新型荜茇酰胺衍生物C12阻滞A549细胞周期、诱导细胞凋亡和自噬

该研究旨在探讨荜茇酰胺衍生物C12对非小细胞肺癌(NSCLC)A549的体外抑制活性及其作用机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和克隆形成实验检测C12对细胞增殖的影响;划痕实验和Transwell实验检测C12对细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响;采用转录组测序检测C12处理后的差异表达基因;Western blot验证C12对相关蛋白表达变化的影响。结果显示,C12能有效抑制A549的增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞周期于G2/M期,并通过调控Bax和Bcl-2的表达水平诱导细胞凋亡;其调控基因主要存在于细胞染色体组分中,显著富集于催化活性和DNA结合相关的分子功能、细胞周期生物学过程和MAPK、PI3K/Akt信号通路;C12能上调细胞内的ROS水平,通过上调p-JNK、p-Erk1/2和p-p38的表达来激活MAPK信号通路诱导细胞凋亡;同时,C12通过下调p-Akt和p-mTOR,上调LC3-II诱导细胞自噬。总之,C12在A549中可以激活MAPK信号通路诱导细胞凋亡和抑制PI3K/Akt/m-TOR信号通路诱导细胞自噬。

荜茇酰胺衍生物C12对人非小细胞肺癌H1299细胞的抗肿瘤作用及其机制研究

(E)-1-(4-(3-(5-氯-6-氧代-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)-3-氧代丙基-1-烯-1-基)苯基)-3-(4-氟苯基)脲(以下简称C12)是课题组前期合成的一个新型荜茇酰胺衍生物。本研究以人非小细胞肺癌H1299细胞为研究对象,探讨C12对人非小细胞肺癌的体外抗肿瘤作用及其作用机制。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium、MTT)法、划痕实验、平板克隆实验和Transwell细胞侵袭实验检测C12对H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响;通过流式细胞术检测C12对H1299细胞周期、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的影响;通过蛋白印迹实验检测p21、Cyclin B1、CDK1、Bax、Bcl-2、JNK、p-JNK、Erk1/2、p-Erk1/2、p38和p-p38的表达,探讨C12的抗肿瘤作用机制。结果显示,C12呈时间和浓度依赖性地抑制H1299的增殖、迁移和侵袭;流式细胞结果显示,C12能阻滞H1299细胞周期于G2/M期,升高ROS水平,降低MMP并诱导细胞凋亡;蛋白印迹结果显示,C12通过下调Cyclin B1和CDK1蛋白表达将H1299细胞阻滞于G2/M期,上调Bax/Bcl-2水平诱导细胞凋亡,上调MAPK通路中p-JNK、p-Erk1/2和p-p38的表达。综上所述,C12能够显著抑制H1299的增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡,其机制可能与激活MAPK信号通路有关。

荜茇酰胺衍生物的合成及其抑制人K562白血病多柔比星耐药株的作用

目的:对天然产物荜茇酰胺(piperlongumine,PL)进行结构修饰,并探讨PL衍生物对人慢性髓系白血病细胞多柔比星耐药株K562/Adr的抑制作用。方法:以PL为先导结构,用含硫或含氮杂环替代其9位苯环结构,合成一系列PL衍生物,并通过HPLC法测定了衍生物在纯水中的溶解度;采用CCK-8法检测PL及其衍生物对K562和K562/Adr细胞的IC_(50);使用AutoDock Vina和CDOCKER程序将PL衍生物与多药耐药性蛋白ABCB1蛋白(PDB ID:6C0V)进行分子对接。结果:共设计合成7个PL衍生物,且引入含氮杂环的化合物的水溶性均高于PL。活性测试结果显示绝大部分衍生物表现出良好的抗K562和K562/Adr增殖活性,其中化合物11g相比PL提高约10倍;分子对接结果表明,与其他衍生物和对照药物相比,11g表现出对ABCB1蛋白更高的结合亲和力。结论:含有川芎嗪片段的PL衍生物11g具有较好的抗K562/Adr活性,值得进一步深入研究。