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微卫星荧光标记基因组扫描 被引量:4
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作者 邓昊 何云贵 夏家辉 《生命科学研究》 CAS CSCD 2000年第S1期18-23,30,共7页
微卫星荧光标记基因组扫描为 2 0世纪 90年代发展起来的一项分子生物学技术 ,在基因定位、个体识别等方面有广泛的应用 .文中对其原理、策略、分析方法及应用作了论述 ,并探讨了它的发展前景 .
关键词 微卫星 荧光标记基因组扫描 基因定位 分析方法
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生防菌枯草芽孢杆菌CQBS03的绿色荧光蛋白基因标记及其在柑橘叶片上的定殖 被引量:42
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作者 殷幼平 袁训娥 +1 位作者 李强 王中康 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期3555-3563,共9页
【目的】利用绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因标记枯草芽孢杆菌生防菌株CQBS03,以研究其在柑橘叶片上的定殖规律。【方法】采用重叠PCR方法将p43启动子和gfp进行融合,并与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pHY300PLK连接... 【目的】利用绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因标记枯草芽孢杆菌生防菌株CQBS03,以研究其在柑橘叶片上的定殖规律。【方法】采用重叠PCR方法将p43启动子和gfp进行融合,并与大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pHY300PLK连接构建重组质粒pHY43G,以重组质粒电脉冲转化生防菌株CQBS03,培养后于荧光显微镜下观察并通过SDS-PAGE分析工程菌株GFP的表达情况,然后进行工程菌株对柑橘溃疡病菌的抑菌试验、生长动力学分析、稳定性测试。采用叶片喷雾方法接种,平皿稀释分离培养方法测定CQBS03-pHY43G在柑橘叶片上的定殖情况。【结果】重组菌CQBS03-pHY43G高效表达GFP,电泳后出现约29kDa的特异蛋白条带,外源质粒对宿主菌的生长未带来明显不利影响,质粒稳定性实验表明重组质粒pHY43G经30次传代后的稳定性为55%,室内平板抑菌实验结果显示CQBS03-pHY43G对柑橘溃疡病菌生防效果与出发菌株没有明显差异(P<0.01),CQBS03-pHY43G菌株在叶片喷雾接种后的0—15d,在柑橘叶片上的数量呈现急剧下降趋势,15d后下降速度稍缓,最后保持相对稳定的较低水平(1.73×103cfu·g-1)。【结论】成功地将gfp转入野生型枯草芽孢杆菌生防菌CQBS03中,构建了荧光标记菌株,初步明确了生防菌的定殖规律。 展开更多
关键词 p43启动子 绿色荧光蛋白基因标记 定殖 枯草芽胞杆菌 柑橘溃疡病菌
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浅析昆虫转基因技术中的几类标记基因
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作者 何瑜娜 陈代俐 +1 位作者 童虹宇 丁奕然 《安徽农业科学》 CAS 2014年第4期992-993,共2页
自1982年科学家成功转化出首例转基因果蝇以来,昆虫转基因技术因其潜在的广泛应用前景而成为研究热点。昆虫转基因技术得以实现离不开标记基因的应用,标记基因在筛选转基因昆虫个体上起到关键作用。经过科学家不断探索,转化标记不断改... 自1982年科学家成功转化出首例转基因果蝇以来,昆虫转基因技术因其潜在的广泛应用前景而成为研究热点。昆虫转基因技术得以实现离不开标记基因的应用,标记基因在筛选转基因昆虫个体上起到关键作用。经过科学家不断探索,转化标记不断改进。文中浅析了昆虫转基因技术中常用的转化标记,并对其最新研究进展进行综述,为昆虫转基因技术的进一步利用提供了依据。 展开更多
关键词 昆虫转基因技术 眼色标记基因 抗药性标记基因 荧光标记基因 可见显性标记
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梨火疫病菌在库尔勒香梨枝条中的侵染定殖和扩展特征研究 被引量:2
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作者 吕天宇 徐琳赟 +2 位作者 席海珅 韩剑 罗明 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1692-1702,共11页
【目的】示踪梨火疫病菌Erwinia amylovora在库尔勒香梨(Pyrus sinkiangensis Yu)(简称香梨)枝条组织中侵染定殖和扩展特征,为梨火疫病的有效防治提供依据。【方法】以分离获得梨火疫病强致病力菌株E.a001为材料,采用热激法将携带有绿... 【目的】示踪梨火疫病菌Erwinia amylovora在库尔勒香梨(Pyrus sinkiangensis Yu)(简称香梨)枝条组织中侵染定殖和扩展特征,为梨火疫病的有效防治提供依据。【方法】以分离获得梨火疫病强致病力菌株E.a001为材料,采用热激法将携带有绿色荧光蛋白基因(green fluorescent protein,GFP)质粒phc60-gfp转化E.a001,获得了能发出强烈绿色荧光的标记菌株E.a001-gfp。利用该标记菌株接种香梨枝条,检测、观察其在香梨枝条组织中的侵染定殖和扩展动态。【结果】针刺接种和喷雾接种E.a001-gfp引起枝条发病的最低浓度分别为106cfu·mL^(-1)和107cfu·mL^(-1)。相同浓度的病原菌接种,喷雾接种较针刺接种后发病显症时间延迟2~3 d。梨火疫病菌侵染枝条产生的坏死病斑的扩展速率随病原菌浓度提高而升高;病菌在1年生枝条上的生长扩展速度显著快于在2年生枝条内的扩展速度。梨火疫病菌入侵后主要存在于枝条维管系统中,大量分布于皮层薄壁细胞和韧皮部薄壁细胞间隙,少量存在于木质部导管中。在香梨发病枝条上,病健交界处的活菌数量最高,可达到108cfu·g^(-1),未显症部位0~10 cm处病原菌为105cfu·g^(-1),但在香梨枝条病斑外未显症部位10~15 cm处均未分离出病原菌。【结论】研究明确了梨火疫病菌在香梨枝条组织中的扩展距离、迁移时间及速率,以及分布及定殖量,为病枝的准确修剪和制定病害的综合防控措施提供了科学依据。 展开更多
