基于碳量子点荧光恢复的三聚氰胺测定方法

在碳量子点溶液中加入汞离子,量子点的荧光被猝灭,加入三聚氰胺后荧光恢复。据此,建立了基于碳量子点荧光恢复测定三聚氰胺的新方法并应用于实际样品的分析。研究结果表明,在汞离子和碳量子点浓度之比为15∶10000且碳量子点浓度为4.0 g/L、pH值为7.5的实验条件下,方法的线性范围为3.0~60.0mg/L,检出限(3σ/k)为2.2 mg/L。方法应用于实际样品测定时,其回收率为95%~103%。

以四磺基铝酞菁-牛血清白蛋白为底物的荧光恢复均相法测定胃蛋白酶

酸性介质中,红区荧光探针四磺基铝酞菁(AlS4Pc)的荧光被白蛋白显著猝灭,加入胃蛋白酶后,体系荧光明显回复。基于此现象,建立了荧光恢复均相测定胃蛋白酶的新方法。考察了各种影响因素,在最佳实验条件(pH2.5、反应温度50℃、反应时间1h)下,本方法的线性范围为0.04～4mg/L,检出限为20μg/L。用本方法测定实际样品中胃蛋白酶,取得了满意的结果。

一种观察藻胆体移动的光漂白后荧光恢复技术

文章从样品制备、测定方法、数据分析方面就如何应用光漂白后的荧光恢复(FRAP)技术观测蓝藻藻胆体在类囊体膜上的移动进行介绍,得到的结果表明FRAP技术可以直接而有效地观测蓝藻藻胆体在类囊体膜上的移动情况。

Meso-四对甲氧基苯基卟啉荧光被Hg(Ⅱ)猝灭后荧光恢复的研究

通过meso-四对甲氧基卟啉荧光被Hg2+猝灭后荧光恢复这一现象证明了卟啉的自组装行为。meso-四对甲氧基苯基卟啉丙酮溶液荧光加入Hg2+后猝灭,少量水的引入使卟啉通过氢键发生自组装,这时荧光恢复。Hg2+加入后立即发生猝灭,但是恢复却是比较缓慢的,连续加入Hg2+,荧光呈周期性的猝灭和恢复。并且通过荧光光谱和紫外光谱论证了这一现象。

CdS-Eu(Ⅲ)体系荧光恢复的磷酸根离子可视化测定

以聚丙烯酸(PAA)为稳定剂,成功合成了水溶性的CdS量子点(QDs).CdS QDs表面的羧基能与Eu3+结合导致QDs聚集,有效引发QDs间能量的转移,致使CdS QDs荧光显著猝灭.当加入PO3-4时,由于PO3-4与Eu3+的结合能力强于CdS QDs表面的羧基,CdS QDs荧光强度又逐渐恢复.由此建立一种基于CdSEu(Ⅲ)体系荧光恢复可视化测定磷酸根离子的新方法.该方法灵敏、简单,检测限为0.078μmol·L-1.

胱氨酸基荧光碳点的制备及其黄体酮的荧光恢复响应

将胱氨酸(Cys)碱性溶液在恒温水热反应后,可制得荧光碳点(Carbon Dots, CDs),添加柠檬酸(CA)为碳源后,形成的氮硫掺杂碳点CA-Cys-CDs具有较高的荧光量子产率和较好的光稳定性。实验表明,该碳点对Pb^(2+)离子有特异性响应,碳点溶液的荧光信号可被Pb^(2+)猝灭。pH=5.72的B-R缓冲溶液条件下,在CA-Cys-CDs-Pb^(2+)体系中加入黄体酮,可使体系的荧光信号得以恢复。在9.90×10^(-7)-1.07×10^(-5)mol/L浓度范围内,体系的荧光强度恢复程度与黄体酮浓度呈现良好的线性关系,线性方程为I/I_(0)=5.83×10^(4)c+1.02,相关系数为0.9908,检出限为3.7×10^(-7)mol/L。将该方法用于黄体酮注射液中黄体酮含量的检测,所测结果为药品标示量的93.2%-112%。

在荧光漂白恢复测量中荧光恢复起始时间的研究

在荧光漂白恢复测量中,漂白过程结束的准确时间相对于漂白控制信号后沿会有一定的延迟时间,不易确定.光电倍增管快门开启又要推迟一段时间.因此,荧光恢复起始时间,即漂白结束的瞬间不能准确给出,开始阶段数据收集不全.本文分析了荧光恢复起始时间不准确所造成的误差,测量了起始时间.并尽量减少此误差,使恢复初期收集到的数据更完全,荧光恢复过程的时间座标更准确.

