草胺膦浓度对黄芩植株生长和愈伤组织生长分化的影响

通过研究除草剂草胺膦对黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)植株生长和愈伤组织生长分化的影响,发现草胺膦对黄芩植株生长和愈伤组织生长分化具有强烈的抑制作用。并在此基础上找到了合适的草胺膦筛选压,对于黄芩植株生长是30mg/L;对于黄芩愈伤组织生长是3.5mg/L;对于黄芩愈伤组织分化是3.0 mg/L。

草胺膦的制备方法

根据文献综述了草胺膦的制备方法 ,介绍了几种主要合成路线 ,及重要中间体的合成方法。特别对“斯特累克尔”法合成路线作了较详细介绍 。

基因枪转化大豆胚尖草胺膦抗性浓度的确定

为了探讨基因枪法遗传转化时草胺膦的适宜浓度,以‘荷豆12’成熟种子胚尖为材料,将经6-BA诱导过的大豆胚尖转移至含不同草胺磷浓度的培养基上,观察生长及芽伸长情况。结果表明,随着草胺磷浓度增加,大豆胚尖死亡率增加,丛生芽伸长受抑制,再生能力减弱。添加草胺膦的浓度高于0.5 mg/L时,生长受严重抑制甚至死亡,移至基本培养基上也不能再生;在低于0.5 mg/L时,不能有效抑制其生长。因此,0.5 mg/L可作为基因枪法转化外源基因时草胺膦的筛选标准。

高效液相色谱-串联质谱法检测茶叶中痕量草胺膦、草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留

建立高效液相色谱–串联质谱法测定茶叶中除草剂草胺膦、草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留的方法。以纯水提取茶叶中的草胺膦、草甘膦、氨甲基膦酸,用二氯甲烷、阴离子交换固相萃取柱净化、富集,以0.25 mol/L碳酸氢钠溶液洗脱,然后直接采用1%芴甲氧羰酰氯进行衍生,衍生时间为5 min,用反相液相色谱柱分离,以电喷雾正离子模式,多反应模式(MRM)检测。草胺膦、草甘膦、氨甲基膦酸的质量浓度在0～20μg/L范围内均具有良好的线性,线性相关系数大于0.995,方法定量限为0.01 mg/kg。在不同茶叶基质中,0.01,0.025,0.05 mg/kg三水平的平均添加回收率为94.0%～116.0%,测定结果的相对标准偏差为3.5%～7.1%(n=6)。该方法操作简便,灵敏度与准确度高,满足茶叶样品中草胺膦、草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸低残留的检测要求。

草甘膦异丙氨盐、草胺膦防除棉田三棱草药效试验

本文通过对41%草甘膦异丙氨盐、36%草胺膦2种药物防除棉田三棱草的效果及对棉花的安全性进行调查,以期筛选出防治棉田三棱草的适宜药剂,为今后棉田防治三棱草提供依据。试验结果表明:草甘膦异丙氨盐对三棱草的防除效果相对较高,药后20天防效达到58.2%,草胺磷对三棱草的防除效果一般。

200g/L草胺膦水剂加助剂防除田埂道路和茶园杂草试验与应用技术研究

试验结果表明,草胺膦对防除田埂、路边和茶园一年生杂草和多年生杂草有显著效果。茶园以一年生杂草为主,以每667m2用200g/L草胺膦水剂100～120mL+助剂100～120mL为宜;田埂道路以多年生杂草为主,以每667m2用200g/L草胺膦水剂120～150mL加助剂120～150mL为好;在杂草生长旺盛期对水30kg均匀喷雾,除草效果一般可达95%左右。

草胺膦在竹林培育中的应用及效益分析

近两年，宣城市实施“636竹林丰产增效示范工程”建设。宣城市旌德县现有6万亩成林竹林，林农普遍采用传统的粗放经营模式，为进一步提升竹林经营水平。提高林分质量和经营效益，促进竹林经营管理水平的整体提高，通过对竹林喷施草胺膦试验：与传统相比，以较小的成本投入获得了可观的效益，对林农逐步转变经营方式起到了促进作用。

