用荧光标记MVR-PCR方法研究中国汉族人群DYF155S1基因座多态性

建立简便、实用的DYF15 5S1基因座基因分型的银染和荧光标记半自动分析方法 ,对中国汉族 15 5个无关男性个体血样本DNA进行分型 ,两种方法分型结果一致。 15 5人共检出 66种等位基因 ,有 3 8个等位基因仅出现 1次。根据图谱中第一条DNA片段及DNA条带数从小至大命名 ,频率最高的为 18和 2 2号等位基因 ,其第一条DNA片段大小为 180bp ,DNA条带数为连续的 16和 17个 ,频率均为 0 0 65。这一位点的基因多样性 (h)为 0 9789。 15 5人中有 2 5人表现为连续DNA谱带中有 1个或 2个DNA条带的丢失 (nullrepeat) ,序列分析证明丢失的DNA条带位置对应于 3型核心序列。结果表明 ,本文建立的分析方法能很好地揭示DYF15 5S1基因座 5′端多态性 ,是目前仅作1次PCR能获得个体Y染色体多态信息较高的技术。用本方法建立的中国汉族人群DYF15 5S1基因座等位基因频率资料 ,为群体遗传学研究及法医学应用提供了基础资料。

CD45新型免疫荧光标记与检测方法研究

使用经生物修饰后的荧光纳米颗粒,探索了白细胞共同抗原CD45的新型荧光标记与检测方法。将联吡啶钌配合物[三(2,2-联吡啶)氯化钌,六水]为核,二氧化硅为外壳的荧光纳米颗粒用鼠抗人CD45Pur进行生物修饰后,对人体白细胞进行荧光标记,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测标记样品的细胞数目和荧光强度,结果表明,该新型荧光标记方法的灵敏度高,光学稳定性好,可准确有效地识别人体白细胞。

纤毛虫胞质微管及大核的FLUTAX-EB荧光标记方法

以游仆虫、尖毛虫和尾柱虫三种腹毛目纤毛虫为材料,在应用FLUTAX方法显示纤毛虫细胞微管结构的标本制备过程中,增加了EB染色的歩骤,使标记纤毛虫细胞皮层微管的同时也显示了细胞核的结构.并提出了实验中对EB浓度及渗透时间等需注意的方面.

小鼠荧光层析成像系统及数据提取扩展方法

基于电子倍增电荷耦合器件探测器搭建了面向小鼠活体非接触式测量的荧光扩散光层析成像系统,为了避免复杂的焦点矫正计算并降低逆问题的病态性,提出一种新的电荷耦合器件平板探测器信息提取及扩展方法,并根据信息提取方法发展了非接触式荧光扩散光层析成像图像重建算法.通过大量仿体荧光扩散光层析成像实验,证明当提取的信息对应于圆柱域投影的1/2、且将信息提取域分解为3个子域时重建可获得最好的效果.制备了皮下植入荧光目标体的活体小鼠进行荧光扩散光层析成像实验,与显微CT成像结果的对比表明:搭建的系统结合所发展的图像重建算法能够较好地重建出活体小鼠内荧光目标体的位置和浓度,有望应用到小鼠肿瘤模型的荧光层析成像中.

荧光蛋白标记/高效液相色谱分析枯草芽孢杆菌-烯酰吗啉菌药合剂

生物和化学组分构建的菌药合剂是新农药制剂发展的热点,其中生物活体和化学组分的准确、快速检测方法备受关注。本实验应用绿色荧光蛋白标记和高效液相色谱技术研究了枯草芽孢杆菌-烯酰吗啉菌药合剂在54±2℃贮存14d前后生防菌株和化学组分含量的变化。结果表明:绿色荧光蛋白标记和高效液相色谱技术联用,可以用于该菌药合剂质量检测和热贮实验中混剂的贮存稳定性监控;菌药合剂在热贮实验过程中的组分含量变化在允许变化范围之内。

基于BSA模板荧光铜纳米簇的生物传感方法灵敏检测四环素

利用牛血清白蛋白(BSA)模板荧光铜纳米簇为荧光探针,发展了一种快速、非标记型的荧光生物传感新方法用于四环素的灵敏检测.结果表明,四环素的线性检测范围为5.0×10^(-8)～4.0×10^(-5)mol/L,检出限为5.0×10^(-9)mol/L(RSN=3).该方法已成功地应用于牛奶样品中四环素含量的测定,相对误差不大于3.3%,加标回收率在96.0%～102.8%之间.该研究为四环素的灵敏检测提供了一种快速、方便的新方法.

