用荧光显微镜技术观察药用野生稻(Oryza officinalis Wall)和转基因水稻的不亲和性

采用荧光显微镜技术观察转基因水稻花粉在药用野生稻柱头上的萌发及在花柱内的生长过程,以明确两者之间不亲和性发生的阶段,为判断其能否发生基因漂流提供依据。结果表明,两种转基因栽培稻(Y003和99t)的花粉在药用野生稻柱头上的萌发率均比药用野生稻自花授粉的低,花粉管在花柱中的生长速度较慢,且分别在到达花柱中部(Y003)或花柱基部(99t)时停止生长,顶端异常膨大,杂交子房逐渐萎缩,结实率为0。药用野生稻与栽培稻杂交不亲和的原因是花粉管在花柱中停止生长、不能进入胚囊完成受精,在自然条件下转基因栽培稻中的外源基因向药用野生稻漂流的可能性较小。

荧光显微镜技术在储层评价中应用

石油主要组分中的油质沥青、胶质沥青和沥青质沥青均发荧光。油质沥青发黄、白、绿、蓝等色荧光，为石油组分中的烃美化合物，包括饱和烃、环烷烃、芳烃等。胶质沥青以橙色荧光为主，为含氧、氮、硫的烃类，是石油中较固定的组分；沥青质沥青发褐色荧光，为不溶于石油醚的胶质沥青、非烃及沥青质，其发光亮度与沥青含量成正比。

荧光显微镜技术在家蚕变态期细胞凋亡研究中的应用

家蚕在变态发育过程中组织器官发生着激烈的新旧替换,旧组织在消溶过程中存在着细胞凋亡。通过剖取家蚕变态发育期的各种组织(中肠等)的组织块,利用DAPI、Hoechst33342、AO等荧光素直接对活体组织进行荧光显色显微观察,实验证明,利用荧光显微技术可以简单方便地观察到家蚕变态发育过程中组织细胞的形态变化,是研究家蚕变态发育中细胞凋亡的理想方法。

桔梗花粉管萌发的荧光显微观察

目的:确定桔梗的自交亲和性及花粉粒在柱头上的萌发部位。方法:采用荧光显微镜技术,观察自花授粉、自株花授粉、异花授粉下花粉粒的萌发生长,以及柱头内外授粉花粉粒的萌发情况。结果:桔梗自花、自株花、异株花授粉花粉均能在柱头上大量萌发、花粉管顺利生长并在24 h内伸入子房;柱头外授粉花粉粒不萌发,但在开裂后的柱头内授粉能大量萌发。结论:桔梗自交高度亲和,花粉粒萌发部位为开裂后的柱头内。

‘闽48’和‘闽43’油茶自交与异交花粉管的荧光显微观察

以‘闽48’、‘闽43’为材料,结合人工控制授粉和花粉管荧光显微观察,对比授粉后自交和异交花粉管生长的差异。结果显示,自交和异交花粉均能在柱头上萌发,但自交和异交花粉管在各时间段生长速度存在差异。异交花粉管生长总体呈快—慢—快趋势,分别在授粉后6-7 h及24-30 h出现峰值,生长速率最高达67μm·h-1,并于授粉后76 h穿过花柱基部;自交花粉管在花柱中则呈现波动生长:授粉后6 h出现停滞期,9 h恢复生长,24 h生长速率急剧上升,30-48 h达到最高,为32.22μm·h-1,最终于授粉后127 h停止生长,此时花粉管出现大量胼胝质堵塞,无法穿过基部。

STORM和STED显微成像技术特点的比较

随机光学重建显微镜(stochastic optical reconstruction microscopy,STORM)技术和受激发射损耗(stimulated emission depletion,STED)显微镜技术是近年来发展迅速的两种超分辨率荧光显微镜技术。这两种技术均提供超越传统荧光显微镜分辨率成像的功能,具有多色显像,三维成像以及活细胞内成像的潜力。在这篇综述中,我们关注两种技术荧光控制、激光强度等技术参数设定,同时结合样品制备、图像采集与处理等流程优化对比两者在分辨率、图像采集时间及具体应用中的优劣。STORM可获得更高的三维分辨率,但可能需要更长的图像采集时间。STED需要较高损耗光强度,却能在图像采集后立即生成超分辨率图像,不需要额外图像数据处理。最终,选择STORM和STED不仅取决于技术的具体应用,还取决于操作者优化各环节技术参数的能力,从而决定图像质量。

