响应面法优化荞麦花黄酮提取工艺研究

以荞麦花为原材料,采用超声辅助法对荞麦花黄酮进行了提取,并在单因素的基础上采用响应面法对提取工艺进行了优化,得到最佳工艺条件为:乙醇体积分数63%、料液比1∶21 g/mL、超声时间59 min。

荞麦花叶黄酮对2型糖尿病大鼠肝损伤及IRS-2、PI3K、NF-κB表达的影响

目的观察荞麦花叶黄酮(FBFL)对2型糖尿病大鼠肝损伤和IRS-2、PI3K及NF-κB表达的影响,并探讨其可能机制。方法用高脂饲料和链脲佐菌素建立大鼠2型糖尿病模型,以FBFL为干预因素,动态观察随机血糖(PBG)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS)、血ALT、AST,光镜和电镜观察肝脏病理改变,免疫组化和Western blot检测肝IRS-2和PI3K蛋白表达。ELISA法检测肝组织NF-κB含量。结果与正常组比较,模型组大鼠血中PBG、FBG、FINS、HOMA-IR(胰岛素抵抗指数)、ALT、AST均明显升高(P<0.05,P<0.01),肝病理损伤明显,同时IRS-2、PI3K蛋白表达减少,NF-κB含量增加;FBFL治疗组能明显改善上述指标的变化,增加胰岛素敏感性,使肝组织损伤减轻和上调IRS-2、PI3K蛋白表达及减少NF-κB含量,且FBFL高剂量作用更明显。结论 FBFL对糖尿病肝损伤有抑制作用,其机制可能是通过降低血糖、改善胰岛素抵抗,上调IRS-2、PI3K蛋白表达及下调NF-κB蛋白表达等多途径实现的。

荞麦花叶黄酮对2型糖尿病C_(57)小鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响

目的观察荞麦花叶黄酮(FBFL)对2型糖尿病(T2DM)C57小鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗(IR)的影响并探讨其可能的机制。方法采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素建立T2DM模型。将C57小鼠分为6组,即正常对照组、模型对照组、阿卡波糖组和FBFL低、中、高剂量组,每组11只。各组小鼠灌胃1次/d,连续4周。血糖仪测定空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)每周1次,并进行口服葡萄糖耐量试验测定;放免法测定血清胰岛素;生化仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。酶联免疫法检测游离脂肪酸(FFA);HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变。结果与模型对照组比较,FBFL各剂量组FBG、PBG不同程度降低,糖耐量改善,血清胰岛素水平降低,提高胰岛素敏感指数提高,TC、TG、LDL-C及FFA降低,HDL-C增高(P<0.05,P<0.01),同时胰腺组织病理改变不同程度减轻。FBFL高剂量组上述作用最为明显。结论 FBFL对T2DM C57小鼠具有降糖、降脂及改善IR作用,其IR改善作用可能通过调血脂作用产生。

荞麦花总黄酮对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的 :研究荞麦花总黄酮 (TFBF)对异丙肾上腺素(ISO)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及机制 .方法 :用ISOsc5mg/ (kg·d) ,建立大鼠心肌肥厚模型 ,同时用TFBFig给药[(0 .0 5 ,0 .1和 0 .2g/ (kg·d) ) ,连续 1 4d .测定心脏质量指数、心室RNA、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )、丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及血清心肌酶活性 ,并观察心肌病理改变 .结果 :TFBF能明显减轻心脏质量 ,缩短心肌纤维直径 ,减少心室RNA ,AngⅡ ,MDA含量 ,增加SOD活性 ,抑制血清乳酸脱氢酶和肌酸磷酸激酶的活性 .结论