STR基因座荧光标记复合扩增检测及其法医学应用

目的建立荧光标记复合扩增检测4个STR基因座的方法,应用于法医学亲权鉴定与个人识别。方法用6-FAM标记D3S1754引物,HEX标记D4S2366和D12S375引物,TMR标记D1S549引物,PCR复合扩增,310基因分析仪电泳自动收集电泳结果数据,GeneScanAnalysisSoftware3.7NT计算扩增产物片段相对大小,Genotyper誖3.7NT软件进行样本基因型分型。将该方法应用于法医学亲权鉴定与个人识别。结果建立了荧光标记复合扩增检测4个STR基因座基因型的方法,具有良好的稳定性和较好的灵敏度,分型结果准确。结论研究建立的方法操作简便,分型结果稳定可靠,可用于遗传多态性研究和法医学亲权鉴定与个人识别。

检测对虾白斑综合症病毒（WSSV）与宿主细胞结合的荧光素标记法

采用蔗糖梯度离心方法提取对虾的白斑综合症病毒(WSSV)，用荧光素对病毒进行标记。标记的病毒同原代培养的日本对虾组织细胞进行结合试验。在4℃结合1h，洗板去除未结合的病毒成分后，在荧光显微镜下可观察到培养的血细胞和鳃细胞带有绿色荧光，而肌肉细胞和卵巢细胞没有荧光产生，荧光的产生说明病毒与细胞已经结合。该方法与过去所用的方法相比，具有操作简便、快速、直观、消耗试剂少、比较经济等优点，可成为研究白斑综合症病毒和细胞结合的一种新方法。

荧光蛋白标记研究进展

荧光蛋白标记由于其独特的颜色感官,在医学、遗传育种和草地植被抗病中占有重要的位置。荧光蛋白分子标记的选择与方法与其特异性的DNA有关,基因的结构是荧光蛋白标记、进行基因交流和促进基因表达的重要部分。荧光蛋白标记技术主要包括热激转导和电击转化两种不同的类型,需通过大肠杆菌作为载体结合菌株,不影响其任何生物功能,是目前大分子示踪检测及研究定殖的主要方法,研究荧光蛋白标记对病原菌和根际促生菌的定殖和良好利用优良菌株有着重要意义。但是,荧光蛋白标记是在分子水平,对研究的方法增加了难度。根据目前国内外已有的部分荧光蛋白标记研究,评述了标记的原理,标记的适用性以及标记的不同方法等内容,并展望了不同标记方法对利用荧光蛋白的可能性,以期为研究荧光蛋白标记提供系统的方法参考和技术借鉴。

微卫星荧光标记基因组扫描

微卫星荧光标记基因组扫描为 2 0世纪 90年代发展起来的一项分子生物学技术 ,在基因定位、个体识别等方面有广泛的应用 .文中对其原理、策略、分析方法及应用作了论述 ,并探讨了它的发展前景 .

流式荧光发光法检测多肿瘤标志物的方法学评价

目的评价流式荧光发光法在AFP、CEA、CA125、CA199定量测定中的可靠性。方法在Luminex 200多功能流式点阵仪上评价了本法的精密度、准确度(回收实验)、检出限、线性和抗干扰性,并分析了本法与电化学发光法检测结果的相关性。结果批内变异系数均小于10%,批间变异每米均小于13%,回收率在89%～113%之间,灵敏度较好,线性良好(r>0.99),血红蛋白、胆红素、三酰甘油对测定结果无显著性干扰(P>0.05),与电化学发光法检测结果相关性良好(r>0.975)。结论本方法测定结果准确、可靠,操作简便、快速,适宜于临床检测推广。

禽流感病毒通用型荧光RT-PCR快速检测方法的应用

荧光PCR技术是将荧光素标记的探针与引物一起，在荧光PCR仪中反应，电脑对整个反应进行实时监测，避免了交叉污染，大大提高检测的敏感性。荧光PCR的与普通PCR比较，敏感性提高约100倍，可检测到组织中的微量病毒。

用异硫氰酸荧光素标记葡萄球菌A蛋白检测抗核抗体

旨在建立一种血清抗核抗体检测的新方法.首先以异硫氰酸荧光素标记葡萄球菌A蛋白,将冰冻于燥的葡葡球菌A蛋白溶解于缓冲液中,4℃磁力搅拌下逐滴加入异硫氰酸荧光素,并持续搅拌24h,然后SepheadexG25柱层析一次.得到异硫氰酸荧光素标记葡萄球菌A蛋白试剂.