膜片钳技术(三)细胞分泌活动的实时监测技术

分泌活动是神经元和内分泌细胞进行化学通信的基本模式。各种研究细胞分泌活动的生物物理技术的发展极大地加深了人们对细胞分泌机制的了解。

海水微生物对Zn-Al-Cd牺牲阳极腐蚀性能的影响

通过电化学阻抗(EIS)、扫描电镜(SEM)和荧光显微镜技术等方法对Zn-Al-Cd牺牲阳极在灭菌和天然海水中的腐蚀行为进行了对比研究。结果表明:在实验前期,试样在天然海水中的腐蚀电位高于灭菌海水中的腐蚀电位,在实验后期,结果相反。EIS测试结果表明,灭菌海水中试样的Rct值要比天然海水中试样小很多,原因是在天然海水中,试样表面附着的细菌通过代谢活动形成一层生物膜,在一定程度减缓了试样的腐蚀速率。SEM结果表明,灭菌海水中的试样表面发生了局部腐蚀,而在天然海水中试样的腐蚀较均匀。荧光显微镜结果表明:细菌先是在试样上以单体形式附着,然后形成局部的团聚,进而形成生物膜,随着营养物质的耗尽,生物膜最后从试样表面脱落。

芝麻花粉附着、萌发与花粉管伸长过程研究

以中芝14号为试验材料,采用荧光显微镜和石蜡切片法研究芝麻花粉在柱头上附着、萌发、伸长及在花柱内生长全过程。于授粉后不同时间段连续取样固定,并进行显微观察和数据统计。结果表明,在芝麻柱头上,授粉后5min基本无花粉萌发,10min有极少量花粉萌发,30min大量花粉开始萌发,并长出花粉管。花粉管具明显的绿色荧光,进入羽毛状柱头后继续生长于花柱基部至子房顶部的引导组织内。授粉后2h,生长最快的花粉管已经到达花柱基部,花粉管的平均生长速度约为3.0mm/h。授粉后4h,大量花粉管进入子房。即使在授粉后24h,仍有部分花粉在萌发和生长中。

急性坏死性胰腺炎微循环障碍治疗的研究进展

微循环障碍是急性坏死性胰腺炎发生、发展的重要机制之一。当前研究微循环障碍的最常用的实验方法是活体内荧光显微镜技术。改善微循环治疗的研究多处于实验阶段 ,包括 :血管活性物质拮抗剂 ,如内皮素受体阻滞剂 (ET RA)、血小板活化因子受体阻滞剂 (PAF RA)、缓激肽B2受体阻滞剂、血栓素A2(TXA2 )受体阻滞剂等 ;细胞因子抗体 ,如细胞间粘附分子抗体、肿瘤坏死因子 (TNF)单克隆抗体 ;扩容及补液疗法 ,如右旋糖酐 (Dextran)、晶体及胶体补液等 ;生长抑素和甲磺酸加贝脂 ;高压氧疗。上述治疗均可在一定程度及某些方面改善胰腺微循环 ,但改善胰腺微循环并不能提高胰腺局部抗生素浓度。

胎儿母体输血综合征研究进展

胎儿母体输血综合征是发生于妊娠期的一种并发症,其病因不甚清楚,初期胎儿可代偿而无明显表现,失代偿会出现胎动减少或消失、胎心监护出现正弦曲线、水肿胎等表现,该病通过 Kleihauer-Betke 试验可以诊断,而流式细胞仪、母血甲胎蛋白测定、荧光显微镜技术等是近年来用于确诊及定量的技术。确诊病例可行宫内输血治疗。患儿未来中枢神经系统发育情况以及神经精神并发症的发生尚需进一步探讨。

海南普通野生稻的花粉育性观察及杂交亲和性

对海南3个不同居群的普通野生稻(O.rufipogon Griff.)的花粉育性进行了观察研究,并采用荧光显微镜技术观察了转基因水稻花粉在不同居群的普通野生稻柱头上的萌发和在花柱内的生长过程。结果表明,以转基因水稻为对照,3个不同居群的野生稻相互之间花粉可育率在1%水平上差异极显著。用荧光显微镜观察时发现,转基因水稻花粉能在3个居群的普通野生稻的柱头上萌发并能到达胚珠,二者杂交亲和,同时发现,花粉管进入三亚居群胚珠的数目比儋州、万宁居群的数目多,说明相对于儋州、万宁居群来说,三亚居群与转基因水稻的杂交亲和性更高。

