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利用DNA shuffling技术鉴定草甘膦N-乙酰转移酶抗性相关位点
1
作者
金丹
陈明
+2 位作者
马瑞强
杨志荣
陈建
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2007年第5期110-114,共5页
为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个...
为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个单位点突变,3个双位点突变,1个3位点突变。其中,MTGAT3(H41Q)、MTGAT5(S52P)、MTGAT6(I53M)、MTGAT7(F56L)、MTGAT8(R82G)、MTGAT11(I19T/P22L)和MTGAT14(Y70H/L98P/K119E)7个突变体的草甘膦抗性几乎丧失。本工作为深入研究GAT1蛋白分子结构与功能之间的关系奠定了基础。
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关键词
草
甘
膦
草
甘
膦
N-
乙
酰
转移
酶
DNA
SHUFFLING
点突变
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职称材料
草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究
2
作者
卢维维
洪玉枝
刘子铎
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期805-808,共4页
草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetytransferase,GAT)是一种能够通过转乙酰基的反应将草甘膦代谢为低毒物质乙酰草甘膦的酶,在抗除草剂转基因作物中具有潜在的应用价值。通过将地衣芽孢杆菌Ba-cillus licheniformis(Weigmann)Cheste...
草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetytransferase,GAT)是一种能够通过转乙酰基的反应将草甘膦代谢为低毒物质乙酰草甘膦的酶,在抗除草剂转基因作物中具有潜在的应用价值。通过将地衣芽孢杆菌Ba-cillus licheniformis(Weigmann)Chester AB 94036中的草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)基因克隆到大肠杆菌中,获得含有重组质粒pGEX 6p-1-gat的重组菌株。对重组菌株进行诱导表达,经过GST亲和层析纯化,获得约17 ku的目的蛋白。通过酶标仪和连续分光光度分析法,对GAT蛋白进行了酶反应动力学测定。研究表明GAT的催化常数kcat为6.420 min-1,米氏常数KM为1.162 mmol/L,由此得出其催化效率kcat/KM为5.52 L/(mmol.min)。
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关键词
草
甘
膦
N-
乙
酰
转移
酶
亲和层析
连续分光光度分析法
酶
反应动力学
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职称材料
膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备
被引量:
5
3
作者
高旭东
王永志
+8 位作者
时圣凤
李忠鹏
李小宇
徐文静
张正坤
路扬
张佳诗
李启云
王金刚
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期500-503,共4页
目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利...
目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性。免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞。结果在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb。结论表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究。
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关键词
膦
丝菌素
乙
酰
转移
酶
BAR
基因
蛋白表达
活性
抗体制备
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职称材料
源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
4
作者
丁宁
何云浩
+2 位作者
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期158-166,共9页
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)...
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)和mHoEPSPS(mfHoEPSPS N端缺失PDT)进行重组表达和纯化,并运用自切割肽LP4/2A介导的基因聚合策略,将抗草铵膦的酶(Repat)置于mHoEPSPS的N端,构建了双抗草甘/铵膦酶(RLH),将其编码基因导入烟草后赋予草甘/铵膦复合抗性。结果显示,该菌株的EPSPS基因(fHoEPSPS)可编码一个N段融合了预苯酸脱水酶(PDT)的双功能酶。草甘膦抗性分析显示mfHoEPSPS的抗性比fHoEPSPS提高了19倍,将mHoEPSPS基因导入烟草后可赋予烟草3倍推荐剂量的草甘膦耐受性,转RLH基因的烟草能够耐受3~5倍推荐剂量的草甘/铵膦复合除草剂。结果表明,源于Halomonas sp.的抗草甘膦EPSPS是一种新型草甘膦耐受酶,通过G384A的位点突变可提高酶活;利用自切割肽介导的基因堆叠策略获得的转RLH基因烟草表现出较高草甘/铵膦复合抗性。
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关键词
抗除
草
剂作物
抗
草
甘
膦
5-烯醇式莽
草
酸-3-磷酸合成
酶
草
铵
膦
乙
酰
转移
酶
双抗除
草
剂作物
基因
聚合
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职称材料
进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究
被引量:
23
5
作者
潘良文
沈禹飞
+2 位作者
陈家华
胡永强
陶军
《粮食与油脂》
2001年第5期36-37,共2页
建立了从油菜籽中提取总DNA和用PCR技术检测外源基因的方法,用该方法从进口油 菜籽中检出外源的草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)、新霉素磷酸转移酶基因(NptII)、花椰 菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)。
关键词
油菜籽
草丁膦乙酰转移酶基因
新霉素磷酸
转移
酶
基因
CaMV35S启动子
外源
基因
检测方法
进口农产品
下载PDF
职称材料
抗除草剂Bar基因的优化及PAT蛋白的表达
6
作者
李葱葱
李飞武
+3 位作者
谭喜昌
夏蔚
邵改革
龙丽坤
《湖北农业科学》
2015年第10期2516-2518,2521,共4页
利用生物信息学方法优化了适用于原核表达的Bar基因序列密码子,克隆了Bar基因序列并构建了p ET28a-Bar融合表达载体,并转入大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)。结果表明,融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式表达膦丝菌素乙酰转移...
