Plackett-burman法优化荞麦多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上,采用Plackett-burman试验、最陡爬坡试验和Box-behnken试验设计优化超声波辅助复合酶法提取通荞3号多糖工艺进行优化,测定多糖含量采用苯酚-硫酸法。结果表明,最优提取工艺为中性蛋白酶(50000.0 U/g)添加量0.9000%,纤维素酶(≥15000.0 U/g)添加量0.0450%,果胶酶(≥50.0 U/g)添加量0.0324%,料液比1∶20(g∶mL),pH值7.0,提取温度60℃,超声功率424 W,在此条件下多糖得率为7.31%。并对通荞3号多糖体外抗氧化能力做了相关研究,结果表明,多糖质量浓度为1.0 g/mL时清除DPPH自由基、ABTS+自由基的能力分别是62.31%和88.78%,FRAP为76.76%,由此可以为通荞3号的开发利用提供理论依据。

金荞麦多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:观察探讨金荞麦多糖对免疫低下小鼠的影响。方法:昆明小鼠予不同剂量(200、100、50 mg/kg)金荞麦多糖灌胃4 w,于给药第25天以环磷酰胺腹腔注射复制免疫低下小鼠模型,观察其对模型小鼠胸腺系数、脾脏系数、廓清指数、吞噬指数、半数溶血值、足趾厚度差的影响。结果:金荞麦多糖中、低剂量能显著提高模型小鼠脾脏系数、廓清指数、吞噬指数、半数溶血值及足趾厚度差(P<0.05),金荞麦中剂量还能显著提高模型小鼠的胸腺系数(P<0.05)。结论:金荞麦多糖适当剂量具有增强免疫低下小鼠免疫功能的作用。

荞麦多糖对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的:研究荞麦多糖对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法:采用四氯化碳(CC l4)、硫代乙酰胺(TAA)、扑热息痛(AAP)致小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清SGPT活性。结果:荞麦多糖溶液对四氯化碳、扑热息痛所致小鼠实验性肝损伤有明显保护作用,但对硫代乙酰胺所致小鼠实验性肝损伤无明显的保护作用。结论:荞麦多糖有保肝作用。

荞麦多糖对小鼠睡眠功能和自发活动的影响

目的:探讨荞麦多糖对小鼠睡眠功能和自发活动的影响。方法:①小鼠腹腔注射荞麦多糖,15min后放入吊笼中,稳定3min后记录用药后15s内小鼠活动波形。②腹腔注射荞麦多糖,15min后,腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠,观察小鼠翻正反射消失时间。③腹腔注射荞麦多糖,15min后,腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠,观察小鼠翻正反射消失时间。结果:①荞麦多糖能非常显著抑制小鼠自发活动。②荞麦多糖能显著加速阈上剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间。③荞麦多糖能显著加速阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间,比较差异有非常显著性。与戊巴比妥钠有协同的中枢抑制作用。结论:荞麦多糖具有明显的延长昆明种小鼠睡眠时间和抑制小鼠自发性活动。

金荞麦多糖最佳提取条件研究

目的:实验确定金荞麦多糖的提取最佳条件。方法:采用热水浸提发,在不同浸提温度、时间、固液比和浸提次数进行单因素实验,通过再通过L9(34)正交实验确定最佳条件。结果:金荞麦多糖提取最佳条件为浸提温度80℃,时间3h,固液比为1:7,反复浸提3次。结论:该工艺稳定性好,多糖率高。

苦荞麦多糖对铅中毒小鼠的保护作用研究

研究了苦荞麦多糖对铅中毒小鼠的保护作用及作用机制。采用小鼠每天腹腔注射醋酸铅溶液7 mg/kg,连续注射8 d制备铅中毒模型,自造模第12 d起各组小鼠每天灌胃相应剂量的苦荞麦多糖进行治疗,连续20 d。以避暗实验和Morris水迷宫实验对小鼠进行学习记忆能力和空间辨别能力的测试,采用原子分光光度法分别测定小鼠组织和血浆中的铅含量,采用紫外分光光度法测定组织及血浆中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,采用透射电镜观察铅中毒小鼠海马神经元超微结构。研究发现苦荞麦多糖可显著改善铅中毒小鼠的学习记忆能力和空间辨别能力,显著降低铅中毒小鼠组织和血浆中的铅含量,显著提高铅中毒小鼠组织和血浆中SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量,连续20 d灌胃给药苦荞麦多糖可以显著改善铅中毒造成的海马神经元损伤。因此苦荞麦多糖可通过提高铅中毒小鼠抗氧化酶活性,清除自由基,改善铅中毒造成的损伤。

荞麦花多糖的提取及含量测定

采用热水提取、乙醇沉淀的方法从荞麦花中提取出了水溶性多糖,采用硫酸-苯酚法在波长为497nm处进行了糖含量的测定,求得其校准曲线的回归方程为y=0.00508x+0.0294,相关系数为r=0.9978。平均回收率为99%—103%,RSD为0.74%。结果显示:荞麦花多糖的产率为2.5%,糖含量为41.63%。