荞麦花叶总黄酮的舒张血管作用及其机制

目的探讨荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对大鼠离体胸主动脉的舒张作用与机制。方法采用离体血管环灌流装置,经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化;激光扫描共聚焦显微镜技术检测血管平滑肌细胞内钙浓度。结果在苯肾上腺素(phenylephrine,PE)10-6mmol.L-1或KCl60 mmol.L-1预收缩的保留内皮和去除内皮的血管环中,TFBFL均能够浓度依赖性的引起血管舒张;相对于去除内皮的血管环,TFBFL对保留内皮的血管环的舒张作用更明显。保留内皮的血管环用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(100mmol.L-1)预孵后,TFBFL诱导的血管舒张作用明显减弱。在无钙灌流液中,用KCl 60 mmol.L-1去极化去除内皮的血管环后,逐渐加入Ca2+,使血管环呈浓度依赖性收缩;TFBFL(0.8 mg.L-1)孵育10 min后可使CaCl2的量效曲线向下移位且可使PE在无钙灌流液中诱导的血管环最大收缩幅度明显降低。激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内钙的结果表明,TFBFL浓度依赖性(0.4、0.8 mg.L-1)的抑制了静息状态平滑肌细胞质内钙浓度的升高。结论 TFBFL能够浓度依赖性舒张大鼠胸主动脉,其作用机制可能是降低细胞内游离Ca2+浓度;对于保留内皮的血管环,TFBFL也作用于血管内皮细胞,促进一氧化氮的释放,引起血管舒张。

荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的影响

目的探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制。方法 9周龄♂db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H,0.1 g·kg^(-1))、低(EFBFL-L,0.05 g·kg^(-1))剂量组,二甲双胍对照组,模型对照组,每组10只。同时以10只db/m小鼠为正常对照组。各组均每天灌胃给药1次,连续8周。于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测小鼠随机血糖(RBG),8周后处死取血清检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和糖基化终末代谢产物(AGEs)含量;HE染色光镜下观察心肌组织形态学改变,电镜下观察心肌超微结构;免疫组化法和Western blot法检测心肌组织葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达。结果 EFBFL能有效抑制db/db小鼠心肌细胞损伤及心肌纤维化的病理进程,降低小鼠血糖及血清中CK、CK-MB、AGEs的含量,增加小鼠心肌组织Glut4蛋白表达水平。结论 EFBFL对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤具有抑制作用,其机制可能与降低小鼠血糖、抑制AGEs的产生及促进心肌细胞Glut4蛋白的表达有关。

荞麦花叶黄酮对2型糖尿病大鼠血糖稳态的影响

目的观察荞麦花叶黄酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL)对糖尿病大鼠血糖波动的影响。方法以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,测定不同浓度FBFL对α-葡萄糖苷酶活性的影响;用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,用不同剂量FBFL干预6周,测定大鼠随机血糖、餐后血糖的动态变化,禁食24 h内血糖波动及糖耐量情况。结果 FBFL对α-葡萄糖苷酶活性有明显的抑制作用,IC50为4.205 mg/L,与阿卡波糖(ACAR)的效价比约为15.24∶1;FBFL能降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值(P<0.05),并改善糖耐量,有明显的剂量和时间依赖性。结论 FBFL可降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值,对血糖波动有稳定作用,其机制可能是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性实现的。

荞麦花叶总黄酮对大鼠2型糖尿病胰岛素抵抗的影响

目的研究荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠的血糖、血脂和对胰岛素抵抗(IR)的影响,并探讨其作用机制。方法以脂肪乳灌胃联合低剂量四氧嘧啶注射方法制作2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗模型。将SD大鼠随机分为正常组,模型组,TFBFL高、中、低治疗组,罗格列酮(RSG)治疗组。连续灌胃6周后,测定空腹血糖(FBG),糖耐量(OTGG),空腹胰岛素(FINS),血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),游离脂肪酸(FFA),糖化血红蛋白(GHb),计算胰岛素敏感指数(ISI)和KITT。HE染色观察胰腺和肾组织形态学改变。结果与正常对照组比较,模型组大鼠FBG,OT-GG,FINS,TG,TC,FFA,GHb明显升高(P<0.05或P<0.01),ISI明显降低(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组相比,荞麦花叶黄酮能使FBG,OTGG,FINS,TG,TC,FFA,GHb降低(P<0.05或P<0.01)而升高ISI(P<0.05或P<0.01),呈一定剂量依赖性,高剂量组与罗格列酮相近。组织HE染色光镜下观察显示,模型组大鼠胰腺及肾组织结构异常。不同剂量的TFBFL均能明显改善上述组织的病理改变。结论TFBFL能够剂量依赖性的增加2型糖尿病大鼠胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗,对糖尿病大鼠各器官损伤具有保护作用。

