干式免疫荧光定量分析法检测降钙素原与血培养结果的关系研究

目的分析与讨论干式免疫荧光定量分析法检测血培养、降钙素原(PCT)的关系和价值。方法筛选2021年1月至2023年2月64例血流感染(BSI)患者为研究对象,均检验PCT水平及血培养,对血培养阴性和阳性结果患者PCT水平对比,同时分析阳性患者病原菌分布情况,对比不同病原菌感染患者PCT指标间的差异。结果64例患者经血培养检验,12例患者结果呈阳性,占18.75%,52例阴性,占81.25%;血培养结果为阳性患者PCT水平高于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05),12例血培养阳性患者中,发现病原菌以革兰阴性菌占比最高,为50.00%(6/12),其次是革兰氏阳性菌33.33%(4/12)与真菌16.67%(2/12);不同病原菌患者PCT水平经对比差异有统计学意义(P<0.05),且革兰氏阴性菌患者PCT水平高于革兰氏阳性菌与真菌的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCT对诊断血流具有重要意义,并且快速简单,并不能准确确定病原体,可联合使用PCT与血培养,血培养弥补了PCT中的不足,从而可作为诊断血流感染最有价值检测方法。

氟喹诺酮类药物免疫分析方法的研究进展

氟喹诺酮类药物具有广谱高效的优点,现已广泛用于预防和治疗动物的各种感染性疾病。然而,氟喹诺酮类药物长期大量的滥用,在食品中的残留超标,导致体内耐药病原菌的产生,引起人类的耐药性问题。因此,建立快速灵敏的氟喹诺酮类药物检测方法具有重要意义。免疫分析法具有高灵敏和低成本的优势,故受到食品安全领域的广泛关注。因此,该文对氟喹诺酮类药物的抗体制备、各种免疫分析方法(包括酶联免疫吸附法、免疫层析法、荧光免疫分析法和免疫传感器)的原理、特点和应用进行总结,并对氟喹诺酮类药物免疫分析方法的发展趋势进行了展望。

对比胶体金免疫层析法与荧光偏振法诊断布鲁氏菌病准确性的Meta分析

目的应用诊断性试验Meta分析,定量评价胶体金免疫层析法(GICA)与荧光偏振法(FPA)诊断布鲁氏菌病的准确性。方法通过检索中文数据库(CNKI、万方、CBM)、英文数据库(PubMed、Embase、Cochrane),分别收集GICA和FPA诊断布鲁氏菌病的相关文献,检索截至2021年12月。按照纳入标准及排除标准筛选文献、提取数据,采用RevMan5.3对入选文献进行质量评价,应用Stata12.0与SAS9.4拟合双变量随机效应模型评价GICA与FPA诊断布鲁氏菌病准确性的结果。结果纳入符合标准的文献29篇,共22914个样本。诊断布鲁氏菌感染的合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、DOR值和AUC,GICA法分别为95%(95%CI:90%~97%)、96%(95%CI:93%~98%)、25.20(95%CI:13.34~47.58)、0.06(95%CI:0.03~0.10)、418.30(95%CI:170.98~1027.03)和0.99(95%CI:0.97~0.99),FPA法分别为96%(95%CI:94%~97%)、99%(95%CI:96%~100%)、72.29(95%CI:24.03~217.51)、0.04(95%CI:0.03~0.06)、1821.75(95%CI:516.42~6426.52)和0.99(95%CI:0.97~0.99),且两种方法合并DOR值的差异有统计学意义(P<0.001)。Deek’s漏斗图检验显示两种方法均无明显发表偏倚。结论在布鲁氏菌病的实验室检测中,GICA与FPA均有良好的诊断价值,FPA的综合诊断效能更高。

用国产时间分辨荧光免疫分析仪建立检测抗CCP抗体的TrFIA法

目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,分析CCP抗原包被浓度和Eu3+标记抗体最适用量,测定Eu3+标记抗体的标记率,用国产TrFIA仪进行检测,绘制标准曲线并分析本法的线性范围、精密度、特异性,计算回收率。对比分析建立的TrFIA法和欧蒙公司的ELISA法结果的一致率。结果本法CCP抗原的最适包被浓度为5μg/mL,最适Eu3+标记抗体稀释度为1∶1 000;平均每个鼠抗人IgG分子上连接10.27个Eu3+;标准曲线为Y=1.162X+2.819,相关系数(r2)=0.998;批内和批间CV分别为4.8%～5.6%和5.9%～7.6%;平均回收率为97.4%(96.5%～98.6%);用本法检测抗核抗体和抗CCP抗体无交叉反应;与ELISA比对试验结果,两法一致率为96.8%(90/93),Kappa值=0.95。结论建立的TrFIA法敏感性高、特异性好,可为抗CCP抗体的检测提供一种新的选择。