大连日前研发成功纳米稀土荧光生物标记材料

据报导，中国科学院大连化物所目前成功地研制出一系列粒径在25～55纳米的硅胶基质掺杂型纳米稀土荧光生物标记材料、表面带有活性氨基的掺杂型纳米稀土荧光生物标记材料及氧化锆基质的掺杂型纳米稀土荧光生物标记材料。这些标记材料在荧光强度、光稳定性、生物亲和性、生物标记方法及时间分辩荧光测定灵敏度等方面都表现出远优于稀土配合物荧光标记材料的良好性能，

HBV-M时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的探讨TRFIA检测HBV-M方法的相关性、精密度、准确性和重复性。方法不同浓度的HBV-M标准血清及已知高浓度倍比稀释后的5项标志物混合血清标本用TRFIA法分别作定量检测。结果HBsAg、HBsAb、HBeAg3项测得的相对荧光强度与含量之间相关关系良好rHBsAg=0.9999,rHBsAb=0.9924,rHBeAg=0.9999,P<0.01,均有非常显著相关性;而HBeAb和HBcAb则相对较差,P>0.05;已知浓度5项标志物混合血清标本理论值和实测值的相关关系良好,r值均达到0.9980以上,P<0.01;结果准确度较好。结论HBV-MTRFIA精密度、重复性良好并具有较高的可靠性。

纳米稀土荧光生物标记系列新材料问世

据报道，大连化学物理研究所袁景利等人在纳米稀土荧光生物标记材料的制备与生化分析应用研究工作中，成功地研制出一系列粒径在25～55nm的硅胶基质搀杂型纳米稀土荧光生物标记材料、表面带有活性氨基的搀杂型纳米稀土荧光生物标记材料、表面带有活性氨基的共价键合型纳米稀土荧光生物标记材料及氧化锆基质的搀杂型纳米稀土荧光生物标记材料。这些纳米稀土荧光生物标记材料在荧光强度、光稳定性、生物亲和性、生物标记方法及时间分辨荧光测定灵敏度等方面性能远优于稀土配合物荧光标记材料，

基于石墨烯量子点的荧光探针应用于抗坏血酸检测的研究

基于石墨烯量子点(GQDs)的荧光性能建立了一种非标记荧光方法,用于灵敏和选择性测定抗坏血酸(AA)。GQDs溶液在紫外光激发下发出很强的蓝色荧光,当向溶液中加入AA后,GQDs溶液的荧光被猝灭。猝灭机理可能为在弱酸性介质中,AA与GQDs发生氧化还原反应,AA转移电子给GQDs。荧光猝灭强度与AA浓度在5.0×10^(-6)~7.5×10^(-5)mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限低至1.0×10^(-6)mol/L。该体系成本低、操作简单,并且在多种可能干扰的物质存在下对AA表现出很高的选择性。本方法应用于生物样品中AA的检测,回收率在95.2%~115.3%之间。

端粒DNA长度检测方法

端粒(Telomeres)位于染色体末端,由高度重复的DM序列(人类为TTAGGG)和结合蛋白所构成,保护染色体免遭熔合、重组和降解.

总免疫球蛋白E时间分辨荧光免疫分析法的建立与评价

目的：应用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）建立总免疫球蛋白E（TIgE）的定量测定方法。方法采用双抗体夹心法建立TIgE TRFIA ，并对其进行方法学评价。结果建立的 TIgE TRFIA批内、批间变异系数（CV）分别为1．59％～1．68％和5．23％～7．33％；检测低限为0．25 IU/mL ；线性范围为1．47～1510．00 IU/mL ；其准确性在允许偏差±10％内；回收率为97．00％～106．75％；交叉反应试验和干扰试验均能满足检测要求；检测TIgE达15000 IU/mL时仍未见 HOOK效应；与欧蒙公司的ELISA法检测40份临床样本结果相关性良好（r＝0．9992，P＜0．01），2种方法间预期偏差在允许范围（±12．5％）内；检测健康成人样本TIgE的参考值为100 IU/mL。结论建立的TIgE TRFIA具有精密度好，灵敏度高，线性范围宽，准确度高，特异性强等优点，能满足临床需要。