全自动酶标免疫分析仪的技术原理与故障案例分析

分析全自动酶标免疫分析仪的技术原理及典型故障案例,以提升全自动酶标免疫分析仪的使用效果。通过微粒子酶免疫分析(MEIA)技术完成酶免试验,以主定标、标准定标、定性定标及定标液修正为全自动酶标免疫分析仪的定标方式,提升酶免试验分析精度。通过分析全自动酶标免疫分析仪使用中遇到的洗板机、开机初始化报警、启动软盘、加样臂和滤光器等典型故障案例,提出故障解决应对措施,为全自动酶标免疫分析仪后期维修与管理提供参考。

染色体核型分析、染色体拷贝数变异测序、荧光定量聚合酶链技术在产前诊断联合应用的价值

目的探讨染色体核型分析、染色体拷贝数变异测序(CNV-seq)、荧光定量聚合酶链技术(QF-PCR)在产前诊断中联合应用的价值。方法选取2022年1月至10月在茂名市人民医院产前诊断中心就诊的具有产前诊断指征的417例孕妇进行穿刺,同时做染色体核型分析、CNV-seq及QF-PCR,比较三种检测方法各自及联合检测的异常检出率及其他特殊情况。结果三种技术共检出63例异常,异常检出率为15.11%。染色体核型分析共检出29例异常核型,染色体核型异常检出率为6.95%。有17例数目异常,其中有7例47,XN,+21、4例47,XN,+18、2例47,XXY、1例45,X、3例嵌合;另有12例结构异常。CNV-seq共检出57例异常,染色体异常检出率为13.67%,其中常见非整倍体17例、大片段CNV(≥10 M)有2例、微小CNV(<10 M)有38例。明确致病性CNVs 17例,可能致病性CNVs或临床意义不明CNVs 23例。有5例异常核型CNV-seq检测为正常。QF-PCR技术共检出17例数目异常,异常检出率为4.08%。染色体核型分析、CNV-seq及QF-PCR三种技术的异常检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CNV-seq检测的异常检出率高于核型和QF-PCR检测,差异有统计学意义(P<0.017);核型检测和QF-PCR检测的异常检出率比较,差异无统计学意义(P>0.017)。结论染色体核型分析有利于发现更多的染色体结构异常,CNV-seq有利于发现更多的微小缺失或重复,染色体核型分析和CNV-seq及QF-PCR在产前诊断中实现优势互补,为临床咨询提供准确的实验室依据,加强优生指导。

884例性染色体异常胎儿产前诊断结果分析

目的 对884例无创产前筛查(NIPS)提示性染色体异常的羊水样本进行核型分析、荧光原位杂交技术(FISH)和拷贝数变异测序(CNV-seq)检测,探讨不同方法在产前诊断中的价值。方法 选取2015年1月—2022年12月天津市中心妇产科医院孕早期NIPS提示胎儿为性染色体异常的孕妇884例,于孕中期采集羊水样本,进行羊水细胞核型分析和FISH检测,对结果不一致或培养失败的样本进一步行CNV-seq检测。结果 884例孕妇中,有341例(38.6%)检出异常核型,11例(1.2%)羊水细胞培养失败。NIPS性染色体阳性预测值为39.2%(341/873)。341例核型分析异常样本中,最常见的核型异常类型是47,XXY(108例),其次为47,XXX(80例)、47,XYY(68例)、45,X(18例),共检出51例嵌合体。884例孕妇中,有862例FISH检测结果与核型分析或CNV-seq结果一致,FISH的阳性预测值为97.5%;24例与核型分析结果不一致,进一步行CNV-seq检测,有22例CNV-seq结果与核型分析结果一致,并能相互补充分析;2例不一致样本中,1例核型分析结果为46,~+mar,FISH和CNV-seq结果均为45,X;1例核型分析结果为嵌合Y染色体异染色质区缺失,FISH和CNV-seq结果均为嵌合体,结构未见异常。结论 NIPS提示性染色体异常时,建议首选FISH和核型分析联合检测,可快速、准确地诊断染色体异常。对于疑似染色体特殊结构异常,建议进行FISH、核型分析和CNV-seq联合检测,可明确遗传学病因。