荞麦蜂花粉多糖对肉仔鸡免疫功能、血脂及抗氧化能力的影响

试验旨在观察日粮中添加荞麦蜂花粉多糖对肉仔鸡免疫功能、血脂及抗氧化能力的影响。将200羽1日龄AA肉仔鸡随机分为空白对照组、试验1、2、3组,每组5个重复,每个重复10羽。其中对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加500.0、1 000.0、1 500.0 mg/kg的荞麦蜂花粉多糖。饲养试验期为42 d。结果表明,与对照组相比,试验1、2、3组可显著提高肉仔鸡脾脏指数、胸腺指数与血清IgG含量,能显著升高血清SOD与GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05)。另外,试验2、3组还可显著提高法氏囊指数与血清IgA、IgM含量,并明显降低血清胆固醇含量(P<0.05)。但各试验组对肉仔鸡生长性能、甘油三酯含量无明显影响(P>0.05)。试验结果表明,基础日粮中添加荞麦蜂花粉多糖,可明显促进肉仔鸡免疫功能,降低血清胆固醇,并明显提高肉仔鸡抗氧化能力。提示荞麦蜂花粉多糖可能是一种较好的纯天然肉仔鸡免疫增强剂与抗氧化剂。

荞麦蜂花粉多糖对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响

目的:观察荞麦蜂花粉多糖对四氧嘧啶(ALX)性糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。方法:用ALX建立糖尿病大鼠模型,分别用荞麦蜂花粉多糖150mg/(kg.d)、300mg/(kg.d)及阳性对照药苯乙双胍350mg/(kg.d)灌胃治疗,正常对照组及糖尿病模型对照组则给等容积生理盐水。连续给药14d后,分别测定各组大鼠血糖、血脂。结果:荞麦蜂花粉多糖150mg/(kg.d)、300mg/(kg.d)能明显降低ALX所致糖尿病大鼠高血糖,与糖尿病模型对照组相比,P<0.01。同时,相同剂量的荞麦蜂花粉多糖还能明显降低ALX性糖尿病大鼠血清TG(P<0.05)、TC、LDL-C(P<0.01)。另外,荞麦蜂花粉多糖300mg/(kg.d)还能使糖尿病大鼠血清HDL-C显著回升(P<0.05)。但荞麦蜂花粉多糖150mg/(kg.d)对HDL-C则无明显影响(P>0.05)。结论:荞麦蜂花粉多糖能降低ALX性糖尿病大鼠高血糖、血脂,提示荞麦蜂花粉多糖对糖尿病的防治具有一定的应用价值。

荞麦麸皮多糖的分离纯化及其外貌表征的分析

采用水提醇沉法对荞麦麸皮多糖(Buckwheat bran polysaccharide,BBP)进行提取,通过DEAE-52纤维素柱层析法和Sephadex G-200对其进行分离纯化,采用凝胶过滤法对多糖组分的分子量进行测定,采用扫描电镜对荞麦麸皮多糖及其分离纯化的多糖组分的外貌进行分析,用红外光谱对分离纯化的三个荞麦麸皮多糖组分的苷键构型进行分析。结果表明:DEAE-52纤维素和Sephadex G-200对荞麦麸皮粗多糖具有较好的分离纯化效果,得到了三个多糖组分(BBP-Ⅰ、BBP-Ⅱ和BBP-Ⅲ),其分子量分别为1.56×10~4Da、5.85×10~4Da、8.45×10~4Da。扫描电镜的结果表明,BBP其表面粗糙,凹凸不平,三个分离纯化的多糖组分形貌差异较大,分别以球状、片状、棒状为主。红外光谱扫描表明BBP-Ⅰ和BBP-Ⅲ为ɑ-糖苷键化合物,BBP-Ⅱ为β-糖苷键化合物。荞麦麸皮多糖组分外貌的差异性为其进一步的结构探究提供了重要依据。

荞麦花粉多糖的提取工艺及抗氧化性能研究

以水提醇沉法从荞麦蜂花粉中提取可溶性多糖,采用单因素和正交试验确定多糖提取的最佳工艺条件;通过对邻苯三酚碱性自氧化体系和H2O2/Fe2+体系体外研究荞麦花粉多糖对氧化反应的影响,评价多糖的抗氧化性能。结果表明,荞麦蜂花粉多糖最佳提取工艺为提取温度90℃、提取时间5h、料液比(m/v)1:20、pH为8.0;此工艺条件下多糖平均得率为2.52%。此多糖对O2-.和.OH具有一定的清除作用,当多糖浓度为3.5mg/mL时,对O2-.自由基的清除率为39.41%,是同浓度Vc的0.4倍,对.OH自由基的清除率为65.23%,是同浓度Vc的0.66倍。表明荞麦蜂花粉多糖具有一定的抗氧化性但不及Vc。

云南产两种蜂花粉多糖对小鼠免疫功能的影响

目的观察云南产荞麦蜂花粉多糖(PBPB)与红花蜂花粉多糖(PBPC)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法用腹腔注射环磷酰胺(Cy)建立免疫抑制小鼠模型,分别用PBPB 75 mg·kg^(-1)、150 mg·kg^(-1)、300 mg·kg^(-1)与PBPC 75 mg·kg^(-1)、150 mg·kg^(-1)、300 mg·kg^(-1)灌胃给药,连续14天后,分别检测相应免疫指标。结果与Cy模型对照组相比,PBPB中、高剂量组与PBPC低、中、高剂量组能使小鼠胸腺指数与脾指数回升,能促进小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能,还能提高小鼠血清溶血素水平,促进淋巴细胞转化增殖。结论 PBPB与PBPC对Cy所致免疫功能抑制小鼠的非特异性免疫功能、体液免疫功能与细胞免疫功能有明显促进作用。