转bar基因耐草胺膦油菜对五指山小型猪免疫指标的影响

目的探讨转bar基因耐草胺膦油菜对五指山小型猪免疫指标的影响,观察其是否具有免疫毒性和潜在致敏性。方法分别用含10%转bar基因耐草胺膦油菜籽的饲料、含10%亲本对照油菜的饲料、常规基础饲料,连续喂饲五指山小型猪30 d,观察动物一般行为表现、毒性表现和死亡情况,记录体重,计算免疫器官脏器系数,以ELISA试剂盒测定实验前后血清免疫指标及肠组织组胺含量。结果实验期间各组动物活动自如,未见腹泻等症状,未出现不适或死亡,除亲本对照组雄性胸腺系数高于对照组外(P<0.05),其余组体重和免疫器官脏器系数无异常改变。与饲养对照组相比,转基因组和亲本对照组实验前后血清IgG、IgE抗体、组胺及细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10均无显著变化(P>0.05)。与对照组相比,转基因组和亲本组肠组织组胺含量均未见显著变化(P>0.05)。结论 bar基因耐草胺膦油菜及其亲本对照油菜分别掺入饲料喂饲小型猪30 d,未见其对小型猪免疫指标产生不良影响。

转bar基因耐草胺膦油菜对大鼠的亚慢性毒性研究

目的观察转bar基因耐草胺膦油菜对大鼠的亚慢性毒性作用。方法将140只健康SPF级Wistar大鼠按体重随机分为7组,即对照(常规基础饲料)组和低(2.5%)、中(5.0%)、高剂量(10.0%)转基因组及低(2.5%)、中(5.0%)、高剂量(10.0%)亲本组,每组20只,雌雄各半。采用喂饲方式进行染毒,连续喂饲90 d。观察大鼠体重、血液学指标、血生化指标、各主要脏器重量及其系数,并进行病理学检查。结果各实验组动物的体重增长正常,血液学和血生化个别指标虽有统计学差异,但并无生物学意义。各剂量组大鼠心、肝、肾、肾上腺、脾、胸腺、睾丸的湿重及其脏器系数与对照组相比,差异均无统计学意义;且病理学检查未发现明显异常。结论转bar基因耐草胺膦油菜90 d喂养未对大鼠产生亚慢性毒性作用。

农杆菌介导的转谷氨酰胺合成酶基因小麦的抗除草剂特性研究(英文)

谷氨酰胺合成酶 (Glutaminesynthetase,GS ,E .C .6 .3.1.2 )是植物氨同化过程中的关键酶 ,对植物的氮素吸收和代谢起着至关重要的作用。谷氨酰胺合成酶还是除草剂草胺膦 (Phosphinothricin (PPT)或Basta)的靶标酶。前期工作已从我国特有的豌豆 (Pisumsatium)品种中克隆了细胞质型谷氨酰胺合成酶 (GS1)cDNA和叶绿体型谷氨酰胺合成酶 (GS2 )cDNA。为了验证谷氨酰胺合成酶的功能 ,构建了同时含有GS1cDNA和GS2cDNA的植物表达载体p2GS。以该表达载体通过农杆菌介导法 ,转化小麦 (Triticumaestivum)的未成熟胚愈伤组织 ,经PPT筛选及分化再生培养 ,获得了抗PPT的转基因小麦植株 4 1株。PCR和基因组Southern杂交分析证实了GS1和GS2基因已经整合到转基因小麦的基因组。用除草剂草胺膦Basta溶液涂抹转p2GS小麦叶片 ,结果证明GS转基因植株可以抗高达 0 .3%的Basta溶液 ,而对照植株叶片逐渐变黄直至枯死。转基因小麦植株能正常结实。上述实验结果表明 :1)GS基因在小麦植株中获得了有效表达 ,从而赋予小麦植株抗PPT特性 ;2 )GS基因能够作为研究小麦遗传转化的筛选标记基因。

