茶藨子木层孔菌多糖的体内抗肿瘤作用研究

目的 :探讨茶藨子木层孔菌多糖(PRP)的体内抗肿瘤作用。方法 :建立小鼠S180实体瘤模型,分为模型对照组、PRP实验低、中、高剂量组、PRP联合环磷酰胺组、环磷酰胺对照组,腹腔注射给药。测定小鼠肿瘤生长抑制率、脾脏指数和胸腺指数。结果:实验组中、高剂量时,PRP对小鼠的肿瘤抑制率分别为23.35%和34.46%,与模型组比较有显著性意义(P<0.05和P<0.01);在此剂量下,PRP可以提高荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数,差异有统计学意义(P<0.05)。PRP与环磷酰胺合用时抑瘤率有所提高,但差异不显著;合用时荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数较环磷酰胺单独应用显著提高(P<0.05)。结论:PRP具有显著免疫增强作用,对小鼠肿瘤具有一定的抑制作用,并可以改善环磷酰对荷瘤小鼠造成的免疫损伤。

正交试验设计优化茶藨子木层孔菌总多糖的提取条件

目的研究提取茶藨子木层孔菌总多糖的最佳条件。方法用蒽酮-硫酸法测定总多糖含量,以提取温度、时间、次数、溶剂用量等4项因素,设计3个水平进行正交试验。结果最佳工艺为15倍量水,90℃提取4h,共3次。结论本实验确定的最佳条件稳定性好且简便易行。

茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯的抗肿瘤作用研究

目的:探讨茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯(PRP-S18和PRP-S22)的抗肿瘤作用。方法:建立小鼠H22实体瘤模型,分为模型对照组、PRP-S18高剂量组和低剂量组、PRP-S22高剂量组和低剂量组、PRP-S18联合环磷酰胺组、PRP-S22联合环磷酰胺组、环磷酰胺对照组,腹腔注射给药。测定小鼠肿瘤生长抑制率、脾脏指数和胸腺指数。结果:低剂量(每天20mg/kg)时,PRP-S18和PRP-S22对小鼠的肿瘤抑制率高,分别为34.99%和33.47%;在此剂量下,PRP-S对肿瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数没有影响。PRP-S18和PRP-S22与环磷酰胺合用均可以显著提高肿瘤抑制率,其中PRP-S18与环磷酰胺合用后未加重环磷酰胺单独应用造成的免疫损伤。结论:PRP-S可以显著抑制小鼠肿瘤的生长,与环磷酰胺合用后抑瘤率明显提高。PRP-S最佳活性的发挥需要一个合适的硫酸取代度和适宜剂量。

茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用

目的:研究茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯(PRP-S)对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜模型,观察不同硫酸根取代度的PRP-S对血管生成的作用。结果:不同硫酸根取代度的PRP-S对鸡胚尿囊膜血管的生成均有抑制作用,与阴性组比较有显著性差异。硫酸化程度越高,其血管生成抑制活性越强。结论:PRP-S能够抑制鸡胚尿囊膜血管的生成。

茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯PRP-S16对人脐静脉内皮细胞EA.hy926的抑制作用及机制研究

目的:探讨茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯PRP-S16对人脐静脉内皮细胞EA.hy926的抑制作用及其机制。方法:MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪检测EA.hy926细胞凋亡与细胞周期,real-time RT-PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果:茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯PRP-S16对EA.hy926细胞的增殖有显著的抑制作用(P<0.05),其作用呈浓度依赖性,最大抑制率达66.83%(72 h、400μg/mL);细胞凋亡率分别为15.89%(200μg/mL)、24.48%(400μg/mL);细胞在G;/G;期的分布分别是80.03%(100μg/mL)、81.44%(200μg/mL)、82.38%(400μg/mL);细胞经不同浓度的茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯PRP-S16处理48 h后,Bax mRNA表达显著升高,Bcl-2 mRNA表达显著降低,二者均呈浓度依赖性。结论:茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯PRP-S16能通过阻滞内皮细胞G_(0)/G_(1)期、促进细胞凋亡来抑制人脐静脉内皮细胞增殖,其机制与上调促凋亡基因Bax mRNA的表达并下调抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达有关。

