荔枝核总皂苷对脂多糖诱导的神经细胞损伤的影响研究

目的:探讨荔枝核总皂苷(LSS)对脂多糖(LPS)诱导的PC12细胞活力、细胞凋亡率及免疫因子的影响及机制。方法:3. 75、7. 5、15、30、60 mg/L的LSS处理PC12细胞24 h,MTT检测细胞存活率;随机将PC12细胞分为对照组(细胞不做任何处理)、LPS处理组(1 mg/ml的LPS处理PC12细胞24 h)、LSS处理组(3. 75 mg/L的LSS处理细胞24 h后,再用1 mg/ml的LPS处理PC12细胞24 h)。MTT及流式细胞术分别检测细胞存活率及凋亡率; H2DCFHDA荧光探针检测ROS含量;Western blot检测PI3K/AKT信号通路PI3K、p-AKT和下游cycyin D1、Bax及免疫抑制因子HIF-1α和VEGF的蛋白表达。结果:3. 75 mg/L和7. 5 mg/L的LSS对PC12细胞存活率的影响与0 mg/L LSS比较差异无统计学意义(P>0. 05),而15 mg/L、30 mg/L和60 mg/L的LSS均能显著降低PC12细胞存活率,与0 mg/L LSS比较差异具有统计学意义(P <0. 05)。选择3. 75 mg/L的LSS为研究对象;与对照组比较,LPS组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,ROS含量显著升高,PI3K、p-AKT和cycyin D1的蛋白表达显著降低,Bax、HIF-1α和VEGF的蛋白表达显著升高(P<0. 05)。与LPS组比较,LSS组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低,ROS含量显著降低,PI3K、p-AKT和cycyin D1的蛋白表达显著升高,Bax、HIF-1α和VEGF的蛋白表达显著降低(P<0. 05)。结论:LSS可提高PC12细胞存活率,降低细胞凋亡,提高免疫,其机制与激活PI3K/AKT信号、提高细胞ROS水平及抑制HIF-1α和VEGF的表达有关。

超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷工艺优化及其抗炎作用研究

优选超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷的工艺条件,并研究其抗炎活性。在单因素的基础上,以乙醇浓度、提取时间、料液比为影响因素,通过正交试验优化提取工艺。进而以LPS诱导RAW 264.7细胞为炎症模型,考察其抗炎活性。最优提取工艺为70%乙醇为溶剂,料液比为1∶20,超声辅助提取为30 min,总皂苷的含量为4.61 mg/g;抗炎活性研究结果表明荔枝核总皂苷在2~80μg/mL未表现出细胞毒性,但对LPS诱导RAW264.7细胞导致的NO和IL-6的释放均有很好的抑制效果。超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷工艺稳定可靠,而且具有较低的细胞毒性和较好的抗炎活性。