'章姬'和'红颜'草莓采后微生物安全评价及品质劣变研究

以'章姬'草莓(Fragaria ananassa L.cv.'Zhangji')和'红颜'草莓(Fragaria ananassa L.cv.'Hongyan')为材料,研究了草莓采后在(20±0.5)℃或(4±0.5))℃下(RH 80%-90%)贮藏时菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母计数的变化,并结合腐烂率、可溶性固形物含量、硬度和紧实度等品质参数,评估了草莓采后的微生物安全性和食用风险。结果表明:尽管'章姬'和'红颜'草莓在采后3 d内均能较好地维持外观品质和食用口感,低温下甚至能保持至第6天,但两种草莓的菌落总数、酵母和霉菌计数分别在第2天和第3天(20℃)、第3天和第4天(4℃)提高至采摘当天的10倍以上,20℃贮藏的'红颜'草莓第5天时大肠菌群超过200 MPN/g。因此,两种草莓采后贮藏期间有害微生物污染风险的提高先于外观品质和口感指标的劣变,存在微生物食用安全风险。

‘红颜’草莓体细胞胚发生过程中AP2/EREBP家族转录因子的表达分析及FaEREBP基因的克隆

【目的】筛选并克隆‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.cv.‘Benihopp’)体细胞胚发生过程中AP2/EREBP家族特异性表达的基因,以期为草莓体细胞胚发生的分子调控机理研究提供理论依据。【方法】以‘红颜’草莓非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织以及体细胞胚为试验材料,应用RNA-seq测序技术,筛选出差异表达的AP2/EREBP转录因子,并通过qRT-PCR技术,检测上调转录因子在非胚性愈伤组织、胚性愈伤组织、体细胞胚以及幼苗根、茎、叶等组织中的表达量,以同源克隆技术获得特异性表达的转录因子FaEREBP。【结果】FaEREBP编码区核苷酸序列全长822bp,编码273个氨基酸,其表达水平在胚性愈伤组织和体细胞胚中显著高于其他组织。【结论】FaEREBP是‘红颜’草莓体细胞胚发生潜在的重要转录因子。

FaSPS1基因对草莓果实成熟调控的分子机理

该研究以草莓品种‘红颜’(Fragaria×ananassa‘Benihoppe’)为试材,分析了草莓果实发育不同阶段蔗糖磷酸合成酶基因(FaSPS1)的表达量变化,采用PCR方法克隆FaSPS1基因,构建带有报告基因的e-GFP植物表达载体,通过瞬时转基因方法转化草莓果实,采用观察绿色荧光和检测目的基因表达量的方法鉴定转基因植物,并分析FaSPS1基因超表达和反义表达后草莓果实的成熟发育以及与成熟相关的基因表达量变化,探究FaSPS1基因在果实成熟发育中的特殊作用,为深入了解草莓果实发育和成熟调控的分子机理提供思路。结果显示:(1)成功克隆得到FaSPS1基因(GenBank登录号AB267868.1);成功构建带有报告基因e-GFP的FaSPS1基因超表达载体和反义基因表达载体,通过瞬时转基因方法转化并经荧光和目的基因表达量检测的方法鉴定获得转FaSPS1基因草莓植株。(2)与空载对照和非转基因果实相比,FaSPS1基因过表达可促进草莓果实成熟,能够使草莓果实成熟期提前,且果实中蔗糖果糖含量升高;但反义表达后会抑制草莓果实成熟,果实中苹果酸含量升高。(3)基因超表达或者反义表达后,草莓果实成熟相关基因的表达量受到不同程度调控,其中糖代谢基因FaSPS2/3、FaSUT1,果实成软化基因FaEXP1、FaEXP3、FaXYL1以及激素代谢基因FaJAZ1、FaJAZ2、FaJAZ8、FaOPR3、FaPYL1、FaPYL8、FaPYL9、FaNCED1表达量变化最明显。研究推测,FaSPS1基因可能通过影响草莓果实中和成熟相关的糖代谢基因、果实软化基因以及激素代谢基因来调控草莓果实成熟。

间歇浸没式生物反应器快繁草莓脱毒苗的参数

以茎尖脱毒处理诱导的草莓‘红颜’第3代继代苗为试验材料,利用间歇浸没式生物反应器进行组培苗增殖技术体系的研究。经过40d的增殖培养后,结果表明:(1)利用TIBs系统进行草莓组培苗培养增殖率约是传统培养方式的3倍;(2)TIBs系统中接种密度在2株/0.25L培养基/瓶,有利于草莓组培苗的生长;(3)TDZ和NAA质量浓度均为0.5mg/L时有利于TIBs系统中草莓组培苗的增殖;(4)TIBs系统中蔗糖质量浓度为30g/L较适宜;(5)荧光灯与红蓝LED灯对TIBs系统中草莓增殖无差异。

茶树精油对草莓果实采后灰霉病发生的影响

以‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,分析了0.05、0.10、0.50、1.00和2.00 mL/L的茶树精油对草莓果实采后灰霉病发生的影响,以及草莓果实发病规律、果实表面菌丝生长情况和果实内源茉莉酸含量,同时测定失重率、维生素C、还原糖、可滴定酸、过氧化氢(H 2O 2)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)等草莓品质指标,并且分析了0.10 mL/L茶树精油处理后果实品质和抗病相关基因表达量的变化。结果表明,0.10 mL/L茶树精油抑制草莓果实采后灰霉病发生效果最好,能增加果实内源茉莉酸含量,抑制果实表面灰霉菌菌丝的正常发育,减少草莓失重率,抑制草莓果实还原糖、维生素C等营养指标的损失,提高草莓SOD、CAT活性,降低H 2O 2含量;促进了抗病相关转录因子FaMYB10、FaMYB44.2、FaPR4、FaWRKY1、FaWRKY25、FaWRKY33和FaWRKY70的表达。

超早熟栽培草莓花芽分化进程的扫描电镜观察

于2011年7月23日至8月24日,对草莓品种‘红颜’进行低温(夜温为17～20℃变温)、短日照(黑暗时间为16h)处理,从处理之始到花序现蕾,约每3～5d取样1次,实体解剖镜下解离草莓顶芽,材料均用FAA固定,临界点干燥,扫描电镜观察,以确定保护地栽培草莓的花芽开始分化始期,为生产中草莓尽早适期定植提供依据。根据扫描观察的微形态特征,将草莓花芽分化的全过程分为花芽未分化期、花芽分化始期、生殖顶端膨大期、花序分化期、顶花花萼与花瓣形成期、雄蕊形成期和雌蕊形成期共7个时期。花芽未分化期,顶芽一直处于营养生长阶段;花芽分化始期,草莓顶芽逐步由尖锐、狭窄的营养顶端向平坦、宽大的生殖顶端发育;生殖顶端膨大期,生殖顶端隆起而膨大;花序分化期,顶花序逐步分化出顶花原基和侧花原基;顶花花萼、花瓣形成期,花萼(包括副萼)、花瓣原基相继分化完成;雄蕊形成期,两轮雄蕊原基相继分化形成;雌蕊形成期,大量雌蕊原基逐步隆起,心皮原基逐步卷合、完成花芽分化。研究认为,草莓的定植期以生殖顶端充分膨大期为宜,即低温短日照处理15～20d后即可定植大田。