荞麦花总黄酮和槲皮素对α-葡萄糖苷酶活性的影响

目的观察荞麦花总黄酮和槲皮素对体内外α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,探讨其降血糖机制。方法提取大鼠小肠α-葡萄糖苷酶,分别测定荞麦花总黄酮及槲皮素对其活性的抑制作用;采用健康雄性SD大鼠为实验对象,随机分麦芽糖(2g/kg)组、麦芽糖(2g/kg)+荞麦花总黄酮(0.4g/kg)组、麦芽糖(2g/kg)+槲皮素(0.04g/kg)组、麦芽糖(2g/kg)+阿卡波糖(0.1g/kg)组,禁食12h后灌胃给药,分别于给药前和给药后60min用血糖仪测血糖。结果荞麦花总黄酮及槲皮素在浓度20,2,0.2mg/ml时能够显著抑制α-葡萄糖苷酶的活性(P<0.05),抑制率分别为54.74%,42.91%,35.79%和74.98%,59.38%和45.79%;二者对大鼠餐后血糖也有明显的抑制作用,与对照组比较,阿卡波糖、荞麦花总黄酮+麦芽糖和槲皮素+麦芽糖抑制率分别为74.22%,53.06%,64.33%(P<0.01)。结论荞麦花总黄酮和槲皮素在体内外对α-葡萄糖苷酶的活性均有明显的抑制作用,可能是其降血糖机制之一。

荞麦花多糖的提取及含量测定

采用热水提取、乙醇沉淀的方法从荞麦花中提取出了水溶性多糖,采用硫酸-苯酚法在波长为497nm处进行了糖含量的测定,求得其校准曲线的回归方程为y=0.00508x+0.0294,相关系数为r=0.9978。平均回收率为99%—103%,RSD为0.74%。结果显示:荞麦花多糖的产率为2.5%,糖含量为41.63%。

荞麦花叶总黄酮对糖尿病大鼠心脏的结构功能和心肌组织TNF-α含量的影响

目的观察荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对链脲佐菌素(STZ)加脂肪乳诱导的糖尿病大鼠心肌的保护作用,探讨其可能机制。方法采用STZ腹腔注射加脂肪乳灌胃诱导大鼠糖尿病动物模型。观察TFBFL治疗前后心脏结构和功能的变化,检测心肌组织TNF-α的含量。结果 TFBFL改善了糖尿病大鼠心脏左心室的结构和功能,降低了心肌组织中TNF-α的含量。结论 TFBFL可改善糖尿病心肌病大鼠左心室功能,具有心肌保护作用。

荞麦花叶总黄酮对大鼠血栓形成及血黏度的影响

目的探讨荞麦花叶总黄酮对血栓形成和血黏度的影响并探讨其可能机理。方法分别用荞麦花叶总黄酮(TFB-FL)事先干预2周,用大鼠动-静脉旁路血栓模型观察血栓的形成,测定血栓湿重、干重及大鼠全血黏度;放射免疫法测定TXB2和6-keto-PGF1α水平。结果 TFBFL可剂量依赖性抑制大鼠血栓形成,其血栓干重及湿重与对照组相比均显著降低(P<0.05或P<0.01),并有效地降低了血浆中TXB2水平、升高6-keto-PGF1α水平(P<0.05或P<0.01),对血液黏度也有显著地降低作用(P<0.05或P<0.01)。结论 TFBFL具有良好的预防血栓形成和降低血黏度的功效,同时可影响血管活性物质和改善血液流变学的作用。

吸光光度法测定荞麦花叶中总黄酮

荞麦花叶样品经由乙醚浸泡除杂,用甲醇索式抽提,并以芦丁为对照品,采用吸光光度法测定总黄酮的含量.建立了芦丁浓度与吸光度关系的回归方程,方法的回收率为99.2%～108.2%,精密度为0.35%.此方法操作简单易行,结果稳定可靠.

荞麦花叶总黄酮对糖尿病大鼠的心脏保护作用

目的观察荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对链脲佐菌素(STZ)加脂肪乳诱导的糖尿病大鼠心肌的保护作用,并探讨可能机制。方法采用STZ腹腔注射加脂肪乳灌胃诱导糖尿病大鼠模型。观察TFBFL治疗前后血糖、血脂,计算心脏重量指数(HWI)和左室重量指数(LVMI)、光镜下观察心肌组织的形态结构改变和电镜观察心肌超微结构的改变。结果TFBFL降低糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA),改善糖尿病大鼠心脏左心室结构,抑制糖尿病大鼠HWI和LVMI的增加。结论TFBFL对STZ所致2型糖尿病大鼠心肌的损伤具有一定的抑制作用。

荞麦花叶总黄酮对实验性大鼠心肌肥厚的保护作用(英文)

