荧光偏振免疫分析方法快速检测沙拉沙星残留

以异硫氰酸荧光素(FITC)标记沙拉沙星合成荧光标记物,采用薄层色谱法提纯,优化了反应时间、标记物和抗体的工作浓度,建立了沙拉沙星的快速荧光偏振免疫分析法(FPIA)。本方法测定沙拉沙星在缓冲液中的半数抑制浓度(IC50)为43.2μg/L;检测范围为5.7～327μg/L,可以达到国家规定的动物性食品中兽药最高残留限量(80μg/kg)的要求。本研究考察了FPIA测定沙拉沙星的动力学过程及对其它4种喹诺酮类药物的交叉反应。结果表明,环丙沙星、恩诺沙星、加替沙星及氧氟沙星的交叉反应率分别为3.3%,1.8%,1.7%和0.7%。在牛奶和猪尿中沙拉沙星的回收率分别在71%～94%和74%～102%之间。本方法操作简单快捷,整个检测过程只需5 min、而且灵敏度较高、特异性强,适用于动物性食品中沙拉沙星残留的快速筛选检测。

荧光偏振免疫分析方法分析磺胺二甲基嘧啶

建立了检测磺胺二甲基嘧啶的荧光偏振免疫分析方法.合成了3种结构不同的荧光标记物,并用薄层色谱法提纯.研究了不同结构的荧光标记物对FPIA方法灵敏度的影响.该FPIA方法在缓冲液中的检出限为1.6 μg/L,半数抑制量（IC50）为41 μg/L,检测范围为5～458 μg/L,可以达到食品中SMZ最低残留限量的要求.研究了FPIA的动力学过程及对其它16种磺胺类药物的交叉反应,结果显示,SMZ、磺胺甲基嘧啶和磺胺二甲基恶唑的交叉反应率分别为100%、8.7%和2.4%,其它磺胺类药物的交叉反应率均低于1%.

大田软海绵酸荧光偏振免疫分析方法研究

设计使用荧光试剂PDAM与大田软海绵酸单（OA）反应合成了荧光标记物,并在OA单克隆抗体的基础上建立了OA荧光偏振免疫（FPIA）检测方法。该FPIA方法检测限为4.6 ng/mL,检测范围为7.0-88.7 ng/mLI,C50为24.9 ng/mL。本方法操作简单、稳定,有望应用于高通量筛查牡蛎样品中OA含量。

婴幼儿配方奶粉中牛乳β-乳球蛋白的荧光偏振免疫分析方法研究

使用荧光偏振免疫分析技术分析婴幼儿奶粉中牛乳蛋白β-乳球蛋白水平。通过免疫家兔制备抗β-乳球蛋白的多克隆抗体,合成异硫氰酸荧光素I标记的示踪物,在优化条件下,建立β-乳球蛋白的荧光偏振免疫技术检测方法。方法检测线性范围为0.22mg/L-2.53mg/L,IC50为0.75mg/L,检出限为0.09mg/L。本方法操作简便、快速,适合筛查婴幼儿配方奶粉中β-乳球蛋白。

河豚毒素荧光偏振免疫分析方法的建立

河豚毒素主要存在于河豚鱼中,是一种致命的神经毒素。将量子点标记于河豚毒素,并将其作为示踪物,获得高且稳定的荧光信号,建立荧光偏振免疫分析技术检测河豚毒素。所建立的方法检测河豚毒素检测范围为1.36~101.27μg/L,IC50值为11.76μg/L,检测限为0.67μg/L。在该方法的检测范围内标准平均回收率为（99.91±2.60）%,变异系数为2.60%。与竞争性ELISA相比较,本方法河豚毒素测定值与竞争性ELISA测定值呈线性相关,且具有简单、快速等特点,可应用于临床诊断和食品安全检测。

对比胶体金免疫层析法与荧光偏振法诊断布鲁氏菌病准确性的Meta分析

目的应用诊断性试验Meta分析,定量评价胶体金免疫层析法(GICA)与荧光偏振法(FPA)诊断布鲁氏菌病的准确性。方法通过检索中文数据库(CNKI、万方、CBM)、英文数据库(PubMed、Embase、Cochrane),分别收集GICA和FPA诊断布鲁氏菌病的相关文献,检索截至2021年12月。按照纳入标准及排除标准筛选文献、提取数据,采用RevMan5.3对入选文献进行质量评价,应用Stata12.0与SAS9.4拟合双变量随机效应模型评价GICA与FPA诊断布鲁氏菌病准确性的结果。结果纳入符合标准的文献29篇,共22914个样本。诊断布鲁氏菌感染的合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、DOR值和AUC,GICA法分别为95%(95%CI:90%~97%)、96%(95%CI:93%~98%)、25.20(95%CI:13.34~47.58)、0.06(95%CI:0.03~0.10)、418.30(95%CI:170.98~1027.03)和0.99(95%CI:0.97~0.99),FPA法分别为96%(95%CI:94%~97%)、99%(95%CI:96%~100%)、72.29(95%CI:24.03~217.51)、0.04(95%CI:0.03~0.06)、1821.75(95%CI:516.42~6426.52)和0.99(95%CI:0.97~0.99),且两种方法合并DOR值的差异有统计学意义(P<0.001)。Deek’s漏斗图检验显示两种方法均无明显发表偏倚。结论在布鲁氏菌病的实验室检测中,GICA与FPA均有良好的诊断价值,FPA的综合诊断效能更高。