关键词 库尔勒香梨 梨火疫病菌 绿色荧光蛋白基因标记 侵染 扩展
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山羊草及普通小麦遗传多样性的研究 被引量:10
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作者 张海泉 张宝石 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期165-169,共5页
使用微卫星荧光标记—全自动基因分析仪(3700DNAAnalyzer)熏用43对D染色体组引物标记76份普通小麦、粗山羊草、拟斯卑尔脱山羊草和尾状山羊草品种和材料熏将其结果进行聚类分析熏共聚成四类:普通小麦被聚成一类熏粗山羊草被聚成两类熏... 使用微卫星荧光标记—全自动基因分析仪(3700DNAAnalyzer)熏用43对D染色体组引物标记76份普通小麦、粗山羊草、拟斯卑尔脱山羊草和尾状山羊草品种和材料熏将其结果进行聚类分析熏共聚成四类:普通小麦被聚成一类熏粗山羊草被聚成两类熏拟斯卑尔脱山羊草、尾状山羊草和部分来自巴基斯坦的粗山羊草聚成一类。聚类结果与现有的植物学分类的结果相一致。 展开更多
关键词 山羊草 普通小麦 遗传多样性 微卫星荧光标记-全自动基因分析仪 聚类分析
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Comparative Physical Localization of Rice Pib Gene and Its Linked RFLP Markers in Oryza sativa, O. officinalis and Zea mays 被引量:3
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作者 李霞 宁顺斌 +1 位作者 金危危 宋运淳 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第1期49-54,共6页
Comparative genetic studies have shown that there are widespread synteny and colinearity of the genes among different species within grass family. Rice ( Oryza sativa L.) is a model plant, and analysis of its genome a... Comparative genetic studies have shown that there are widespread synteny and colinearity of the genes among different species within grass family. Rice ( Oryza sativa L.) is a model plant, and analysis of its genome allows us to reveal the common features and the evolutionary rules of the gramineous genomes and accumulate the data for establishment of a common genetic system in the Poaceae. In this study, a rice gene Pib ( 10.3 kb), a map-based cloned gene, and RFLP markers linked with it are used as the tested probes to investigate their homology and physical location among the tested species. Southern blotting analysis showed that there were sequences homologous to Pib in maize genome. Further, Pib was localized onto the chromosomes of O. sativa ssp. indica cv. Guangluai 4, O. officinalis Wall ex Watt and the inbred line of Zea mays cv. Huangzao 4. The results of fluorescence in situ hybridization (FISH) and double-color FISH indicated that a synteny of Pib and RFLP markers linked with Pib existed among the genomes of the three tested species. 展开更多
关键词 RICE RFLP markers double-color FISH PIB comparative physical mapping
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