一种香豆素荧光标记多肽的合成及应用

Sirtuin蛋白是一类称为依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的组蛋白去乙酰化酶,共有7个成员,均是潜在的疾病治疗靶点。然而,目前的荧光筛选方法,只适用于SIRT1~SIRT3。因此,根据SIRT5的新酶活,设计、合成了针对SIRT5的荧光标记多肽（ISGASE（Su K）-AMC）,并通过LC-MS和荧光检测证明了该荧光标记多肽能应用于SIRT5的活性筛选。

一种利用荧光酶标仪快速确立药动学参数的方法

探索了一种快速确立COX 52-69药代动力学参数的方法,为临床前研究提供理论基础。将大鼠断粮12h后,取空白血清加入荧光标记肽COX 52-69,利用荧光酶标仪检测光度值作为阳性对照。另取实验组大鼠6只,断粮12 h后,腹腔注射荧光标记肽COX 52-69并作为零时刻,分别在15 min、30 min、45 min、60 min、75 min、90 min、105 min尾静脉取血,静置2h后离心得血清,利用荧光酶标仪对血清进行了检测,再根据阳性对照组求得大鼠血清的血药浓度,利用DAS2.0绘制了血药浓度曲线。实验结果表明:该方法可以快速确立COX 52-69的药代动力学参数,同时具有低成本的优点。

吲哚菁绿荧光标记低pH插入肽、细胞角蛋白19、血管内皮生长因子C联合尿液脱落细胞学检查在膀胱癌早期诊断中应用价值

目的探讨吲哚菁绿荧光标记低pH插入肽(ICG-pHLIP)、细胞角蛋白19(CK-19)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)联合尿液脱落细胞学检查在膀胱癌(BC)早期诊断中的应用价值。方法选取临汾市中心医院自2020年10月至2022年10月收治的98例疑似BC患者为研究对象。所有患者均进行ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C和尿液脱落细胞学检查。记录疑似BC患者组织病理学检查、ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C、尿液脱落细胞学、ICG-pHLIP+VEGF-C+CK-19+尿液脱落细胞学检查的结果。分析ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C、尿液脱落细胞学、ICG-pHLIP+VEGF-C+CK-19+尿液脱落细胞学检查对BC的诊断效能(以组织病理学检查结果为“金标准”)。比较ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C、尿液脱落细胞学单独及联合检测在T分期中的阳性表达率。结果在98例疑似BC患者中,组织病理学检查结果为BC(阳性)者50例,非BC(阴性)者48例;ICG-pHLIP诊断阳性者47例,阴性者51例;CK-19诊断阳性者41例,阴性者57例;VEGF-C诊断阳性者60例,阴性者38例;尿液脱落细胞学诊断阳性者34例,阴性者64例;ICG-pHLIP+VEGF-C+CK-19+尿液脱落细胞学诊断阳性者48例,阴性者50例。ICG-pHLIP+VEGF-C+CK-19+尿液脱落细胞学联合检测的敏感度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值均高于ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C、尿液脱落细胞学单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。ICG-pHLIP+VEGF-C+CK-19+尿液脱落细胞学、ICG-pHLIP、CK-19、尿液脱落细胞学在T分期中阳性表达率分别为48.98%(48/98)、47.96%(47/98)、41.84%(41/98)、34.69%(34/98),均低于VEGF-C的61.22%(60/98),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ICG-pHLIP、CK-19、VEGF-C、尿液脱落细胞学对BC早期诊断中具有较高的应用价值,且各项联合检测效能高于单独检测。

肝癌特异性黏附肽的鉴定和分析

利用体内噬菌体随机肽库技术筛选出肝癌特异性噬菌体肽A54,随后用化学合成法在体外合成该多肽,并标记荧光素和生物素,在组织和细胞水平对该肽进行了体内外肝癌特异性的鉴定及其抗原定位。将生物素(Biotin)标记的A54肽通过尾缘静脉注射入荷瘤裸鼠体内,通过免疫组化方法,检测A54肽与肝癌组织特异性结合的情况;并用免疫荧光细胞化学技术,对荧光素(FAM)标记A54肽进行了细胞水平的肝肿瘤特异性鉴定及抗原定位。体内外检测结果表明,A54肽仍保留了特异性识别肝癌组织的特性,且结合于肝癌细胞的膜表面。实验证明,化学合成的多肽,在体内仍然具有靶向肝癌细胞膜表面的作用,这进一步证明了筛选出来的目标噬菌体克隆其特异性靶向作用确实是由其表面插入的小分子多肽所介导的,为肝癌特异性导向药物载体的研究提供了科学依据。