荧光原位杂交技术检测不育男性精子染色体非整倍体

目的 :检测不育男性与正常男性的精子染色体非整倍体之间的差异 ,为宫腔内人工授精提供指导。方法 :1 2例不育患者 ,其中 1 0例为少、弱、畸精症患者 ( A组 ) ,2例精子数接近正常 ( B组 ) ,2例正常健康的献精者作为对照 ( C组 ) ,选用 X、Y和 1 8号染色体探针进行荧光原位杂交 ( FISH)检测精子的非整倍体。结果 :B组精子 X、Y、和 1 8号染色体的二体频率分别为 0 .3 0 %、0 .3 0 % ,与 C组 ( 0 .1 5%、0 % )相比差别无显著性 ;A组的X、Y和 1 8号染色体二体率分别为 1 .1 3 %、0 .96 % ,缺体率为 1 .1 3 %和 1 .6 % ,与其他两组相比 ,差别有显著性 ( P<0 .0 5)。估算 A组总的非整倍体率为 42 .44 % ,与 B组 6 .0 5%及 C组的 2 .59%比较 ,差别有显著性 ( P<0 .0 5)。结论 :不育男性精子的染色体非整倍体显著高于正常 ,对少、弱、畸精症患者的精液标本可进行洗涤优化处理后行宫腔内人工授精 ,达到助孕。

染色体核型分析和荧光原位杂交技术用于产前诊断的价值研究

目的:探究染色体核型分析和荧光原位杂交技术用于产前诊断的价值。方法:选取行羊水穿刺检查的531例产妇的羊水样本作为研究资料,随机分为对照组(260例)和观察组(271例)。对照组羊水样本行染色体核型分析,观察组行荧光原位杂交分析,统计两组受试者染色体核型分析和荧光原位杂交分析结果,对比两组诊断成功率、异常核型检出率及两组检测效率。结果:观察组羊水样本诊断成功率高达100.00%,但与对照组(99.62%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。染色体核型分析方面,对照组羊水样本异常染色体核型检出率(8.86%)显著高于观察组(2.95%),组间差异有统计学意义(P<0.05)。观察组获取样本至出具报告用时(2.11±1.03)d,显著少于对照组(18.12±4.26)d,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:染色体核型分析和荧光原位杂交技术用于产前诊断的优势各有千秋,临床可根据孕妇的具体情况选择不同的诊断方法,或两者结合使用。

荧光原位杂交技术对骨髓增生异常综合征患者染色体异常的检测分析

目的:分析荧光原位杂交(FISH)技术对骨髓增生异常综合征(MDS)5、7、8、20号染色体异常检出率,并与常规细胞遗传学分析(CCA)进行比较。方法:收集48例MDS患者骨髓标本,CCA采用骨髓短期培养法及G带核型分析。FISH采用间期FISH,选取针对5、7、8、20号染色体的不同探针组合。χ2检验比较两种方法检出率。结果:CCA对5、7、8、20号染色体异常检出率分别为8.33%、12.50%、6.25%、12.51%,总的异常检出率为39.58%;FISH对5、7、8、20号染色体异常检出率分别为12.50%、16.67%、10.42%、16.67%,总的异常检出率为56.25%。两法检出率差异无统计学意义(P>0.05),但FISH检测时间(2～3天)明显短于CCA(10～14天)。结论:FISH检测MDS患者5、7、8、20号染色体异常是CCA的重要补充,并明显缩短检测时间。

图像处理技术在染色体自动分析中的应用

染色体自动分析是细胞遗传学研究工作中急需解决的问题,要实现染色体的自动分析,主要是依据染色体的着丝点位置、周长、面积和带型等特征.着重介绍怎样利用图像处理技术来提取染色体的这些特征,并利用这些特征实现染色体的自动分类,最后得到核型图.

