一种FAM荧光标准溶液的制备及荧光校准应用

针对目前多种生物类分析仪器羧基荧光素(FAM)通道荧光校准缺乏合适的荧光标准溶液的问题,制备了5种浓度的FAM荧光标准溶液,并对其制备方法、荧光性能、稳定性、均匀性等方面进行了考察。结果表明,该荧光标准溶液荧光性能优于常规FAM溶液,均匀性良好,在25、4、-20℃3个温度下均可稳定保存7个月。通过对恒温扩增核酸分析仪、数字PCR仪、多功能酶标仪等多种仪器进行校准,证明其具有良好的适用性,为FAM通道的荧光校准提供了可靠的参考依据。

荧光微球校准卡的制备及应用

目的:制备一种适用于荧光POCT仪器光路校准的荧光微球校准卡。方法:通过偶联羧基荧光素和氨基聚苯乙烯微球制备荧光微球校准卡,在荧光POCT仪器上进行光路校准应用。结果:制备的荧光微球校准卡精密度CV<4%,测值重复性CV<10%,具备较好的检测性能;在避光、常温和干燥的环境中,保存期限≥1年;应用在荧光POCT仪器光路校准的相对偏差<4%,满足校准要求。结论:制备了一种稳定性好、时效性长、便携的荧光微球校准卡。

PCR-SSP/PCR-SSO两种KIR基因分型方法的比较

目的杀伤细胞免疫蛋白样受体(KIR)基因在自然杀伤细胞活性调节、机体抗感染、移植免疫过程中发挥重要作用。在脐带血移植中,KIR基因分型的效率和准确关系到移植的成败。为了满足临床上对KIR基因分型的要求,对比分析聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)和聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSO)两种方法,试图建立一个高效便捷检测KIR基因分型的方法学体系。方法从2018年到2019年已外送到第三方检测实验室(北京博富瑞医学检验实验室有限公司)做过KIR基因分型检测的脐带血样本中随机取出12份,分别用PCR-SSP及PCR-SSO商品化试剂盒进行KIR基因分型检测,并通过凝胶电泳分析或MATCH IT!DNA软件分析,获取KIR基因分型结果。结果12例脐带血样本中,PCR-SSO方法学检测的结果与原PCR-SSO方法检测结果完全一致,PCR-SSP方法学检测的结果与原PCR-SSO方法检测结果9例相同,有2例因出现漏孔而无法判读,有1例出现了假阳性带。结论PCR-SSO方法学检测KIR基因效果优于PCR-SSP,但是PCR-SSO方法学也存在当微珠的荧光校准值接近于临界值时,结果出现错判的现象;为保证KIR基因分型的准确度,建议PCR-SSP方法出现漏孔或者PCR-SSO方法荧光校准值接近于临界值时两种方法相互验证。