组织培养草本寄主保存苹果茎痘病毒的研究

苹果茎痘病毒（ＡＳＰＶ）是侵染苹果树的一种重要潜隐性病毒，对其纯化毒源的保存是研究病原物的基础。从木本植物分离的ＡＳＰＶ，将其接种在草本寄主烟草上，用单斑分离和血清吸附等方法，去除其中的烟草花叶病毒（ＴＭＶ），获得单一ＡＳＰＶ侵染的烟草。利用带有病毒的草本寄主植物进行组织培养，防止其它果树病毒侵染和ＴＭＶ的再侵染，保存苹果茎痘病毒取得良好的效果。

苹果锈果类病毒(ASSVd)保定分离物草本寄主鉴定及侵染性cDNA克隆构建

由苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd)引起的苹果花脸病在我国苹果生产上造成了严重的危害,构建侵染性cDNA克隆是研究病毒基因功能、病毒侵染机制的重要手段。我们首先在温室进行了ASSVd保定分离物(BD-1)草本寄主的鉴定,证明了ASSVd BD-1可侵染油菜(Brassica napus)、黄瓜(Cucumis sativus)、扁豆角(Lablab purpureus)、蚕豆(Vicia faba)、长豆角(Vigna unguiculata)、昆诺藜(Chenopodium quinoa)、苋色藜(C.amaranticolar)共7种草本植物,在油菜上病毒接种成功率最高,达80%,新生叶片表面凹凸不平;其次是黄瓜,达到了77.78%,新生叶片皱缩畸形。通过RT-PCR扩增到ASSVd BD-1全基因组,利用引物引入的方法在基因组中引入T7启动子,构建到pMD18-T simple载体上,通过体外转录获得病毒基因组RNA转录本,在油菜上验证了RNA转录本的侵染性。研究结果为利用草本寄主探究ASSVd生物学特性提供了基础材料,为利用反向遗传学方法分析ASSVd基因功能和侵染机理奠定了基础。

苹果茎沟病毒陕西分离物基因组序列与生物学研究

苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)是苹果上最主要的病毒病害之一。本研究在陕西省咸阳市武功镇的‘秦冠’病树叶片样品中检测到了ASGV,将其命名为苹果茎沟病毒咸阳(ASGV-XY)分离物。通过RT-PCR结合RACE的方法,克隆了ASGV-XY的全长基因组。序列核酸一致性分析表明,ASGV-XY与已知的其他ASGV分离物具有较低的核酸一致性;系统发育分析证明,ASGV-XY与其他的ASGV分离物相比,处于独特的分类地位;ASGV-XY可以侵染苋色藜、昆诺藜、西方烟、心叶烟、芸豆等草本寄主。该结果丰富了ASGV的遗传多样性,对防治病毒病害具有重要指导意义。