染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测无精子或少精子症的临床应用研究

目的对男性无精子或少精子症患者进行染色体遗传学病因诊断与分析,探讨染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测对无精子或少精子症的临床应用价值。方法收集四川泸州地区240例男性无精子或少精子症患者的临床资料及外周血样本。外周血淋巴细胞按常规染色体培养G显带行核型分析,Y染色体微缺失检测采用多重PCR技术。结果240例男性无精子或少精子症患者中无精子症患者179例、严重少精子症患者61例。单一染色体核型分析异常检出率为22.92%(55/240),包括单纯染色体数目异常30例、单纯染色体结构异常21例和合并异常4例。单一Y染色体微缺失异常检出率为10.42%(25/240),其中AZFc缺失异常率最高为7.08%。采用核型分析与Y染色体微缺失联合检测的异常检出率为30.83%(74/240),其中6例患者两项结果均异常,两种方法联合应用时较单一方法的检出率高(χ^(2)=30.24,P<0.001)。结论系统地报道了泸州地区男性无精子或少精子症患者的染色体核型及Y染色体微缺失的发生率及类型,同时提出两种方法联合应用可提高异常检出率,对男性不育症患者的病因诊断、遗传咨询及生殖治疗提供了重要指导作用。

荧光原位杂交技术在检测人精子染色体异常中的应用进展

荧光原位杂交技术(FISH)以其快速、简便、高灵敏度及高特异性的优点,可一次检测成千上万精子染色体而被广泛应用,并逐渐成为检测精子染色体的首选方法。本文总结近10年来国内外相关文献,将FISH技术在检测正常人、不育者、染色体平衡易位者、有毒物接触者及肿瘤患者化疗后精子染色体异常方面的应用加以综述。

染色体核型分析联合荧光原位杂交技术对儿童急性髓系白血病M2的诊疗意义

目的探讨染色体核型分析联合荧光原位杂交(FISH)检测在儿童急性髓系白血病M2中的诊疗意义。方法选择25例AML-M2儿童骨髓标本应用染色体G显带进行核型分析,并同时应用荧光原位杂交技术(FISH)检测AML1/ETO融合基因。结果在25例AML-M2儿童中,核型分析检出t(8;21)染色体易位17例(68%),包括除典型t(8;21)及其它染色体异常,如复杂易位、缺失、额外染色体等,核型正常5例(20%),其中4例为复诊儿童,3例(12%)标本因细胞生长不良,制片质量差,无法分析;25例AML-M2儿童同时做FISH,检出阳性20例(80%),包括17例t(8;21)及3例无分裂相的标本,4例复诊儿童均为阴性,检出信号异常1例(4%),但无阳性改变。结论急性髓系白血病M2患儿特异性t(8;21)/AML1-ETO融合基因阳性改变较易检出,FISH技术检测患儿易位的敏感性较高于染色体核型分析。FISH检测不仅可以提示融合基因是否阳性,也可提示特定基因是否异常。染色体核型分析可同时提示相关染色体是否易位及其余染色体有无畸变。因此,两种分析方法联合应用可多方面提示AML-M2儿童的疾病信息,在AML-M2的诊治及预后中具有重要的应用价值。

染色体自动分析系统的关键技术

综述了染色体自动分析系统中图像分析的关键技术,着重对边界跟踪、中轴提取、着丝点确定等几个关键步骤进行了详细的描述。实验表明,这一系列处理方法对染色体特征的自动提取是十分有效的。

荧光原位杂交技术及染色体核型分析在产前诊断中的应用价值

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)及染色体核型分析在产前诊断中的临床应用价值。方法抽取90例妇产科就诊孕妇的羊水进行体外培养并进行染色体核型分析,其中对45例羊水样本应用荧光原位杂交技术,直接对间期核细胞进行13、18、X、Y等染色体数目进行检测。结果 90例羊水样本有88例样本完成染色体核型分析,诊断成功的几率为97.78%,其中2例患者出现异常染色体核型的情况,占2.22%,报告的时间平均为(23.49±5.11)d。在应用荧光原位杂交技术的45例样本中,诊断成功的几率为100.00%,其中有8例患者出现异常染色体核型的情况,占8.89%,其中,结构异常5例,数目异常3例。另外,在染色体数目的诊断上,荧光原位杂交技术与染色体核型分析的诊断结果一致,平均报告的时间为(2.78±4.13)d。结论荧光原位杂交技术应用于产前诊断中具有成功率、准确性高的特点,能够有效缩短报告的时间,但是对于某些情况特殊的患者来说,单纯地使用荧光原位杂交技术则有可能造成漏诊的现象发生,因此荧光原位杂交技术并不能完全取代染色体核型分析技术,在必要时需要同时使用两种技术。

