荧光偏振技术在牛妊娠诊断中的应用研究

为了验证荧光偏振技术检测乳汁孕酮(P4)方法的可靠性,本试验研究了牛奶样品冷冻贮存后孕酮含量的稳定性,添加防腐剂对孕酮浓度和结果的影响,牛奶的不同采样方式对结果的影响,不同采奶时间对结果的影响;选取荧光偏振技术检测配种后21d奶样孕酮结果与配后60d定胎的诊断结果进行对比,分析符合率。结果显示,荧光偏振技术检测乳汁孕酮,结果不受冷冻、添加防腐剂影响;配后21d采样结果最佳;人工手动采样比DHI流程采样结果更好;荧光偏振技术检测配后21d奶样孕酮结果与配后60d定胎结果符合率为81.25%。

阿拉善盟骆驼布鲁氏菌病血清学检测方法的比较

骆驼是布鲁氏菌病病原体的重要携带者和感染源之一,骆驼布病的检测至关重要。通过虎红平板凝集试验(RBT)和荧光偏振方法(FPA)两种方法对已知感染的阿拉善盟102峰骆驼血清样本进行检测,结果RBT方法检测表明90份样本呈阴性,12份阳性;FPA检测表明102份样本全部为阴性;表明RBT检测骆驼布病假阳性率较高,FPA法准确可靠。建议在临床诊断中选用RBT作为骆驼布病的初筛检测方法,对初筛检测结果为阳性的样本,结合临床症状,采用FPA进行复核。

布鲁氏菌病荧光偏振抗体检测方法的建立

【目的】布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病,是由布鲁氏菌引起的以感染家畜为主的人畜共患传染病,造成严重的公共卫生问题。目前全世界范围内消除该病的主要方法是扑杀与免疫相结合,所以建立快速准确的诊断方法对防治和清除布病非常必要。本文建立布鲁氏菌病荧光偏振(FPA)抗体检测方法,为布鲁氏菌病(布病)的快速高效诊断提供技术手段。【方法】提纯猪种布鲁氏菌S2株脂多糖O链(OPS),经异硫氰酸荧光素(FITC)标记后作为诊断抗原。通过对样品稀释液、抗原稀释度、反应时间等条件的优化,初步建立了布鲁氏菌荧光偏振诊断方法。用该方法对148份布病阳性血清(其中牛血清70份,羊血清78份)和155份布病阴性血清(其中牛血清82份,羊血清73份)进行检测,确定其敏感性和特异性。按确定的技术参数,制备3批布鲁氏菌FPA抗体检测试剂盒,使用质控阴、阳性血清分别评价试剂盒的批内和批间重复性。用400份临床样本比较本研究开发试剂盒与商品化进口FPA试剂盒的符合率。【结果】使用0.5%蔗糖磷酸缓冲液作为血清样品稀释液;标记抗原的使用浓度为90μg/m L;最佳反应时间为3-5 min。本检测方法的判定标准为:δm P值<20时为阴性,δm P值≥20时为阳性。按上述条件建立的FPA检测148份布病阳性血清和155份布病阴性血清,结果敏感性为98.6%,特异性为98.7%。对400份临床样本的比对检测显示,研究建立的FPA方法与进口商品化试剂盒的总符合率为94.0%。【结论】研究建立的布鲁氏菌PFA抗体检测方法具有良好的特异性和敏感性,可作为一种重要的布病诊断快速诊断方法。

荧光偏振检测技术在布鲁杆菌病诊断中的对比实验分析

目的 分析荧光偏振检测方法对布鲁杆菌病（简称布病）的诊断价值.方法 2013年8月至2014年4月,在黑龙江省农垦总局总医院选择布病患者240例作为病例组,正常体检人员287例作为对照组,抽取空腹静脉血4 ml,分离血清.采用荧光偏振检测方法（FPA）和4项传统血清学检测方法[包括虎红试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）、抗人免疫球蛋白试验（Coomb＇s试验）和半胱氨酸试验]进行检测,比较FPA与4项传统血清学检测方法的一致性、灵敏度和特异度.结果 FPA与4项传统血清学检测方法均有较好的一致性（Kappa值均≥0.75）;FPA检测方法的敏感度（89.17％）高于RBPT （87.08％）、SAT （85.00％）、Coomb＇s试验（74.17％）和半胱氨酸试验（75.83％）.FPA检测方法的特异度（94.08％）高于RBPT（89.90％）、Coomb＇s（81.53％）,但低于SAT（98.95％）、半胱氨酸凝集试验（99.30％）.结论 FPA可以作为人间布病的实验室筛查诊断方法,值得广泛推广使用.

