及尿液中对乙酰氨基酚(APAP)和其葡糖醛酸结合物(PG)的LC-MS/MS法。方法:血浆经10%丙二醇乙腈溶液沉淀蛋白处理,尿样则采取直接稀释进样,以茶碱(THE)为内标,采用高效液相色谱串联质谱法,Util-mate C18(100 mm×2.1 mm,3.0μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-水(含0.0875%甲酸)(4∶4∶92),流速0.3 mL.min-1,柱温40℃;采用电喷雾电离(ESI+),多反应离子检测(MRM)方式进行定量分析:APAP m/z 151.6→109.4,PG m/z 349.9→173.8,THE m/z 180.9→123.4。结果:经10%丙二醇乙腈溶液处理后,血浆内源性物质无干扰,APAP和PG血浆平均萃取回收率分别为93.1%和93.7%,在10～30000 ng.mL-1(APAP)和20～15000 ng.mL-1(PG)范围内线性良好。质控(QC)样品APAP的日内、日间RSD分别为3.2%～10.8%和8.3%～10.6%,PG的日内、日间RSD分别为2.1%～9.3%和6.2%～11.2%。在血浆中APAP和PG的LLOQ均分别为10 ng.mL-1和20 ng.mL-1。尿样采取直接稀释进样,在100～6000 ng.mL-1(APAP)和500～60000 ng.mL-1(PG)范围内线性良好,APAP和PG的尿样平均萃取回收率分别为89.1%和92.3%,准确度在85%～115%之间。结论:本方法具有灵敏度高,操作简便等特点,可同时测定对乙酰氨基酚及其葡萄糖醛酸结合物在生物样品中的药物浓度,用于药物代谢动力学的研究。