异硫氰酸荧光素-葡聚糖眶后注射观察鼠视网膜血管的可行性研究

背景糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等视网膜血管性疾病的发病率逐年提高，客观有效地评价视网膜的血管情况是视网膜血管性疾病防治研究的关键。异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC—dextran）眶后注射法是评价C57BL／6J小鼠视网膜血管的新方法，但目前少有关于此方法是否适合于其他小鼠及大鼠研究的报道。目的评估用FITC—dextran眶后注射法观察实验常用鼠种视网膜血管的可行性，为相关的实验研究提供参考依据。方法选择SPF级C57BL／6J小鼠、昆明小鼠、SD大鼠、Wistar大鼠各12只，均分为实验组和对照组各6只。实验组动物右眼眶后注射9ml／kgFITC—dextran溶液，对照组右眼眶后注射等体积PBS溶液。注射10S后大鼠以过量麻醉法处死，小鼠以颈椎脱臼法处死，摘取双侧眼球，荧光显微镜下行双侧眼球后组织以及视网膜铺片检查。结果C57BL／6J小鼠、昆明小鼠实验组双眼均可以观察到FITC—dextran绿色荧光标识的视网膜血管，但对照组各眼均观察不到视网膜血管形态；SD大鼠、Wistar大鼠实验组及对照组受检眼在荧光显微镜下均未观察到FITC—dextran标识的视网膜血管。小鼠、大鼠实验组右眼均可见由FITC—dextran浸染的绿色球后组织，而左眼球后组织均未见荧光。结论FITC—dextran眶后注射法适合于观察小鼠的视网膜血管，不适于观察大鼠的视网膜血管。

耳后注射异硫氰酸荧光素标记葡聚糖的可能转运途径

目的探讨耳后注射异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)进入内耳的可能途径。方法以异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(分子量为3 000~5 000,20μl)为示踪剂,将200只出生24h内的昆明乳鼠随机分为耳后对照组[5mg/ml的葡聚糖(Dextran)20μl耳后注射]、耳后实验组(5mg/ml的FITC-Dextran 20μl耳后注射)、肌注对照组(5mg/ml的葡聚糖20μl肌肉注射)、肌注实验组(5mg/ml FITC-Dextran 20μl肌肉注射),每组50只;于给药后0min、5min、15min、30min、1h、3h、5h、7h、12h、24h处死动物,取其头颅做冰冻切片,应用激光共聚焦成像技术观察分析荧光示踪剂在乙状窦、内淋巴囊及耳蜗的分布及强度变化,以实验组与相应对照组荧光强度比值为强度值。结果肌注实验组乙状窦在给药后3h、内淋巴囊及耳蜗在给药后12h可检测到荧光强度轻度增高,其余各部位各时间点均未检测出明显荧光增强。耳后实验组耳后注射示踪剂后,乙状窦、内淋巴囊分别在给药后即刻、耳蜗在给药后30min可观察到荧光信号,随后荧光强度随时间延长依次升高,乙状窦、内淋巴囊、耳蜗的荧光强度达峰值时间分别为给药后5~15、30、60min,到12小时强度均再次小幅度升高。结论药物在耳后注射较肌肉注射更易于进入内淋巴液,可能径路为:示踪剂首先通过局部循环和局部渗透至乙状窦内富集,随后通过乙状窦与内淋巴囊间的脉络关系进入内淋巴液,最终逆内淋巴浓度梯度作用于内耳。

燕麦β-葡聚糖对低盐羊肉肉糜凝胶特性的影响

将燕麦β-葡聚糖(oatβ-glucan,OG)作为替代物加入羊肉肉糜中等量替代食盐,采用5个不同OG替代量0%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%,即对应肉糜中的盐含量为2.0%、1.6%、1.2%、0.8%、0.4%。通过对复合肉糜凝胶的蒸煮损失率、保水性、水分分布及含量、色泽、凝胶强度、质构、肌原纤维蛋白二级结构以及扫描电镜进行测定分析筛选出相对合适的OG替代添加量。结果表明:随着OG替代量的增加,复合肉糜凝胶的蒸煮损失率先下降后逐渐升高,保水性则先升高后逐渐降低;当添加1.6%OG时,凝胶的持水能力显著下降(P<0.05),而低场核磁共振分析表明高含量的OG会使凝胶中的弱结合水与自由水向不易流动水转移;凝胶色泽亮度L^(*)和白度逐渐增加(P<0.05),凝胶横切面呈现明显的白色;凝胶的破裂力与破裂距离在0.4%OG替代量时达到较好效果,改善了凝胶强度,而较高替代量的OG则对凝胶强度不利;凝胶硬度、内聚性、咀嚼性以及恢复性在OG替代量达到0.8%时显著降低(P<0.05),而凝胶弹性虽呈现与其他指标相同趋势但不同OG替代量之间差异并不显著(P>0.05);在微观结构的观察中,凝胶在较高OG替代量(>0.8%)时,肌原纤维蛋白二级结构接近对照组(P>0.05),扫描电镜图显示其结构更加松散,孔隙增多。通过相关性与主成分分析判断出在0.4%OG替代量下肉糜凝胶特性综合得分要优于其他实验组,在维持羊肉肉糜凝胶品质的同时保证了食盐摄入量的进一步减少。