茶藨子木层孔菌化学成分及其抗肿瘤活性

目的研究茶藨子木层孔菌Phellinus ribis的化学成分及其抗肿瘤活性。方法茶藨子木层孔菌甲醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法评价其抗肿瘤活性。结果从中分离得到4个化合物,分别鉴定为inoscavin C(1)、phellifuropyranone A(2)、phelligridin D(3)、inoscavin A(4),均能够在一定程度上抑制HepG2细胞的增殖,对HepG2细胞的抑制作用在5~160μmol/L浓度范围内,呈剂量依赖性增长。结论所有化合物均为首次从该真菌中分离得到,并均具有抗肿瘤活性。

茶藨子木层孔菌多糖对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的研究茶藨子木层孔菌多糖(PRG)在阿尔兹海默症病理损伤中的保护作用。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤作为细胞模型,观察PRG的预保护、修复损伤及抑制凋亡作用,MTT法检测细胞存活率,Annexin-V-FITC双染法检测细胞凋亡率。结果不同浓度PRG对Aβ_(25-35)诱导的神经细胞损伤具有预保护作用,提高存活率,分别为74%(10μg/ml)、81%(50μg/ml)、88%(150μg/ml);不同浓度PRG均能修复细胞损伤,提高存活率,分别为53%(10μg/ml)、55%(50μg/ml)、59%(150μg/ml);不同浓度PRG均能降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡,降低凋亡率,分别为28.6%(10μg/ml)、19.3%(50μg/ml)、14.1%(150μg/ml)。结论茶藨子木层孔菌多糖PRG对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。

茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯的体内抗肿瘤作用与机制

目的:探讨茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯(PRP-S)的体内抗肿瘤作用与机制。方法:建立小鼠H22实体瘤模型,分别给于高低剂量PRP-S,测定小鼠肿瘤生长抑制率、脾脏指数和胸腺指数;采用免疫组织化学法测定肿瘤组织中Bax、Bcl-2和b FGF蛋白表达;酶联免疫吸附实验法测定小鼠血清肿瘤坏死因子TNF-α的含量。结果:PRP-S10和PRP-S16在高剂量时对小鼠肿瘤的抑制率分别为54.6%和60.6%,与模型组比较有极显著性差异(P<0.01);并且对荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数没有明显影响;PRP-S10和PRP-S16均可以上调肿瘤组织中的促凋亡基因Bax、下调凋亡抑制基因Bcl-2的蛋白表达;PRP-S实验组小鼠血清TNF-α的含量显著高于模型组小鼠(P<0.01);PRP-S可以显著降低肿瘤组织中b FGF水平(P<0.01)。结论:PRP-S在抑制肿瘤的同时,免疫损伤不良反应小;其机制除促进细胞凋亡和肿瘤细胞坏死之外,还可能与抑制肿瘤的血管生成作用有关。

茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯的制备与体外抗肿瘤活性

目的:制备茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯,研究其体外的抗肿瘤活性,并与茶藨子木层孔菌多糖比较。方法:采用氯磺酸-甲酰胺法进行硫酸化,采用MTT法检测对人卵巢癌细胞SKOV-3和人乳腺癌细胞MDA231的影响。结果:制备了3种茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯,硫取代度分别为1.48,1.83和2.23,其红外光谱中均具有SO和C-O-S的伸缩振动峰。茶藨子木层孔菌多糖对肿瘤细胞无明显的影响,而其硫酸酯可以抑制SKOV-3和MDA231细胞的生长。结论:成功制备了没有降解的3种硫酸酯,茶藨子木层孔菌多糖经硫酸化后对于肿瘤细胞的抑制作用增强。