激光共聚焦显微镜荧光漂白后恢复实验的制样优化

利用激光共聚焦显微镜进行荧光漂白后恢复(FRAP)实验为研究分子的流动性提供了新的手段。然而,在拟南芥根毛细胞中进行荧光漂白后恢复实验时,由于拍摄时长的影响经常会导致样品脱离原来的焦平面,从而无法获得可靠的数据。以拟南芥根尖为材料,通过实验比较激光共聚焦显微镜下的常规制片、指甲油封片以及甘油制片,结果表明,利用指甲油封片能更好地解决样品离焦问题,可以获取有效的实验数据。

基于碳点荧光恢复法测定生物巯基化合物

碳点(CDots)是一种新型荧光纳米材料,Cu2+可以有效猝灭其荧光;而当有生物巯基化合物存在时,碳点-Cu2+体系的荧光可以恢复.基于此原理,我们成功地构建了检测生物体内总巯基化合物的新方法.该方法具有很好的选择性,常见氨基酸和金属离子对谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸(Cys)和高半胱氨酸(Hcy)的检测无影响.最佳实验条件下,谷胱甘肽、半胱氨酸、高半胱氨酸的浓度在6.0×10-6mol/L～1.0×10-4mol/L与相对荧光强度呈线性,R>0.996,检出限为2.0×10-6mol/L.该体系成功用于血清样品中总巯基化合物的检测.

钙黄绿素-Cu^(2+)体系荧光恢复测定水样中H_2S

建立了钙黄绿素-Cu^(2+)体系荧光恢复法测定水样中痕量H_2S的新方法。在p H8.0的Na_2HPO_4-Na H_2PO_4缓冲溶液中,以472 nm为激发波长,510 nm为发射波长,运用标准曲线法测定水样中的H_2S含量,并进行精密度、加标回收率及稳定性实验的评价。线性范围为3.2×10^(-6)~2.3×10^(-5)mol/L,相关系数r为0.9978,检出限为1.1×10^(-6)mol/L,RSD为1.7%,平均回收率为106.9%。

荧光光漂白恢复技术在检测膀胱平滑肌细胞间通讯功能中的应用

目的 探讨膀胱平滑肌细胞间通讯的功能变化。方法 利用荧光光漂白恢复 (FRAP)技术检测膀胱平滑肌细胞GJIC功能。结果 在相同的时间内 ,对实验组和对照组膀胱平滑肌细胞漂白后平均荧光恢复率相比较 ,实验组显著高于对照组 (P <0 0 5 )。

基于CdTe量子点荧光猝灭-恢复方法测定依诺沙星的研究

水相合成了巯基丙酸保护的CdTe量子点。根据在Cu^2＋存在的情况下,CdTe量子点荧光恢复程度与依诺沙星浓度成正比的现象,建立了基于CdTe量子点荧光猝灭-恢复测定依诺沙星的新方法。考察了溶液pH值以及Cu2＋浓度等对检测体系的影响。在pH=10的硼砂缓冲溶液中,在Cu^2＋浓度为2.3×10^-5mol/L的条件下,依诺沙星浓度在8.0×10^-7-3.0×10^-5mol/L范围内与量子点荧光恢复程度呈良好的线性关系,检出限为7.2×10^-8mol/L。该方法用于实际样品中依诺沙星的检测,回收率为95.5%-105.0%。

荧光漂白后恢复技术及其在活细胞分子机制研究中的应用

荧光漂白后恢复(FRAP)是一项利用荧光探针研究活体细胞中各类分子迁移特性的技术。简要介绍了FRAP技术的原理和具体实施要求,列出了动态比和扩散系数的计算公式,并例举了近几年FRAP技术在细胞分子机制研究中的应用。

基于CdTe量子点荧光猝灭-恢复方法测定磷酸根

水相合成了巯基乙酸保护的Cd Te量子点。根据Fe^3＋存在的情况下,Cd Te量子点荧光强度恢复程度与磷酸根浓度成正比的现象,建立了基于Cd Te量子点荧光淬灭-恢复测定磷酸根的方法。考察了溶液p H值以及Fe^3＋浓度对检测体系的影响。在p H=7.1,Fe^3＋为4.0μmol·L^-1条件下,磷酸根浓度在4.0×10^-6-1.0×10^-4mol·L^-1范围内,与量子点荧光恢复程度呈良好的线性关系,检出限为8.0×10-7mol·L^-1。本方法可用于实际样品中磷酸根的检测,回收率为95.4%-108.6%。