利用生物信息学方法优化了适用于原核表达的Bar基因序列密码子,克隆了Bar基因序列并构建了p ET28a-Bar融合表达载体,并转入大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)。结果表明,融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式表达膦丝菌素乙酰转移酶(PAT蛋白质),并通过镍离子亲和层析纯化后获得了PAT蛋白质,该纯化蛋白质的获得为利用酶联免疫法定量检测和筛选转基因植物提供了必要前提。
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关键词
BAR
基因
膦
丝菌素
乙
酰
转移
酶
原核表达
分离纯化
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职称材料
以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆为DNA探针固定平台电化学测定转基因玉米中特定基因序列(英文)
7
作者
王学亮
王朝霞
+1 位作者
汪涛
戴晓辉
《应用化学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期839-846,共8页
草胺膦乙酰转移酶基因(PAT)是一种转基因植物的外源DNA片段。本文以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆(nanoZrO2)的复合物作为固定DNA探针的平台,建立了一种灵敏地检测PAT基因的方法。首先,氧化石墨烯直接在电极表面进行电化学还原,然后将一...
草胺膦乙酰转移酶基因(PAT)是一种转基因植物的外源DNA片段。本文以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆(nanoZrO2)的复合物作为固定DNA探针的平台,建立了一种灵敏地检测PAT基因的方法。首先,氧化石墨烯直接在电极表面进行电化学还原,然后将一层nanoZrO2涂覆于其表面,利用DNA中的磷酸基团与nanoZrO2中氧的亲和作用固定DNA探针。通过微分脉冲伏安法检测DNA探针与PAT基因片段的杂交,构建了用于检测PAT基因片段的电化学生物传感器。该传感器具有稳定性好,重复性好的特点,可灵敏地检测转基因玉米中的PAT基因,检测限达2.0×10^-15mol/L。
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关键词
微分脉冲伏安法
还原氧化石墨烯
纳米氧化锆
草
胺
膦
乙
酰
转移
酶
基因
转
基因
玉米
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职称材料
多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO_2膜DNA电化学生物传感器
被引量:
16
8
作者
周娜
杨涛
+1 位作者
焦奎
宋彩霞
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期301-306,共6页
基于多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO2复合膜制备了高灵敏度的DNA电化学生物传感器。将Ag-TiO2复合物与适量分散于N,N-二甲基甲酰胺中的多壁碳纳米管(MWNT)相混合,形成均匀稳定的混合溶液,将其滴涂于裸碳糊电极表面,制得MWNT/Ag-TiO2修饰碳糊...