耐盐性魔芋葡甘聚糖吸水树脂的制备

以魔芋葡甘聚糖(KGM)为原料接枝丙烯酰胺、丙烯酸制备耐盐性吸水树脂,研究了接枝共聚反应单体及KGM质量配比、中和度、交联剂浓度、引发剂浓度、乙二胺四乙酸(EDTA)质量分数对吸水树脂吸液倍率的影响,通过Box-Behnken实验设计对制备条件进行优化。结果表明,丙烯酰胺与丙烯酸质量比为0.192,交联剂浓度为0.067g/mol,引发剂浓度为0.439g/mol,中和度为90%,乙二胺四乙酸(EDTA)质量分数为12.2%时,该耐盐性树脂吸生理盐水倍率达125g/g,吸纯水倍率达700g/g。

改进荧光法测定β-葡聚糖含量研究

本研究尝试了用 930荧光光度计为测定仪器 ,利用改进荧光法快速测定 β -葡聚糖含量 ,并对该测定方法的测定条件、准确度及精密度进行了深入研究 ,证明该测定方法是一种简单。

巯基葡聚糖凝胶分离富集微乳液增敏三甲氧基苯基荧光酮光度法测定痕量锌

研究了微乳液介质中 ,pH =10 .4时 ,锌与三甲氧基苯基荧光酮 (TM PF)显色生成稳定的 1∶2络合物 ,于 5 80nm处摩尔吸光系数为 2 .94× 10 5L·mol-1·cm-1,锌含量在 0～ 0 .4g/L范围内符合比耳定律。引入微乳液介质 ,显著改善了锌的显色条件 ,使体系灵敏度提高。采用吸附容量大 ,且机械性能好的巯基葡聚糖凝胶分离富集 ,消除了共存离子的干扰 ,降低了测定体系的检出限。用所拟方法测定了施尔康药品、奶粉、味精、血清、尿样和发样中的锌 ,相对标准偏差低于 3.7% ;回收率在 95 .2 %～ 10 5 %。

巯基葡聚糖凝胶分离富集微乳液增敏三甲氧基苯基荧光酮光度法测定痕量铜

研究在微乳液介质中,pH10.40时,铜与三甲氧基苯基荧光酮(TM PF)显色生成稳定的1∶2配合物,在552nm处摩尔吸光系数为1.46×105L·mol-1·cm-1,铜含量在0～0.6μg·mL-1范围内符合比耳定律,引入微乳液介质,显著改善了铜的显色条件,使体系灵敏度提高。采用吸附容量大,而机械性能好的巯基葡聚糖凝胶分离富集,消除了共存离子的干扰,降低了测定体系的检出限。测定了血样、尿样、水样和矿石样品中铜的测定,相对标准偏差低于4.8%,回收率为94.2%～106%。

乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物性质的荧光光谱法分析

乳清分离蛋白与葡聚糖的混合物在干热处理条件下,发生了以褐变为特征的美拉德反应。当葡聚糖分子量由67kD增至150kD时,游离氨基含量分别下降了35.77%和30.53%,糖链越长,其接入到蛋白质肽链的难度越大。采用荧光光谱对乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物的性质进行分析。内源荧光光谱图显示,接枝产物在405nm的最大荧光强度显著提高,且350～500nm范围内的荧光强度顺序为:G67>G150,这说明接枝物中有Maillard反应体系所特有的荧光物质生成;由外援荧光光谱图得出,接枝产物在470nm的最大荧光强度均有明显降低,各溶液体系中荧光强度高低顺序依次为:WPI>G150>G67。疏水性指数的测定进一步说明两种不同分子量的葡聚糖接入到蛋白质肽链中,对乳清分离蛋白的疏水性均有一定的屏蔽作用。