中药中抗癫痫化学药品的血药浓度检测分析

目的:分析服用市售中药治疗的抗癫痫药中常用化学药物血药浓度监测结果,探讨临床合理用药.方法:采用荧光偏振免疫分析方法测定仅服抗癫痫中药患者血中丙戊酸钠(VPA)、卡马西平(CBZ)、苯巴比妥(PB)、苯妥英钠(PHT)存在的种类及浓度.结果:40例患者中,血中测定含VPA 11例,浓度(14.0±17.4)mg·L;含CBZ 24例,浓度(1.4±1.8)mg·L-1;含PB 26例,浓度(10.1±8.7)mg·L-1;含PHT 35例,浓度(4.5±6.0)mg·L-1;所有患者血中均测出1～4种化学药品,其中90%患者测出2～4种化学药品.结论:许多市售中药中含不同成分和浓度的抗癫痫常用化学药物,给癫痫患者的合理治疗造成很大困难.

同型半胱氨酸血症与缺血性脑血管病的相关性研究

目的:研究血浆同型半胱氨酸(Hcy)与缺血性脑血管病的关系。方法:采用荧光偏振免疫分析方法测定55例缺血性脑血管病患者和34例健康者血浆Hcy水平,同时记录入院时神经功能缺损评分(NIHSS)、血压、血糖,分析其关系。结果:①病例组与对照组的血浆Hcy水平有显著性差异,病例组高于对照组。②脑血管病组中高Hcy血症者和正常Hcy者的入院评分有显著性差异;伴有高血压、糖尿病者和血压、血糖正常者的入院评分无显著性差异。结论:高同型半胱氨酸血症与缺血性脑血管病的危险性增加有关,并且增加其严重程度。

布病血清学检测在布鲁杆菌病诊断中的价值

目的探讨在布鲁杆菌病的诊断过程中使用血清学检测的诊断价值。方法对检查确诊的35例布鲁杆菌病患者展开研究,检查时间在2016年12月-2019年10月,另外选取同时间段内进行健康体检的32例健康体检者进行对比研究,所有受检者均分别使用试管凝集试验(SAT)、荧光偏振检测方法(FPA)、虎红平板凝集试验(RBPT)和半胱氨酸检测,探讨血清学检测的诊断价值。结果RBPT与SAT相比,Kappa值为0.765,检测的一致性良好;FPA与SAT相比,Kappa值为0.760,检测的一致性良好;半胱氨酸检测与SAT相比,Kappa值为0.479,检测的一致性较差;RBPT检测的诊断符合率为85.07%,FPA检测的诊断符合率为80.60%,半胱氨酸检测的诊断符合率为71.64%。结论在布鲁杆菌病的诊断中RBPT在初步筛查中均有较高的诊断价值,而半胱氨酸检测和FPA在疾病的急慢性分期方面应用价值更为显著。

布病血清学检测在布鲁杆菌病诊断中的价值

目的探讨布鲁氏杆菌病（布病）血清学检测在布鲁杆菌病急、慢性疾病诊断中的临床应用意义。方法选取来黑龙江省农垦总局总医院就诊的514名布鲁杆菌病患者与327名健康体检者为研究对象，分别用虎红平板凝集试验（rose bengal plate agglutination test，RBPT）、荧光偏振检测方法（fluorescence polarization assay，FPA）、试管凝集试验（serum agglutination test，SAT）和半胱氨酸检测对其布鲁杆菌病进行检测。结果SAT与RBPT、FPA检测结果的Kappa值为0.952、0.968，有较好的一致性。RBPT、FPA和半胱氨酸在布氏杆菌病诊断中的符合率分别是96.91%、95.96%、74.67%；布鲁氏杆菌病急性期半胱氨酸的阳性预测值（100%）高于RBPT（92.59%）和FPA（97.18%）的阳性预测值；RBPT阴性预测值（99.04%）高于FPA（93.86%）和半胱氨酸（63.74%）的阳性预测值。在布鲁氏杆菌病慢性期半胱氨酸的阳性预测值（100%）高于RBPT（93.98%）和FPA（97.89%）；RBPT阴性预测值（98.41%）高于FPA（97.87%）和半胱氨酸（92.37%）。结论RBPT可用于布氏杆菌病的初筛，FPA和半胱氨酸检测结果对判断疾病急性期和慢性期有一定的辅助诊断价值。