大白菜自交不亲和基因的利用(英文)

蕾期自花授粉试验结果表明大白菜(BrassicacampestrisL ssp Pekinesis(Lour)Olsson)品系40 9所结种子最多,达0 165g/株。利用种子结实分析方法和荧光显微镜技术对9个大白菜品系进行自交不亲和性测定,试验采取完全随机设计。用种子结实分析方法测定时,2个品系:27 3 7和40 9表现为自交不亲和系。用荧光显微镜技术测定时,品系23 3 4,27,27 3 7,40 9和142发现为弱性自交不亲和。用4个具有自交不亲和性的自交系进行正反交生产种子(由蜜蜂授粉),结果表明,40 9做母本结籽最多,这是因为母体效应。组合40 9×142 5,40 9×27 3 7和40 9×23 3 4结籽较多,分别为30 16,24 63和16 96kg/hm2。1998年在泰国清迈大学对11个大白菜杂一代品种和3个商用品种进行比较试验,一代组合142 5×40 9结球产量最高,达38563kg/hm2,高于商用品种的36 3%。其他组合:如23×27,23×142,27 3 7×23 3 4,27 3 7×142 5和40 9×23 3 4也表现较好的园艺性状,产量分别为29038,34694,22906,32188和23656kg/hm2。但由于结球形状稍圆,市场销售尚不理想。

萝卜自交不亲和基因的利用(英文)

利用荧光显微镜技术和种子结实分析方法对7个中国型萝卜(RaphanussativusL.var.longipinnatusBailey)自交系进行研究其自交不亲和水平。试验结果表明多数自交系为自交不亲和。采取完全杂交组合方法进行筛选。从品种比较和结实情况看,杂一代27 1 3×18 1,27 1 3×18 2,27 1 3×18 3和27 1 3×18 6以及部分77 2×18 11和77 4×18 7有较好的园艺性状,如整齐度、叶色深绿无毛、肉质根呈圆筒状、根皮光滑、根质紧实、根重360～400g,这些性状符合市场要求。前期试验结果表明,这些杂一代的根产量都明显高于普通品种,但还有待在农户的地里做进一步的试验。

国外沥青混凝土路面新型研究方法分析

介绍国外沥青混凝土路面新型研究方法,并着重介绍了运用这些研究方法取得的最新研究成果。这些研究方法和成果,可为国内沥青混凝土路面科研、设计和施工提供借鉴。

核黄素体外辐射增敏机理研究

采用MTT方法和荧光显微镜技术,以小鼠胸腺细胞和人肝L02细胞株为研究对象,对核黄素的体外辐射增敏作用进行研究.在5Gy60Coγ射线辐照条件下,低浓度（5～50μmo/L）和高浓度（100～400μmol/L）核黄素作用下的小鼠胸腺细胞存活率的时间依赖关系表现出明显的差异,其规律为:低浓度下,细胞受γ射线辐照后并不立刻大量死亡,但随着时间的推移存活率迅速下降,4h后存活水平降低到较低的水平;而高浓度下,细胞立刻大量的死亡,且随时间的变化,细胞存活仅有微弱的下降.荧光显微镜研究结果显示,核黄素在细胞中的分布因高浓度和低浓度而有所不同,低浓度时核黄素集中于细胞核区,高浓度时细胞膜区也有较高的分布.由此得到结论:低浓度时（<50μmol/L）,核黄素作用的位点在细胞核,对DNA辐射损伤增敏;高浓度时（>100μmol/L）,核黄素辐射增敏的主要靶位点为细胞膜,两者均显示出核黄素对细胞辐射损伤具有显著的增敏效应.

EB病毒潜伏膜蛋白1介导c-Jun/Jun B异源二聚体对cyclin D1的调节

研究发现LMP1可介导c-Jun/JunB活性异源二聚体的形成,在此基础上,利用建立的Tet-on系统调控LMP1表达的细胞系,采用间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显徽镜技术、Westernblot方法、荧光素酶活性检测、Super-EMSA方法和流式细胞术,探讨LMP1介导c-Jun/JunB异源二聚体对cyclinD1的调节功能.结果表明,LMP1介导的c-Jun/JunB异源二聚体可上调cyclinD1启动子活性及其表达,并影响细胞周期的行进.