基于多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO2复合膜制备了高灵敏度的DNA电化学生物传感器。将Ag-TiO2复合物与适量分散于N,N-二甲基甲酰胺中的多壁碳纳米管(MWNT)相混合,形成均匀稳定的混合溶液,将其滴涂于裸碳糊电极表面,制得MWNT/Ag-TiO2修饰碳糊电极。碳纳米管大的比表面积和良好的电子传递性能与Ag-TiO2纳米复合物良好的生物相容性和对DNA极好的吸附能力的协同作用,显著提高了DNA探针的固载和DNA杂交的检测灵敏度。应用循环伏安法和电化学交流阻抗谱分别对传感膜的制备和DNA的固定与杂交进行了表征。以电化学交流阻抗谱法对转基因植物外源草丁膦乙酰转移酶基因片段进行了检测,线性范围为1.0×10-11~1.0×10-6mol/L,检出限为3.12×10-12mol/L。
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关键词
DNA电化学传感器
多壁碳纳米管
Ag/TiO2复合物
草丁膦乙酰转移酶基因
交流阻抗谱
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职称材料
题名
利用DNA shuffling技术鉴定草甘膦N-乙酰转移酶抗性相关位点
1
作者
金丹
陈明
马瑞强
杨志荣
陈建
机构
四川大学生命科学学院教育部生物资源与环境重点实验室
中国农业科学院生物技术研究所
中国农业大学生物学院
第三军医大学高原军事医学系病理生理教研室
出处
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2007年第5期110-114,共5页
基金
国家自然科学基金项目"苯胺双加氧酶诱导型启动子和调控蛋白互作的分子机理"(30470047)资助
文摘
为研究高抗草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)的草甘膦抗性相关位点,以高抗草甘膦的gat1基因和不具草甘膦抗性的gat2基因为出发基因,通过一轮双基因DNA shuffling,获得了抗性较野生型gat1下降的突变体14个:10个单位点突变,3个双位点突变,1个3位点突变。其中,MTGAT3(H41Q)、MTGAT5(S52P)、MTGAT6(I53M)、MTGAT7(F56L)、MTGAT8(R82G)、MTGAT11(I19T/P22L)和MTGAT14(Y70H/L98P/K119E)7个突变体的草甘膦抗性几乎丧失。本工作为深入研究GAT1蛋白分子结构与功能之间的关系奠定了基础。
关键词
草
甘
膦
草
甘
膦
N-
乙
酰
转移
酶
DNA
SHUFFLING
点突变
Keywords
glyphosate
glyphosate N-acetyltransferase
DNA shuffling
site mutant
分类号
Q555.3 [生物学—生物化学]
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究
2
作者
卢维维
洪玉枝
刘子铎
机构
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期805-808,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30370027
30350057)资助
文摘
草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetytransferase,GAT)是一种能够通过转乙酰基的反应将草甘膦代谢为低毒物质乙酰草甘膦的酶,在抗除草剂转基因作物中具有潜在的应用价值。通过将地衣芽孢杆菌Ba-cillus licheniformis(Weigmann)Chester AB 94036中的草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)基因克隆到大肠杆菌中,获得含有重组质粒pGEX 6p-1-gat的重组菌株。对重组菌株进行诱导表达,经过GST亲和层析纯化,获得约17 ku的目的蛋白。通过酶标仪和连续分光光度分析法,对GAT蛋白进行了酶反应动力学测定。研究表明GAT的催化常数kcat为6.420 min-1,米氏常数KM为1.162 mmol/L,由此得出其催化效率kcat/KM为5.52 L/(mmol.min)。
关键词
草
甘
膦
N-
乙
酰
转移
酶
亲和层析
连续分光光度分析法
酶
反应动力学
Keywords
glyphosate N-acetyltransferase
affinity chromatogram
continuous spectrophotometric assay
enzyme kinetic
分类号
Q555.3 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备
被引量:
5
3
作者
高旭东
王永志
时圣凤
李忠鹏
李小宇
徐文静
张正坤
路扬
张佳诗
李启云
王金刚
机构
东北农业大学园艺学院
吉林省农业科学院
吉林农业大学生命科学院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期500-503,共4页
基金
农业部转基因专项"抗病虫转基因大豆新品种培育"(2011ZX08004-004)
中青年科技领军人才及优秀创新团队项目"吉林省农业微生物研究与利用研究创新团队"(20121812)
吉林省农业微生物重点实验室平台建设项目(20122105)
文摘
目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性。免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞。结果在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb。结论表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究。
关键词
膦
丝菌素
乙
酰
转移
酶
BAR
基因
蛋白表达
活性
抗体制备
Keywords
