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结合内标的RT-PCR技术检测草莓轻型黄边病毒(SMYEV)
被引量:
5
1
作者
蔡斌华
张计育
+4 位作者
黄海
李国平
李金凤
高志红
章镇
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2009年第6期1432-1434,共3页
草莓(FragariaananassaDuch)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。在长期的生产过程中,草莓同其他无性繁殖植物一样,易感染病毒,从而造成草莓品种的种性退化。草莓轻型黄边病毒(Strawberrymildyellowedgevirus...
草莓(FragariaananassaDuch)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。在长期的生产过程中,草莓同其他无性繁殖植物一样,易感染病毒,从而造成草莓品种的种性退化。草莓轻型黄边病毒(Strawberrymildyellowedgevirus,SMYEV)是危害草莓较为严重的一种潜隐性病毒,该病毒侵染草莓植株后,引起叶片边缘失绿,植株矮缩,叶片黄化、卷曲,强毒株还引起叶片枯死。
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关键词
草莓
草莓
轻型
黄边病
病毒
(
smyev
)
RT—PCR
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职称材料
草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3'端序列分析
被引量:
12
2
作者
杨洪一
张志宏
+3 位作者
高秀岩
杜国栋
代红艳
李贺
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期403-407,共5页
利用RTPCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的外壳蛋白基因片段进行特异扩增,扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RTPCR检测体系,并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测,其中12个品种和五叶草莓带有SMYE...
利用RTPCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的外壳蛋白基因片段进行特异扩增,扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RTPCR检测体系,并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测,其中12个品种和五叶草莓带有SMYEV。从SMYEV的沈阳分离物SY01上扩增出了932bp的基因组3末端区域,其核酸序列与国外分离物的序列同源性为86%~96%。系统进化树显示SMYEV分为3个组群,沈阳分离物SY01与欧美分离物位于同一组群内,但独立形成1个小的分支。RNA二级结构分析显示SMYEV基因组3末端形成3个茎环结构,不同分离物的序列变化并未引起茎环结构的明显变化。
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关键词
草莓
病毒
草莓
轻型
黄边病
毒(
smyev
)
序列分析
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职称材料
利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清
被引量:
1
3
作者
代红艳
于翠梅
+3 位作者
张志宏
李贺
马跃
刘月学
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期578-581,共4页
【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒(SMYEV)外壳蛋白(CP)为抗原制备抗血清的方法,从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达,分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行...
【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒(SMYEV)外壳蛋白(CP)为抗原制备抗血清的方法,从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达,分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行免疫。血清效价达到要求后,分离纯化抗血清并利用DAC-ELISA对草莓植株进行SMYEV检测,同时利用RT-PCR对DAC-ELISA检测结果进行验证。【结果】宿有SMYEV CP基因的大肠杆菌经IPTG诱导后出现一条52.0 ku左右的特异性重组蛋白谱带,以纯化的重组蛋白为抗原制备出专一性较强的针对SMYEV的抗血清,该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV。利用DAC-ELISA和RT-PCR对26份草莓试材分别进行SMYEV检测,2种检测方法的检测结果基本一致。【结论】以原核表达的SMYEV CP为抗原可以制备出专一性较强、效价较高的SMYEV的抗血清。
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关键词
草莓
轻型
黄边病
毒(
smyev
)
CP
原核表达
抗血清
ELISA
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职称材料
题名
结合内标的RT-PCR技术检测草莓轻型黄边病毒(SMYEV)
被引量:
5
1
作者
蔡斌华
张计育
黄海
李国平
李金凤
高志红
章镇
机构
南京农业大学园艺学院
江苏省农林职业技术学院
江苏省丘陵地区镇江农业科学研究所
出处
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2009年第6期1432-1434,共3页
基金
江苏省科技厅科技攻关项目(Be2007351)
江苏省农业资源开发局项目(2008KJ-D47)
南京农业大学SRT资助项目(0803A22)
文摘
草莓(FragariaananassaDuch)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。在长期的生产过程中,草莓同其他无性繁殖植物一样,易感染病毒,从而造成草莓品种的种性退化。草莓轻型黄边病毒(Strawberrymildyellowedgevirus,SMYEV)是危害草莓较为严重的一种潜隐性病毒,该病毒侵染草莓植株后,引起叶片边缘失绿,植株矮缩,叶片黄化、卷曲,强毒株还引起叶片枯死。
关键词
草莓
草莓
轻型
黄边病
病毒
(
smyev
)
RT—PCR
Keywords
strawberry
strawberry mild yellow edge virus (
smyev
)
RT-PCR
分类号
S412 [农业科学—植物保护]
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职称材料
题名
草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3'端序列分析
被引量:
12
2
作者
杨洪一
张志宏
高秀岩
杜国栋
代红艳
李贺
机构
沈阳农业大学园艺学院
出处
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期403-407,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30200187)
教育部留学回国人员科研启动基金资助项目〔教外司留(2002)247号〕
文摘
利用RTPCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的外壳蛋白基因片段进行特异扩增,扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RTPCR检测体系,并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测,其中12个品种和五叶草莓带有SMYEV。从SMYEV的沈阳分离物SY01上扩增出了932bp的基因组3末端区域,其核酸序列与国外分离物的序列同源性为86%~96%。系统进化树显示SMYEV分为3个组群,沈阳分离物SY01与欧美分离物位于同一组群内,但独立形成1个小的分支。RNA二级结构分析显示SMYEV基因组3末端形成3个茎环结构,不同分离物的序列变化并未引起茎环结构的明显变化。
关键词
草莓
病毒
草莓
轻型
黄边病
毒(
smyev
)
序列分析
Keywords
Strawberry
Virus
Strawberry mild yellow edge virus(
smyev
)
Sequence analysis
分类号
S668.4 [农业科学—果树学]
S432.1 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清
被引量:
1
3
作者
代红艳
于翠梅
张志宏
李贺
马跃
刘月学
机构
沈阳农业大学园艺学院
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期578-581,共4页
基金
国家科技支撑计划课题(2011BAD12B02)
文摘
【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒(SMYEV)外壳蛋白(CP)为抗原制备抗血清的方法,从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达,分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行免疫。血清效价达到要求后,分离纯化抗血清并利用DAC-ELISA对草莓植株进行SMYEV检测,同时利用RT-PCR对DAC-ELISA检测结果进行验证。【结果】宿有SMYEV CP基因的大肠杆菌经IPTG诱导后出现一条52.0 ku左右的特异性重组蛋白谱带,以纯化的重组蛋白为抗原制备出专一性较强的针对SMYEV的抗血清,该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV。利用DAC-ELISA和RT-PCR对26份草莓试材分别进行SMYEV检测,2种检测方法的检测结果基本一致。【结论】以原核表达的SMYEV CP为抗原可以制备出专一性较强、效价较高的SMYEV的抗血清。
关键词
草莓
轻型
黄边病
毒(
smyev
)
CP
原核表达
抗血清
ELISA
Keywords
Strawberry mild yellow edge virus(
smyev
)
CP
Prokaryotic expression
Antiserum
ELISA
分类号
S668.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结合内标的RT-PCR技术检测草莓轻型黄边病毒(SMYEV)
蔡斌华
张计育
黄海
李国平
李金凤
高志红
章镇
《江苏农业学报》
CSCD
北大核心
2009
5
下载PDF
职称材料
2
草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3'端序列分析
杨洪一
张志宏
高秀岩
杜国栋
代红艳
李贺
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
12
下载PDF
职称材料
3
利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清
代红艳
于翠梅
张志宏
李贺
马跃
刘月学
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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