利用荧光探针JC-1检测心肌细胞线粒体膜电位的改变

利用荧光探针JC 1观察大鼠心肌细胞凋亡早期线粒体膜电位的变化。用过氧化氢 (H2 O2 )诱导心肌细胞凋亡 ,在凋亡早期 ,利用新型荧光探针JC 1标记细胞线粒体 ,在FACSCalibur流式细胞仪上检测JC 1荧光强度的变化 ,用Annexin V/PI双染色法鉴别凋亡和坏死的心肌细胞。结果显示 ,在正常大鼠心肌细胞中 ,线粒体维持较高的膜电位 ,JC 1在线粒体内形成聚合物 ,发出红色荧光。H2 O2 导致线粒体膜电位下降 ,JC 1聚合物分解成单体 ,红色荧光强度减弱。提示JC 1结合流式细胞仪是一种理想的检测线粒体膜电位的手段。

激光共聚焦检测双酚A致精母细胞损伤后线粒体膜电位的变化

目的:运用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术检测双酚A(BPA)致精母细胞损伤后线粒体膜电位的变化,探讨其作用机制。方法:将培养的GC-2小鼠精母细胞分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别加入0、10μmol/L、100μmol/L的BPA,一同培养3 h后使用荧光探针JC-1对3个组样本分别进行标记,采用LSCM检测胞内线粒体内JC-1荧光强度的变化。利用LSCM专用软件分析荧光强度,通过荧光颜色的转变检测线粒体膜电位的变化,用红绿荧光的相对比例衡量线粒体去极化的比例。结果:对照组、低剂量组和高剂量组之间红绿荧光的比值有着显著差异。BPA低剂量组和高剂量组的胞内线粒体膜电位明显低于对照组,而高剂量组的胞内线粒体膜电位较低剂量组低。结论:BPA对精母细胞有损伤,且随着剂量加大,损伤越严重。LSCM技术方法灵敏度高,能够实时监测细胞内线粒体膜电位的变化。