phosphinothricin acetyltransferase
bar gene
protein expression
activity
monoclonal antibody
分类号
R392.121 [医药卫生—免疫学]
S41 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
4
作者
丁宁
何云浩
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
机构
华中农业大学植物科学技术学院
武汉设计工程学院食品与生物科技学院
华中农业大学生命科学技术学院
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期158-166,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31971383)
文摘
为培育高抗草甘膦作物以应对草甘膦杂草进化,从海洋细菌中筛选到1株高抗草甘膦的盐单胞菌属菌株(Halomonassp.),通过基因组测序及生物信息学分析,确定该菌株的EPSPS基因,在Escherichiacoli(DE3)中对fHoEPSPS、mfHoEPSPS(G384A位点突变)和mHoEPSPS(mfHoEPSPS N端缺失PDT)进行重组表达和纯化,并运用自切割肽LP4/2A介导的基因聚合策略,将抗草铵膦的酶(Repat)置于mHoEPSPS的N端,构建了双抗草甘/铵膦酶(RLH),将其编码基因导入烟草后赋予草甘/铵膦复合抗性。结果显示,该菌株的EPSPS基因(fHoEPSPS)可编码一个N段融合了预苯酸脱水酶(PDT)的双功能酶。草甘膦抗性分析显示mfHoEPSPS的抗性比fHoEPSPS提高了19倍,将mHoEPSPS基因导入烟草后可赋予烟草3倍推荐剂量的草甘膦耐受性,转RLH基因的烟草能够耐受3~5倍推荐剂量的草甘/铵膦复合除草剂。结果表明,源于Halomonas sp.的抗草甘膦EPSPS是一种新型草甘膦耐受酶,通过G384A的位点突变可提高酶活;利用自切割肽介导的基因堆叠策略获得的转RLH基因烟草表现出较高草甘/铵膦复合抗性。
关键词
抗除
草
剂作物
抗
草
甘
膦
5-烯醇式莽
草
酸-3-磷酸合成
酶
草
铵
膦
乙
酰
转移
酶
双抗除
草
剂作物
基因
聚合
Keywords
herbicide-resistant crops
glyphosate-resistant 5-enolshikimate-3-phosphate synthase
glufosinate acetyltransferase
dual herbicide-resistant crops
gene pyramiding
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究
被引量:
23
5
作者
潘良文
沈禹飞
陈家华
胡永强
陶军
机构
上海出入境检验检疫局
出处
《粮食与油脂》
2001年第5期36-37,共2页
基金
国家出入境检验检疫局科研项目
文摘
建立了从油菜籽中提取总DNA和用PCR技术检测外源基因的方法,用该方法从进口油 菜籽中检出外源的草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)、新霉素磷酸转移酶基因(NptII)、花椰 菜花叶病毒35S启动子(CaMV 35S)。
关键词
油菜籽
草丁膦乙酰转移酶基因
新霉素磷酸
转移
酶
基因
CaMV35S启动子
外源
基因
检测方法
进口农产品
分类号
F762.2 [经济管理—产业经济]
TS222.1 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
抗除草剂Bar基因的优化及PAT蛋白的表达
6
作者
李葱葱
李飞武
谭喜昌
夏蔚
邵改革
龙丽坤
机构
吉林省农业科学院
出处
《湖北农业科学》
2015年第10期2516-2518,2521,共4页
基金
全国博士后面上项目(2011M500626)
文摘
利用生物信息学方法优化了适用于原核表达的Bar基因序列密码子,克隆了Bar基因序列并构建了p ET28a-Bar融合表达载体,并转入大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)。结果表明,融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式表达膦丝菌素乙酰转移酶(PAT蛋白质),并通过镍离子亲和层析纯化后获得了PAT蛋白质,该纯化蛋白质的获得为利用酶联免疫法定量检测和筛选转基因植物提供了必要前提。
关键词
BAR
基因
膦
丝菌素
乙
酰
转移
酶
原核表达
分离纯化
Keywords
Bar gene
phosphinothricin acetyltransferase
prokaryotic expression
separation and purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆为DNA探针固定平台电化学测定转基因玉米中特定基因序列(英文)
7
作者
王学亮
王朝霞
汪涛
戴晓辉
机构
菏泽学院化学化工学院
山东农业大学化学与材料科学学院
出处
《应用化学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期839-846,共8页
基金
Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.21105023)
the Natural Science Foundation Committee of Shandong Province,China(No.ZR2017MB062,No.ZR2015BL014)~~
文摘
草胺膦乙酰转移酶基因(PAT)是一种转基因植物的外源DNA片段。本文以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆(nanoZrO2)的复合物作为固定DNA探针的平台,建立了一种灵敏地检测PAT基因的方法。首先,氧化石墨烯直接在电极表面进行电化学还原,然后将一层nanoZrO2涂覆于其表面,利用DNA中的磷酸基团与nanoZrO2中氧的亲和作用固定DNA探针。通过微分脉冲伏安法检测DNA探针与PAT基因片段的杂交,构建了用于检测PAT基因片段的电化学生物传感器。该传感器具有稳定性好,重复性好的特点,可灵敏地检测转基因玉米中的PAT基因,检测限达2.0×10^-15mol/L。