巯基葡聚糖凝胶分离富集微乳液增敏邻硝基苯基荧光酮光度法测定环境样品中痕量镉的研究

报道了在(CPB-OP)微乳液介质中,以pH=10.40硼砂-NaOH为缓冲溶液,镉与邻硝基苯基荧光酮(o-NPF)生成1:3有色配合物,于620 nm处摩尔吸光系数为1.23×10~5L·mol^(-1)·cm^(-1)。镉含量在0～0.76μg·mL^(-1)范围内符合比耳定律,检出限为9.2×10^(-5)μg·mL^(-1)。采用巯基葡聚糖凝胶分离富集,可消除共存离子的干扰。该方法用于水样和污泥样品中的痕量镉的测定,结果满意。

桑黄中β-葡聚糖快速荧光光谱检测方法研究

建立了以海带多糖为标准样品,与苯胺蓝特异结合,荧光光谱法测定桑黄多糖中β-D-葡聚糖含量的准确、经济、快速的检测方法.对96孔板、标准样品、回收率、精密度及稳定性进行考察.结果表明：在激发波长为398 nm,发射波长为503 nm测试条件下,海带多糖质量浓度在0～15μg/mL范围内与荧光强度呈现良好的线性关系,桑黄粗多糖中β-D-葡聚糖含量测定结果为19.86％,平均回收率为98.39％.并对市售酵母葡聚糖粉中β-葡聚糖含量进行了测定,质量分数为82.29％,与产品标识含量相符.

微乳液增敏巯基葡聚糖凝胶分离富集邻氯苯基荧光酮光度法测定痕量镉的研究

研究了微乳液介质存在下 ,在pH=10.8硼砂 -NaOH的缓冲溶液中 ,镉与邻氯苯基荧光酮 (o_CPF)显色生成稳定的1∶3配合物 ,在600nm处摩尔吸光系数为1.1×105L·mol -1·cm -1 ,镉含量在0～0.8mg/L范围内符合比耳定律。采用巯基葡聚糖凝胶分离富集 ,消除了共存离子的干扰 ,显著提高了方法的选择性和灵敏度 ,该方法成功地用于测定水样和发样中的痕量镉 ,结果的相对标准偏差均小于5.2 % ,回收率在92 %～105 %之间。

巯基葡聚糖分离富集催化动力学荧光猝灭法测定痕量镉

痕量组分镉的测定对于工业、环境、健康有着重要的意义。研究了在pH=5.2邻苯二甲酸氢钾-NaOH介质中,痕量镉催化H2O2氧化3-（4′-氟苯基）-5-（2′-羧基苯偶氮）若丹宁,而荧光猝灭存在明显的催化作用,由此建立了动力学荧光法测定痕量镉的新方法。该体系的激发和发射波长分别为λex/λem=307nm/408nm,通过实验测定反应表观活化能为59.06kJ/mol;反应速率常数为0.101s-1;线性范围为0~10.0μg/L;检出限为3.9×10-7g/L。采用巯基葡聚糖凝胶分离富集,消除了共存离子的干扰,显著提高了方法的选择性和灵敏度。本方法应用于食品和人发中镉的测定获得满意的结果。

燕麦麸中β-葡聚糖的提取及荧光法测定

以燕麦麸为原料,分别进行灭酶和不灭酶处理,通过水提法提取β-葡聚糖,并采用荧光光度法测定原料中β-葡聚糖含量。结果表明,Calcofluor的荧光强度与β-葡聚糖含量呈良好的直线关系(r=0.9977),原料经两种工艺处理后,β-葡聚糖含量分别为8.54%,7.92%

有机盐制备的Fe_3O_4-葡聚糖纳米粒子的磁性能及表征

利用葡糖酸铁(C12H22FeO14·2H2O)和柠檬酸铁(C6H5O7Fe·5H2O)参与的化学共沉积法制备出单分散核心氧化铁的平均粒径为4.1nm,葡聚糖厚度约为11nm,总体平均粒径为26nm的Fe3O4葡聚糖复合纳米粒子.研究结果表明,复合粒子Fe3O4葡聚糖具有超顺磁性.制备过程中没有N2保护,得到的Fe3O4无机粒子的晶体结构几乎没有发生变化,证明了有机盐的抗氧化性,合成的Fe3O4葡聚糖复合纳米粒子具有较好的磁性能.其在室温下(300K)的饱和磁化强度为52emu/g,低温下(5K)的饱和磁化强度为63emu/g.并利用TEM、XRD、DLS和VSM(振动样品磁强计)等手段对其粒结构、形态、粒径和磁性能进行了表征.