应用荧光原位杂交分析行ICSI的无精子症患者睾丸和附睾精子的染色体异常

文献报道不育男性精液中精于染色体发生数目异常的几率较正常人增大。然而，却没有有关睾丸和附睾精子细胞遗传学方面的研究报告，并且有关这方面的研究结果仍存在争议。本文作者采用荧光原位杂交技术分析了27个标本，9个来自梗阻性无精症患者(13个标本均采自睾丸；2个采自附睾)．13个来自非梗阻性无精症患者(13个标本均采自睾丸)．

全自动荧光酶免疫分析仪检测沙眼衣原体临床应用评价

目的评价法国生物梅里埃公司全自动荧光免疫分析仪系统(VIDAS),检测衣原体(CHL)的敏感性和特异性,为临床提供选择方法的依据。方法应用VIDAS检测CHL与临床确诊比较,不符合者使用直接荧光抗体技术验证。结果463份泌尿科或妇科患者的尿道及宫颈拭子标本中,临床确诊病例83例(17.9%),以扩大金标准计算,敏感率为92.2%,特异性为100%;VIDAS检测出93例阳性,敏感率为100%,特异性为96.8%。结论VIDAS检测CHL具有良好的敏感率和特异性,具有操作简便、报告时间短的优点,适宜常规实验室使用。

荧光原位杂交技术在产前诊断染色体嵌合体中的应用价值

目的:探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在产前诊断染色体嵌合体中的应用。方法:22例行绒毛/羊水细胞体外培养染色体核型结果提示可能存在染色体嵌合现象的病例,进一步用染色体微阵列比较基因组杂交检测(chromosomal microarray analaysis,CMA)和FISH技术分析确定其异常核型及嵌合比例。结果:22例核型结果提示嵌合体的病例中,性染色体数目嵌合13例,常染色体三体嵌合6例,性染色体结构异常嵌合3例。近50%病例CMA结果未检测到嵌合现象,可能与CMA技术仅能检测基因拷贝数变化且无法检测低比例嵌合有关。因常染色体数目异常对胎儿生长发育影响较大,常染色体数目异常嵌合病例中,除1例病例外其余均选择终止妊娠。3例结构异常嵌合病例经核型分析结合CMA及FISH结果确定均为性染色体双着丝粒染色体复杂结构嵌合。结论:对于产前诊断提示可能存在染色体嵌合的病例,不应急于终止妊娠,需采用多种方法加以验证,应充分应用CMA技术和FISH技术结合G显带核型结果进行综合分析,并需要对胎儿形态进行细致的超声评估,从而更加准确地确定嵌合类型以及异常核型的嵌合比例,为临床医师指导遗传咨询提供更加可靠的依据。

荧光原位杂交技术在染色体异常来源成分检测中的应用分析

目的:探究荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)在染色体异常来源成分检测中的应用价值。方法:选取2017年6月至2019年12月于我院进行产前检查的孕妇561例作为研究对象,所有孕妇均行FISH与染色体核型分析检查,分析临床检查结果,另分析染色体核型分析及FISH检查在异常染色体中的检出情况。结果:561例孕妇均行染色体核型分析及FISH检查,母血清生化筛查高风险共232例(41.35%),超声检查胎儿异常32例(5.70%),孕妇年龄≥35岁共248例(44.21%);母血清生化筛查高风险与孕妇年龄≥35岁是行羊水穿刺的主要原因。561例孕妇经染色体核型分析共检出异常染色体132例,异常率为23.53%(132/561);FISH共检出异常染色体121例,异常率为21.57%(121/561)。结论:FISH在染色体异常来源成分检测中具有较高的临床应用价值,可为临床诊断提供可靠依据,值得推广。

精子微生物动静态分析技术的新进展

本文简单介绍了荧光染色精子新技术在CASA系统中的地位、意义和它的特点 ,以及它在操作功能上的独到之处。

染色体结构异常携带者精子非平衡染色体分析

随着生殖医学和荧光原位杂交技术的发展,染色体异常越来越受到重视。染色体异常导致少弱精或者无精,以及遗传物质异常的精子数量增多,从而降低男性携带者的生育力,影响辅助生育治疗的结局。不同类型的染色体异常生殖细胞进行减数分裂时，形成正常配子的比例不同。