薄层扫描测定中荧光与增荧光成分的最佳激发波长研究

目的:为排除干扰,提高荧光扫描的灵敏度,对荧光与增荧光成分的最佳激发波长进行了选择研究。方法:采用同一荧光斑点,以不同的滤光片和不连续的波长,逐一激发,记录其相应强度积分值,以波长为横坐标,积分值为纵坐标,绘制曲线图,取曲线图的最大积分值条件,作为最佳激发波长和首选滤光片。结果:通过对盐酸小檗碱、蛇床子素、丹皮酚与胆酸的优选,其最佳激发波长分别为(338±2)nm、(320±2)nm、(292±2)nm和(385±2)nm,首选滤光片分别是3号、1号、1号和2号,灵敏度高,点样量在ng级,即可准确定量。结论:证实了荧光化合物都沿用(366±1)nm为激发波长的不合理性,揭示了首选滤光片和激发波长因化合物不同而异,验证方法时,需通过优选。