草鱼生长激素基因在COS7细胞中转染表达的研究

应用RT-PCR技术克隆草鱼生长激素(gcGH)的cDNA,将此cDNA定向插入真核表达载体VR1020中,构建成重组真核表达质粒VgcGH.利用脂质体法使质粒VgcGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实gcGH基因在COS7细胞中得到了持续和正确的转染表达.

大肠杆菌生产基因重组草鱼生长激素的分离纯化

草鱼生长激素cDNA在大肠杆菌细胞中表达后，重组草鱼生长激素在胞内形成不溶性的包含体．这种包含体在洗涤、变性、复性和C12反相层析等步骤后，产物再经快速蛋白液相色谱，重组草鱼生长激素在SDS-聚丙烯酰凝胶电泳中显示均一性，纯度可达90％放射免疫分析表明：重组草鱼生长激素具有草鱼生长激素的免疫活住．分离纯化产率约为1L细菌培养液1～2m重组草鱼生长激素．

转基因鱼离市场还有多远

根据本实验室转基因鱼育种研究的现状，讨论了“转基因鱼离市场还有多远”这一令人关注的问题。转草鱼生长激素重组基因（ＣＡｇｃＧＨ）鲤鱼具有明显的快速生长和饵料节省效应，鱼体有高干物质含量及高蛋白低脂肪的生化组成，是一种优质食用鱼。把一种鱼的基因转移到另一种鱼，即转“全鱼”基因后，受体鱼基因组改变的程度，仅相当于两种鱼杂交的１０万分之一左右，因而它对水生态系统的胁迫作用是轻微的，充其量可视为与相应杂交鱼实质等同。我国研制了世界第一尾转基因鱼。现在，在我国把第一个转基因动物养殖品种，即转ＣＡｇｃＧＨ鲤鱼首先推向市场，就技术条件而言已经成熟，问题只是如何获得政府批准以及社会和舆论的认同。