基于CdTe量子点的荧光猝灭-恢复法测定L-半胱氨酸

以巯基乙酸为稳定剂,合成了水溶性CdTe量子点(QDs),基于Ni^(2+)存在下,利用CdTe QDs荧光猝灭-恢复技术,建立了测定L-半胱氨酸的新方法。考察了缓冲溶液pH及Ni^(2+)浓度等对测定的影响。在pH=10.0的硼砂缓冲溶液中,Ni^(2+)浓度为40μmol/L条件下,L-半胱氨酸浓度在6.0×10^(-6)~5.0×10^(-5) mol/L范围内与量子点荧光恢复程度呈良好的线性关系,相关系数为0.9990,方法的检出限为2.1×10^(-6) mol/L。该方法应用于果汁和蜂蜜样品中L-半胱氨酸的检测,结果满意。

荧光漂白恢复、荧光共振能量转移和荧光相关光谱检测的技术特点

荧光漂白恢复(FRAP)、荧光共振能量转移(FRET)和荧光相关光谱(FCS)是三种以荧光为基础的检测技术,常用来研究分子间相互作用。对三种技术的特点做以比较和讨论。

基于荧光漂白恢复技术检测乳脂肪球膜上生物分子的流动性

为了推动乳制品的精准评价,采用高分辨率激光共聚焦显微镜(CLSM)结合多荧光探针技术观察乳脂肪球的微观结构,并利用荧光漂白恢复技术(fluorescence recovery after photobleaching, FRAP)定量检测母乳、牛乳、羊乳中乳脂肪球膜上生物分子的流动性。结果表明:3种乳的微观结构基本一致,均出现了新月区,证明了新月区是局部磷脂富集区;乳脂肪球中甘油三酯和水溶性蛋白质的动态分子比例较高,极性脂质和磷脂酰胆碱的动态分子比例较为接近,鞘磷脂的动态分子比例最差;牛乳中甘油三酯的流动性慢于母乳和羊乳,母乳中极性脂的流动性最慢。FRAP可以直观地表征乳脂肪球膜上生物分子的流动性,可为乳状液中膜界面的生化特性研究提供新的方法。

一种研究酵母朊病毒流动性的荧光漂白后恢复技术的改良

为建立一种经济简便的利用荧光漂白后恢复技术检测酵母朊病毒流动性的方法,在参照文献荧光漂白后恢复技术研究酵母朊病毒流动性的基础上,借助表达融合蛋白GFP-Sup35p的酵母朊病毒模型(NGMC),对文献法的样片制备过程进行改良。采用YPAD培养基和价格低廉的普通载玻分别替代文献使用的培养酵母的合成培养基和固定酵母的腔室载玻片。结果表明:改良法在保持文献法准确性的基础上,操作更为简单,极大地降低了实验成本。

荧光漂白恢复技术及其在生物膜系统研究中的应用

荧光漂白恢复(fluorescence recovery after photobleaching,FRAP)技术,是通过对细胞特定区域荧光分子的漂白及恢复,研究活细胞中各类分子运动及结合特性的技术。FRAP技术广泛应用于细胞膜组分的动态变化、蛋白质的寡聚化、蛋白质的循环、细胞骨架动力学、核膜结构以及细胞信号转导等研究领域,具有重要的应用价值。本文简要介绍了FRAP技术的原理及分类,并着重总结了其在生物膜系统研究中的应用。

基于CdTe量子点荧光猝灭-恢复法测定N-乙酰-L-半胱氨酸

以CdTe量子点作为荧光探针,Hg^(2+)为猝灭剂,建立了一种基于荧光猝灭-恢复模式的N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)检测方法.考察了不同缓冲溶液、pH值、金属离子、Hg^(2+)的浓度及反应时间对反应体系的影响,探讨了Hg^(2+)对CdTe量子点荧光猝灭和NAC对CdTe量子点荧光恢复的机理.结果表明:在pH=7.8的B-R缓冲溶液中,当Hg^(2+)的浓度为1.0×10^(-6)mol/L、NAC的浓度范围为5.0×10^(-7)~2.0×10^(-5)mol/L时,NAC的浓度与量子点的荧光恢复程度之间呈良好的线性关系,可实现对NAC的快速定量分析.该检测方法较常规的方法操作简便、检测速度快、灵敏度高.