除草剂敌草快和草铵膦对中华鳑鲏鱼的急性毒性效应

中华鳑鲏鱼(Rhodeus sinensis Günther)是我国原生类观赏鱼,在稻田观光渔业中具有良好的发展前景。以中华鳑鲏鱼为试验生物,旨在找出两种常用除草剂敌草快和草铵膦对中华鳑鲏鱼的急性毒性效应和安全浓度,为稻田养中华鳑鲏鱼提供除草剂使用浓度依据。静水法研究得出敌草快和草铵膦对中华鳑鲏鱼24 h的半数致死浓度(LC 50)分别为10.89 mg/L和43.248 mg/L;48 h的半数致死浓度(LC 50)分别为9.862 mg/L和40.477 mg/L;72 h的半数致死浓度(LC 50)分别为9.504 mg/L和38.765 mg/L;96 h的半数致死浓度(LC 50)分别为9.405 mg/L和37.744 mg/L。结果表明相对于敌草快,草铵膦对中华鳑鲏鱼的毒性效应相对较弱。安全浓度试验结果显示敌草快对中华鳑鲏鱼的安全浓度为0.9405 mg/L,草铵膦对中华鳑鲏鱼的安全浓度为3.7744 mg/L,相对于敌草快,中华鳑鲏鱼对草铵膦具有更高的耐受性。根据实验结果,在稻田观光渔业中,相对于敌草快,低毒高耐受的草铵膦更适合作为除草剂。

应用飞达红2号防除棕榈大苗苗圃及休闲地杂草

飞达红2号,为10%草甘膦胺盐水剂,外观为棕红色均相液体.由江苏省南通飞天化学实业有限公司生产.与市面上常见的10%草甘膦水剂相比,其优点是草甘膦胺盐加植物源助剂SDP科学配制而成,具有更好的水溶性,药剂喷施后,对杂草茎叶表面有很好的展着性和渗透性,增强杂草对草甘膦的吸收和传导,从而能提高除草效果.

油菜化学催熟研究初报

为促进油菜成熟期体内物质向种子转运,促进植株脱水,实现南方冬油菜一次收获脱粒的目的,选用4种药物(40%乙烯利、10%草甘膦、40%草胺膦、20%百草枯),采用4个喷药时期(04-24,04-27,04-30,05-03)进行催熟研究。结果表明:乙烯利在促进脱水和催熟方面有一定作用,以在成熟前期喷药效果较好;草甘膦对油菜催熟效果相对较差;草胺膦有一定催熟效果,以成熟前中期喷药效果较好,但值得进一步研究;百草枯抑制油菜生长、促使油菜落黄和脱水的效果最好,喷药后第2天植株即全部变黄,在收获前几天喷施对产量影响小,能达到一次收获脱粒的要求。

转bar基因小麦大田筛选方法的建立及验证

为在田间进行有效的阳性小麦转基因植株的筛选,进行了大田环境中筛选方法的研究。用粉剂和水剂2种不同类型草胺膦作为筛选剂,以无任何遮盖、地膜覆盖、简易小拱棚覆盖和拱棚覆盖4种处理,研究其在去除非转基因植株上的效果差异。结果表明,采用水剂草胺膦比粉剂草胺膦在大田环境中更具有彻底杀灭的效果;400 mg/L的粉剂浓度和400 mg/L的水剂浓度在覆盖地膜时均具有较好的筛选效果,粉剂低于该浓度则不能彻底杀灭;从小麦发育的4叶1心期到拔节期均可以作为筛选的时期;比较喷施后杀灭效果,加盖拱棚>加盖简易小拱棚>加盖地膜>无任何遮盖,但加盖拱棚会显著增加小麦株高;筛选结果与PCR检测结果一致。该研究建立并验证了一个大田筛选转bar基因小麦的方法,为小麦转基因材料作为亲本用于分子育种奠定了基础。

以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆为DNA探针固定平台电化学测定转基因玉米中特定基因序列（英文）

草胺膦乙酰转移酶基因(PAT)是一种转基因植物的外源DNA片段。本文以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆(nanoZrO2)的复合物作为固定DNA探针的平台,建立了一种灵敏地检测PAT基因的方法。首先,氧化石墨烯直接在电极表面进行电化学还原,然后将一层nanoZrO2涂覆于其表面,利用DNA中的磷酸基团与nanoZrO2中氧的亲和作用固定DNA探针。通过微分脉冲伏安法检测DNA探针与PAT基因片段的杂交,构建了用于检测PAT基因片段的电化学生物传感器。该传感器具有稳定性好,重复性好的特点,可灵敏地检测转基因玉米中的PAT基因,检测限达2.0×10^-15mol/L。