荧光偏振免疫分析技术的研究进展

对荧光偏振免疫分析技术的研究进展作了详细的评述。介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理和研究热点 ,评述了它在临床检验、环境与食品监测和农药残留量分析等领域中的应用 ,对荧光偏振免疫分析方法的优缺点作了总结 ,引文献 4

荧光偏振免疫分析检测粮食及其制品中的真菌毒素研究进展

及时、快速和准确地检测粮食中真菌毒素的污染,从而对其进行严格、科学的控制和处理是保障中国粮食安全和人民身体健康的重要途径。基于特异性分子识别的均相荧光偏振免疫分析技术(Fluorescence Polarization Immunoassay,FPIA)兼具高通量、高速度、高灵敏和易于实现自动化等优点,特别适用于大批量粮食样本的快速筛选。文章综述了近10年来荧光偏振免疫分析检测粮食中真菌毒素的研究进展,并着重讨论了荧光偏振免疫分析的发展方向。

荧光偏振免疫分析在农药和兽药残留检测中的研究进展

荧光偏振免疫分析技术是以免疫竞争原理和荧光偏振原理为基础的一种以快速筛选为目的的分析技术,主要用于测定小分子量物质(抗原),就是检测荧光标记抗原在结合特异性的抗体前后,荧光偏振值的变化,是均相的竞争免疫分析方法,反应系统完全在溶液中,不需要分离结合的和未结合的抗体,不受溶液颜色、仪器灵敏度变化的影响,该技术最显著的特点是操作简单和检测时间短,适用于大量样本的快速筛选检测。目前该技术在农药和兽药残留分析中已经得到了应用,但是国内的相关研究尚未见报道。文章综述了荧光偏振免疫分析的历史背景,发展历程和主要原理,概括了荧光偏振免疫分析方法在农药和兽药残留分析中的研究进展。

呋喃西林代谢物荧光偏振免疫检测方法研究

利用新制备的抗体首次建立了呋喃西林代谢物氨基脲(SEM)的荧光偏振免疫分析(FPIA)方法。通过设计合成新的SEM半抗原CEPSEM(2-(4-((2-carbamoylhydrazono)methyl)phenoxy)aceticacid),偶联载体蛋白后免疫新西兰大白兔,制备了亲和力高、特异性好的多克隆抗体。结合新设计合成的荧光示踪物CEPSEM-HDF建立了SEM的FPIA方法。结果表明:在示踪物浓度为0.5nmol/L,抗体稀释度为1/100的优化条件下,IC50为47.9μg/L,检出限为8.3μg/L,线性范围为15.8～145.7μg/L。该方法特异性强(和其它相关兽药交叉反应小于0.1%),稳定性好(批内相对标准偏差小于2.5%,批间相对标准偏差小于6.3%)。

荧光偏振免疫分析法在小分子药物小鼠血药浓度检测中的应用

目的:建立应用荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定小鼠血药浓度的实验方法,探讨该方法测定庆大霉素、地高辛和丙戊酸钠3种常见小分子药物小鼠血药浓度的可行性。方法:选用庆大霉素、地高辛和丙戊酸钠标准品,采用荧光偏振(FP)值非线性拟合法确定药物检出限及线性范围,在线性范围内分别设置低、中和高3个浓度组,检测质控偏差、日间精密度和小鼠血清干扰水平。选用30只KM小鼠进行药物代谢曲线测试,分为庆大霉素组(肌肉注射5μg·g-1)、地高辛组(灌胃20ng·g-1)和丙戊酸钠组(灌胃15μg·g-1),每组10只,给药后24h内取5个时间点(1、3、6、12和24h)测定小鼠血药浓度。结果:FPIA法检测3种药物的检出限均在50μg·L-1以下,线性范围较宽(大于10倍检出限),检测质控误差小于5%,日间精密度较高[中和高浓度组变异系数(CV)<5%],小鼠血清对庆大霉素和地高辛的检测效果无明显影响[误差百分比(ER)<5%],高浓度血清对丙戊酸钠的检测效果有一定的负向影响(50%血清组ER为-12.84%)。小鼠给药1h后庆大霉素达到血药浓度峰值,半消期3h;1h后地高辛达到血药浓度峰值,半消期>24h;3h后丙戊酸钠达到血药浓度峰值,半消期6~12h。结论:FPIA法测定小分子药物小鼠血药浓度所需样本量小,精确度高,前处理简单,具有高通量和快速检测的优势特点,可广泛应用于药理学、药剂学和临床检测研究中。

荧光偏振免疫分析技术研究进展

荧光偏振免疫分析技术是一种均相荧光免疫分析法,具有快速、灵敏和环保等优点。本文对这一技术的研究进展作了评述,介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理、优越性、示踪物结构设计、制备、及其应用。