关键词
微分脉冲伏安法
还原氧化石墨烯
纳米氧化锆
草
胺
膦
乙
酰
转移
酶
基因
转
基因
玉米
Keywords
differential pulse voltammetry
reduced graphene oxide
nano zirconia
phosphinothricin acetyltransferase gene
transgenic maize
分类号
O657.1 [理学—分析化学]
下载PDF
职称材料
题名
多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO_2膜DNA电化学生物传感器
被引量:
16
8
作者
周娜
杨涛
焦奎
宋彩霞
机构
青岛科技大学化学与分子工程学院
出处
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期301-306,共6页
基金
国家自然科学基金(Nos.20635020
20805025
+2 种基金
20975057)项目
教育部博士点基金(No.20060426001)
青岛市基础研究项目(No.09-1-3-25-jch)资助
文摘
基于多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO2复合膜制备了高灵敏度的DNA电化学生物传感器。将Ag-TiO2复合物与适量分散于N,N-二甲基甲酰胺中的多壁碳纳米管(MWNT)相混合,形成均匀稳定的混合溶液,将其滴涂于裸碳糊电极表面,制得MWNT/Ag-TiO2修饰碳糊电极。碳纳米管大的比表面积和良好的电子传递性能与Ag-TiO2纳米复合物良好的生物相容性和对DNA极好的吸附能力的协同作用,显著提高了DNA探针的固载和DNA杂交的检测灵敏度。应用循环伏安法和电化学交流阻抗谱分别对传感膜的制备和DNA的固定与杂交进行了表征。以电化学交流阻抗谱法对转基因植物外源草丁膦乙酰转移酶基因片段进行了检测,线性范围为1.0×10-11~1.0×10-6mol/L,检出限为3.12×10-12mol/L。
关键词
DNA电化学传感器
多壁碳纳米管
Ag/TiO2复合物
草丁膦乙酰转移酶基因
交流阻抗谱
Keywords
Deoxyribonucleic acid biosensor
Multi-walled carbon nanotubes
Silver-titanium oxide composite
Phosphinothricin acetyltransferase gene
Electrochemical impedance spectroscopy
分类号
TP212.3 [自动化与计算机技术—检测技术与自动化装置]
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1
利用DNA shuffling技术鉴定草甘膦N-乙酰转移酶抗性相关位点
金丹
陈明
马瑞强
杨志荣
陈建
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
2007
0
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职称材料
2
草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究
卢维维
洪玉枝
刘子铎
《华中农业大学学报》
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CSCD
北大核心
2007
0
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职称材料
3
膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备
高旭东
王永志
时圣凤
李忠鹏
李小宇
徐文静
张正坤
路扬
张佳诗
李启云
王金刚
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
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职称材料
4
源于Halomonas sp.抗草甘膦EPSPS的克隆、鉴定及应用
丁宁
何云浩
吴琳绯
李婵娟
吴高兵
《华中农业大学学报》
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CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
5
进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究
潘良文
沈禹飞
陈家华
胡永强
陶军
《粮食与油脂》
2001
23
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职称材料
6
抗除草剂Bar基因的优化及PAT蛋白的表达
李葱葱
李飞武
谭喜昌
夏蔚
邵改革
龙丽坤
《湖北农业科学》
2015
0
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7
以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆为DNA探针固定平台电化学测定转基因玉米中特定基因序列(英文)
王学亮
王朝霞
汪涛
戴晓辉
《应用化学》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
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职称材料
8
多壁碳纳米管/纳米Ag-TiO_2膜DNA电化学生物传感器
周娜
杨涛
焦奎
宋彩霞
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010
16
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