目的探讨荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对去甲肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其可能的机制。方法将大鼠随机分为6组(n=12):空白对照组,肥厚模型组,TFBFLⅠ、Ⅱ、Ⅲ组,和卡托普利治疗组(Cap组)。用去甲肾上腺素(NE)腹腔注射1.5mg/(kg·d),Bid,建立大鼠心肌肥厚模型,同时TFBFL和Cap灌胃给药100、200、400和50mg/(kg·d),o.d.,连续15d。观察心电图(ECG),左心室肥厚指数(LVWI:lvw/bw),和心重指数(HWI:hw/bw,lvw/hw)。采用比色法测定心室肌钙含量,用放免分析法检测血浆、心肌、肾脏血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)生成率(反映肾素活性)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果与肥厚模型组比,TFBFL能剂量依赖性的改善心肌肥厚大鼠的ECG,降低LVWI和HWI,心肌钙含量和心肌AngⅡ含量,但对血浆肾脏AngⅡ含量无明显影响和心肌、血浆和肾脏AngⅠ生成率均无明显影响,且与阳性药物卡托普利组治疗效果相近。结论荞麦花叶总黄酮对大鼠心肌肥厚具有保护作用,其机制可能与拮抗心肌局部肾素-血管紧张素(RAS)系统有关。

荞麦花叶提取物对S_(180)荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用

目的研究荞麦花叶提取物(extraction of buckwheat flower and leaf,EBFL)对环磷酰胺(CTX)化疗S180荷瘤小鼠的减毒和增效作用。方法建立小鼠S180实体瘤模型;大、小剂量治疗组分别ig荞麦花叶提取物20,40 mg/kg,连续给药14 d,测定荷瘤小鼠的生存期和化疗药物CTX的毒副作用,以及荞麦花叶提取物对CTX的减毒和增效作用。同时检测荞麦花叶提取物对淋巴细胞增殖、IL-2水平等免疫系统功能的影响。结果 EBFL对肿瘤抑制作用不明显但可使荷瘤小鼠生存率明显增高。与CTX伍用可发挥协同作用,提高荷瘤小鼠生存质量,体质量、白细胞计数、免疫器官指数,与CTX阳性对照组比较均显示显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论荞麦花叶提取物可提高机体免疫力,延长生存期,同时减轻CTX的毒性。

荞麦花叶总黄酮对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

目的观察荞麦花叶总黄酮(TFBFL)对链脲佐菌素(STZ)加脂肪乳诱导糖尿病大鼠心肌超微结构的影响,并探讨可能机制。方法采用STZ腹腔注射加脂肪乳灌胃诱导大鼠糖尿病模型,观察TFBFL治疗前后血糖、血脂,光镜下观察心肌组织的形态结构改变,电镜观察心肌超微结构改变。结果TFBFL可降低糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(T-CHO)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA),改善糖尿病大鼠心脏结构。结论TFBFL对STZ所致2型糖尿病大鼠心肌的损伤具有抑制作用。

荞麦花水溶物中黄酮的提取及含量测定

用水将荞麦花中的水溶性成分提取后,再从水溶性提取物中将黄酮类物质分离,用硝酸铝-亚硝酸钠方法对黄酮的含量进行了测定,求得其校准曲线的回归方程为y=11.902x-0.021,相关系数为r=0.9996,平均回收率为100.8%,RSD=0.98%(n=5)。

六个不同类型荞麦花花粉粒形态的电镜观察比较研究

对二倍体甜荞长花柱类型 (ES2 s)、二倍体甜荞短花柱类型 (ES2 S)、四倍体甜荞长花柱类型 (ES4s)、四倍体甜荞短花柱类型 (ES4S)、四倍体有翅细野荞 (GR4HI)、四倍体无翅细野荞 (GR4HO)等 6个不同荞麦类型花的花粉形态学进行了电镜观察。结果表明 :这些荞麦类型的花粉粒都是椭圆形 ,都有网状纹饰、3孔沟等特征。二倍体甜荞染色体加倍后形成的四倍体甜荞 ,相对于二倍体甜荞而言 ,花粉粒显著增大和明显变圆。无论二倍体还是四倍体甜荞 ,其长花柱型花的花粉粒都比其对应短花柱型花的花粉粒要小。尽管四倍体甜荞和四倍体细野荞在染色体数目和倍性上一样 ,但是它们在花粉粒的大小上有显著差异。