免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能评价

目的评价免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能,为临床选用不同方法的检测试剂盒提供依据。方法选取2022年11月至2023年2月广西中医药大学第一附属医院110例患者的血清作为试验样本,以美国Critical Diagnostics公司的Presage ST2试剂为对照,验证巴迪泰(广西)生物科技有限公司的免疫荧光分析法ST2蛋白检测试剂。使用线性回归分析法分析两种方法的相关性,通过Kappa检验分析两种方法定性判断检测结果的一致性,采用Bland-Altman Plot分析两种方法定量检测结果的一致性。结果线性回归分析法拟合的一元线性回归方程为y=0.9878x+1.6977,相关系数r=0.9959;Kappa检验的Kappa系数=0.901;Bland-Altman Plot分析结果显示,Mean±1.96s范围内检测结果的占比为96.36%(106/110)。结论巴迪泰(广西)免疫荧光分析法的ST2试剂与酶联免疫吸附法的Presage ST2试剂检测ST2蛋白的相关性密切、一致性高,等效性良好,均可满足临床检验需求。

丙肝病毒抗体检测运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法的应用价值观察

研究分析时间分辨荧光分析法和酶联免疫法于丙肝病毒抗体检测中应用效果。方法 丙型肝炎行丙肝病毒抗体检测患者2022年1月至同年12月选取521例,运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法做丙肝病毒抗体检测,检测作用做比对分析。结果 时间分辨荧光分析法对于丙肝病毒抗体检出率与酶联免疫法丙肝病毒抗体检出率比对无差异(P>0.05),丙肝病毒抗体检出情况与金标准比对,时间分辨荧光分析法较酶联免疫法准确率、灵敏度较高,优于酶联免疫法(P<0.05)。结论 丙肝病毒抗体检测,时间分辨荧光分析法行检测,对于丙肝病毒抗体有较高,且检测精准度、灵敏度良好。

全自动免疫分析仪在检测SLE相关自身抗体中的应用价值

为了更好地指导临床对系统性红斑狼疮(SLE)的诊疗,本文分析研究使用全自动免疫分析仪检测两种主流方法学对抗核抗体(ANA)特定靶抗原/抗体的应用价值。随机从2022年7月~2023年7月该院收集的样本中选取272例作为研究对象,入组样本按要求分别采用磁条码免疫荧光发光法(DLCM)进行抗核抗体15项检测和化学发光法(CLIA)进行dsDNA检测,统计DLCM检测抗核抗体15项检的敏感性和特异性,CLIA检测SLE患者治疗前后抗dsDNA抗体浓度变化情况。通过研究结果发现全自动免疫分析仪一机两用,在ANA检测应用上具有检测结果快速精准,经济高效更具性价比,可在临床上广泛推广使用。

P-选择素时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用

目的 建立时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)用于检测血栓形成相关疾病患者的血浆P 选择素的含量 ,并探讨其临床意义。方法 用抗人血小板单抗SZ 5 1 IgG包被 ,将Eu3+ N (对 异硫氰酸苄基 ) 二乙烯四乙酸与另一个血小板单抗S12连接以制备Eu3+ S12示踪剂 ,β 二酮为发光增强剂 ,采用平衡饱和法建立时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)用于分析糖尿病、高血脂、脑梗塞患者及正常人血浆中P 选择素含量的变化 ,并与流式细胞术 (FCM)和酶标记免疫吸附分析法 (ELISA)作比较。结果 方法灵敏度为 0 98ng/ml,批内和批间CV分别为 4 2 3 %和 6 6 7% ,平均回收率为 97 2 4% ,可测范围为 4 1～ 80ng/ml。应用TRFIA测定 2 2例高血脂、18例脑梗塞患者和 2 0例正常人血浆中P 选择素含量 ,分别为 8 0 8± 1 4ng/ml,12 5 1± 3 6ng/ml和19 0 4± 7 9ng/ml,显著高于正常人 (3 0 7± 1 6 4ng/ml) (P <0 0 1)。同时与ELISA和FCM方法检测血浆内P 选择素和血小板膜表面表达情况作比较 ,结果一致。结论 TRFIA检测血浆P 选择素的方法可靠、灵敏、方便 。

微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析方法

目的建立高灵敏的微囊藻毒素（MC-LR）的时间分辨荧光间接竞争免疫分析方法（MC-LR-TRnA）。方法以MC-LR与牛血清白蛋白的偶联物（MC-LR-BSA）包被96孔板为回相抗原，与游离MC-LR共同竞争有限的抗MC-LR多克隆抗体；用稀土离子Eu^3＋标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果该方法的灵敏度为0．01μg／L，测量范围为0．01—20μg／L，ED80、ED50和ED20分别为0.16、0.57和1．70μg／L。平均回收率为101％，与MC-LF和MC-RR平均交叉反应分别为0.73％和35％。比较MC-LR-TRFIA和MC-LR-E：LISA检测MC-LR，两者的相关系数为0.958。研究表明，MC-LR-TRFIA是目前报导的MC-LR检测中最灵敏的方法。结论该方法适用于水样中MC-LR的定量检测。