荧光偏振免疫法测定环孢素A全血浓度结果分析

采用荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）测定肾移植受者环孢素Ａ（ＣｓＡ）全血谷浓度，结果发现食物、性别、肝脏功能等均是影响ＣｓＡ全血谷浓度的重要因素；从免疫抑制效果看，术后３个月、３～６个月、６个月以上的理想稳态血浓范围分别为２００～３８０ｎｇ·ｍｌ－１、１５０～３３０ｎｇ·ｍｌ－１和１００～２５０ｎｇ·ｍｌ－１。

荧光偏振免疫分析法研究17种磺胺类药物与抗体亲和力的构效关系

应用4株磺胺二甲基嘧啶(SMZ)多克隆抗体和5种不同结构的荧光标记物(Tracer)建立了荧光偏振免疫分析(FPIA)检测SMZ的方法.讨论了4株多抗对SMZ的检测灵敏度和对17种磺胺类药物(SAs)的相对亲和力趋势,从药物分子二维结构上探讨了多抗对小分子抗原的识别能力.结果表明,3号多抗对SMZ的灵敏度最高,但是4株多抗对17种SAs的相对亲和力趋势相似,说明抗体对抗原的结合力大小与抗原的化学结构有关.

人血清中庆大霉素浓度的荧光偏振免疫分析法

本文通过制备荧光素标记庆大霉素和抗庆大霉素兔血清，建立了人血清中庆大霉素的荧光偏振免疫分析技术。方法的灵敏度0．3mg/L,批内、批间误差CV均小于6％，平均回收率104％，合用其它抗生素不干扰测定结果，与微生物法及放射免疫法比较相关系数γ分别为0．9687和0．9544。荧光偏振免疫法的建立，为临床测定床大霉素浓度提供了一种快速、精确和灵敏的新方法。

荧光偏振免疫法监测环孢素A血药浓度的稳定性分析

目的评价荧光偏振免疫法(FPIA法)测定环孢素A(CsA)血药浓度的稳定性。方法采用FPIA法测定移植患者术后全血CsA浓度,运用统计学方法对其稳定性进行评价。结果FPIA法监测CsA血药浓度日内差、日间差和1年中随行质控的变异系数分别为3.77%,5.41%,6.36%,回收率分别为98.98%～101.80%,97.99%～100.81%,97.86%～101.78%,结果均符合《中国药典》生物样品检测规定。结论FPIA法在长期的临床应用中是稳定、准确和可靠的。

基于长春西汀酸的荧光偏振免疫方法测定磺胺二甲氧基嘧啶

合成了荧光标记物长春西汀酸和示踪物磺胺二甲氧基嘧啶-长春胺酸,并采用薄层色谱法对示踪物进行提纯。以磺胺二甲氧基嘧啶为分析对象,利用示踪物与磺胺二甲氧基嘧啶抗体的特异性反应,采用荧光偏振免疫分析方法(FPIA)研究了荧光标记物的荧光光谱特性。此荧光标记物在357nm的激发光下,于453nm处产生一个荧光发射峰;以荧光素为对照,考察了本方法的灵敏性。结果显示,荧光素的检出限仅为2.7μg/L,而本方法的检测范围为0.5～146μg/L,检出限达到0.5μg/L。本方法的RSD为3.0%,重现性好;其它磺胺类药物对磺胺二甲氧基嘧啶的测定不产生明显干扰。运用本方法检测了饲料中磺胺二甲氧基嘧啶,结果与HPLC法相吻合。

荧光偏振免疫分析在农药残留检测中的研究进展

荧光偏振免疫分析技术是一种将荧光偏振原理和小分子竞争免疫原理相结合的免疫分析方法,主要通过检测荧光标记小分子抗原与抗体结合前后荧光偏振值的变化来间接反映样本中目标分析物的含量。该分析方法用时短,无需洗涤,稳定性较好,适用于样本的快速大量筛选,目前在一些常见农药上有应用报道。本文主要总结了荧光偏振免疫分析技术的发展历程、方法原理以及目前在农药残留检测中的研究现状。

高效毛细管电泳与荧光偏振免疫法测定癫患者血清卡马西平的方法学比较

目的建立高效毛细管电泳(HPCE)法测定癫患者血清卡马西平浓度,比较HPCE法和荧光偏振免疫方法(FPIA)分析卡马西平含量的差异性。方法HPCE法采用石英毛细管柱(27cm×75μm),运行电压18kV,温度30℃,紫外检测波长280nm,以30mmol·L-1磷酸氢二钠(pH=8.0)含75mmol·L-1十二烷基硫酸钠(SDS)为缓冲液,血样经乙酸乙酯提取后氮气吹干,再用运行缓冲液溶解,压力进样10s。FPIA分析采用标准TDx测定方法。结果HPCE方法测定卡马西平在2.188～100.000μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9989),日内和日间RSD均≤5%。结论HPCE方法准确、简便、快速,与FPIA检测结果差异无显著性,因其监测成本低更适用于常规血药监测。