魔芋葡甘低聚糖醛酸丙酯硫酸酯钠盐生物活性研究

为了研究低聚KGM醛酸丙酯硫酸酯钠盐的抗凝和抗栓作用,应用玻片法研究了对小鼠凝血时间的影响;应用大鼠体外颈动脉 -颈静脉血流动旁路法形成血小板血栓模型研究了其对血栓形成的影响;并进行了对兔凝血活酶时间(PT)和纤维白原(Fg)的影响的研究。结果表明剂量在 0.9- 3.6g/kg时,能明显延长小鼠的纤维蛋朱含量效果显著,其LD50 为 8.8lg/kg。说明该物质具明显的高凝血和抗血栓作用,毒性极微。

巯基葡聚糖凝胶分离富集—氢化物发生原子荧光法测定地球化学样品中锑

建立了采用巯基葡聚糖凝胶分离富集,氢化物发生原子荧光法测定地球化学样品中锑的方法。以微波消解分解样品,缩短了样品处理时间,避免了挥发组分的损失。经巯基葡聚糖凝胶吸附柱分离富集锑,用6.0 mol/L HCl洗脱,氢化物发生原子荧光法测定。通过试验确定了仪器最佳工作条件,吸附和洗脱条件,氢化物发生最佳条件及微波消解程序,并对共存干扰元素的允许量进行了研究。在此条件下测定锑,得出该方法的检出限为0.25μg/L,线性范围0.001～0.20 mg/L,相对标准偏差(n=6)为2.9%～5.1%,加标回收率99.2%～104.5%。方法应用于国家一级地球化学标准物质中锑的测定,结果与认定值基本相符。

双醛葡甘聚糖溶液的荧光光谱特性研究

研究了双醛葡甘聚糖水溶液在不同紫外光激发下的荧光光谱特性。结果表明,在220～320 nm紫外光激发下,双醛葡甘聚糖分子环结构中C—O—C醚键单元的氧未共价成键电子吸收激发光子产生n→σ＊跃迁,醛基单元中C=O氧未共价成键电子吸收激发光子产生n→π＊跃迁,最大发射波长分别在425 nm和465 nm左右;溶剂通过氢键等相互作用对双醛葡甘聚糖溶液荧光光谱产生显著影响。研究结果对探索葡甘聚糖水凝胶给药载体与小分子药物的相互作用机理及其释药行为具有指导意义。

巯基葡聚糖凝胶分离富集催化荧光法测定痕量铜

在pH5.0邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠介质中,痕量铜具有明显催化高碘酸钾氧化3-间氯基苯基-5-(4′-甲基-2′-磺酸酸基苯偶氮)若丹宁的作用,由此建立了催化动力学荧光法测定痕量铜的新方法。该体系的激发和发射波长(λex和λem)分别为310 nm和404 nm。通过实验测定反应表观活化能为165.06 kJ/mol,反应速率常数为0.47/s,线性范围为0.45～12.0μg/L,检出限为1.5×10-7g/L。采用巯基葡聚糖凝胶分离富集,消除了共存离子的干扰,显著提高了方法的选择性和灵敏度。该方法应用于喷泉水、人工湖水和管网水中铜的测定,相对标准偏差小于4.5%,测定结果与原子吸收光谱法测得的结果相符。

葡甘聚糖对大鼠口服荧光素钠吸收的影响

目的 :研究葡甘聚糖对大鼠口服荧光素钠药动学的影响。方法 :利用荧光素钠作为示踪药物 ,HPLC反相柱色谱分离原药 ,荧光高效液相法定量分析血清荧光素钠含量。结果 :大鼠灌胃荧光素钠溶液T12 α为 (5 .0± 0 .9)min ,T12 β为 (43± 9)min ,Tmax为 (7.5± 0 )min ,Cmax为 (192± 7)mg·L- 1,AUC为 (83± 17) μg·h- 1·L- 1。以 0 .4 %或 0 .8%的葡甘聚糖为制剂时T12 α分别为 (2 0± 6 )min和 (38± 13)min ,T12 β为 (6± 3)h和 (2 5± 12 )h ,Tmax为(19± 9)min和 (40± 16 )min ,Cmax为 (92 .3± 2 .0 )mg·L- 1和 (5 2± 3)mg·L- 1,AUC为 (6 14± 10 5 ) μg·h- 1·L- 1和 (30 1± 2 2 ) μg·h- 1·L- 1。结论 :葡甘聚糖能明显改变口服药物的药动学参数 ,如降低血药峰值浓度 ,提高AUC。