时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2

β-hCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的:采用时间分辨荧光免疫分析技术建立高灵敏度、高特异性的β-hCG的快速全自动超微量检测方法。方法:以β-hCG单克隆抗体812#包被板,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3+标记β-hCG单克隆抗体827#,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。采用结果:特异性试验显示,与AFP、LH均无交叉反应;平均回收率为96.5%;健全性佳;50例血清β-hCG的TRFIA检测与CLIA(BeckmanAcess)分析结果一致,相关系数为0.972。结论:β-hCG时间分辨荧光免疫分析法灵敏度高、稳定性好,具有很好的临床应用前景。平衡饱和法建立β-hCG时间分辨荧光免疫分析,数据采用Logit-Log法函数数据处理程序处理。

总PSA时间分辨免疫荧光分析法的建立

利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术建立人血清总PSA(前列腺特异性抗原)的快速全自动检测方法及其诊断试剂研制,该法采用双抗体夹心法建立tPSA-TRFIA,对该法和研制试剂的指标评价表明:方法的线性测量范围为0.50～250μg/L,灵敏度为0.06μg/L,批内批间的精密度分别为5.58%～9.71%,6.49%～12.12%。与CEA、CA12-5、CA15-3、CA19-9、AFP无交叉反应。353份血清标本用本试剂与国外其他试剂同时检测,其相关性达到94.4%,结果表明,试剂测定各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品。

时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎血清标志物的分析方法性能验证

目的建立时间分辨荧光免疫检测法的方法学性能验证方案和试验方法。方法采用新波ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪和雅培AxSYM免疫发光分析仪测定乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)各项目,分析前者的检测精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间及抗干扰性能,分析两者检测结果间的相关性。结果 ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪检测HBV-M各项目的精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间均符合国际公认质量要求。血清中一定浓度的三酰甘油、总胆红素或血红蛋白对部分HBV-M项目产生不同程度的干扰。ANYTEST2000与AxSYM检测HBV-M各项目结果间差异无统计学意义(P>0.05),且具有良好的相关性。结论 ANYTEST2000分析仪测定HBV-M的主要分析性能验证结果与厂商规定的分析性能基本一致。本研究所建立的分析仪性能验证方案和方法有助于提高仪器的检测质量。

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

动物性食品中诺氟沙星残留的荧光免疫分析方法研究

利用杂交瘤技术制备了诺氟沙星的单克隆抗体,建立了以抗诺氯沙星单克隆抗体为基础的荧光免疫分析方法,工作曲线表明在10～500μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I=31.92 logC-5.0083,相关系数r=0.9965,对诺氟沙星最低检出限达6.09μg/L,抑制中浓度为52.88μg/L,且对其它结构类似喹诺酮类药物均有特异性识别。本法可应用于检测动物性食品中残留的微量诺氟沙星。

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用吴笑春，高月（广州军区武汉总医院４３００７０）时间分辨荧光免疫分析（Ｔｉｍｅ—ＲｅｓｏｌｖｅｄＦｌｕｏｉｍ－ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＴＲＦＩＡ）是７０年代末［１］发展起来的一种新型超微量免疫分析技术，它克...

血清透明质酸时间分辨荧光免疫分析法的反应条件优化及其临床应用

目的优化血清透明质酸（HA）时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）的反应条件,并探讨其临床应用价值。方法采用TRFIA检测血清中HA的含量,确定参与HA-TRFIA的各反应成分的浓度。结果最佳反应条件为包被浓度10 mg/L、HA结合蛋白（HABP）1∶500稀释、铕标记HA（Eu^3＋-BSA-HA）1∶200稀释。敏感性为5.17μg/L,批内变异系数（CV）为2.21%-3.78%,批间CV为3.73%-5.40%,平均回收率为100.4%。该法HA测定值与放射免疫测定值显著相关,且与临床结果一致。结论本研究建立的血清HA-TRFIA是一种灵敏准确的分析方法,适合临床应用。

人血清中庆大霉素浓度的荧光偏振免疫分析法

本文通过制备荧光素标记庆大霉素和抗庆大霉素兔血清，建立了人血清中庆大霉素的荧光偏振免疫分析技术。方法的灵敏度0．3mg/L,批内、批间误差CV均小于6％，平均回收率104％，合用其它抗生素不干扰测定结果，与微生物法及放射免疫法比较相关系数γ分别为0．9687和0．9544。荧光偏振免疫法的建立，为临床测定床大霉素浓度提供了一种快速、精确和灵敏的新方法。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本,利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例;采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前(0h)和溶血后0.5、2、18h的胰岛素浓度;通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);随着溶血时间的延长,胰岛素浓度呈明显下降趋势,0.5、2、18h检测结果与0h检测结果相比,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显,但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响;标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。

化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。