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食用真菌核荧光染色效果的试验 被引量:3
1
作者 罗信昌 陈大年 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期180-182,共3页
近代实验证实,某些荧光素与其核生物细胞核内的DNA有着亲和力。亲和后,可使细胞核内DNA发出录色的荧光。曾有人将荧光染料Hoechst 33258应用于植物病原真菌上。但染色效果并不理想。N。Kangatharalingam,M。W。ferguson(1984)将Hoechst ... 近代实验证实,某些荧光素与其核生物细胞核内的DNA有着亲和力。亲和后,可使细胞核内DNA发出录色的荧光。曾有人将荧光染料Hoechst 33258应用于植物病原真菌上。但染色效果并不理想。N。Kangatharalingam,M。W。ferguson(1984)将Hoechst 33258应用于双孢蘑菇(Agaricus bisporus)等丝状真菌上,染色效果大为改观。但将此种核荧光染料应用在食用真菌菌丝体、担孢子、分生孢子中,国内外尚未见过研究报道。 展开更多
关键词 荧光染色 食用菌 荧光染料
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微核荧光染色法分色技术的改进及最适条件的探讨
2
作者 张清林 王治乔 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1991年第3期201-201,204,共2页
骨髓细胞微核率检测是观察体内染色体畸变比较简易的方法,微核一般用Giemsa染色。但此法的缺点是特异性差,伪核难辨.荧光法专一性强,伪核易于鉴别。我们对此法的分色技术作了改进,並对某些实验条件进行了探讨。 材料和方法 动物:本院动... 骨髓细胞微核率检测是观察体内染色体畸变比较简易的方法,微核一般用Giemsa染色。但此法的缺点是特异性差,伪核难辨.荧光法专一性强,伪核易于鉴别。我们对此法的分色技术作了改进,並对某些实验条件进行了探讨。 材料和方法 动物:本院动物场繁殖上海种小鼠,体重16~24g,每组10只,雌雄各半。 展开更多
关键词 荧光染色 分色技术 染色
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黑木耳原生质体制备、再生及单核体荧光鉴定 被引量:7
3
作者 韩增华 张丕奇 +3 位作者 戴肖东 孔祥辉 马庆芳 张介驰 《食用菌学报》 2008年第3期13-17,共5页
利用正交试验研究了黑木耳原生质体制备、再生的最佳条件,结果表明,原生质体制备最佳条件是酶解温度31℃、酶浓度1.0%、菌龄5 d、酶解时间4 h,原生质体再生的最佳条件是酶解温度27℃、酶解时间4 h、酶浓度1.5%、菌龄11 d。稳渗剂种类对... 利用正交试验研究了黑木耳原生质体制备、再生的最佳条件,结果表明,原生质体制备最佳条件是酶解温度31℃、酶浓度1.0%、菌龄5 d、酶解时间4 h,原生质体再生的最佳条件是酶解温度27℃、酶解时间4 h、酶浓度1.5%、菌龄11 d。稳渗剂种类对黑木耳原生质体再生率的试验结果表明,采用0.5 mol/L蔗糖为稳渗剂,各黑木耳菌株的原生质体再生率最高。HW2号菌株原生质体经核染色其单核化比率最高;在荧光显微镜下观察菌丝核相,单、双核清晰可辨。 展开更多
关键词 黑木耳 原生质体 再生 荧光核染色
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多重定量荧光PCR快速检测染色体非整倍体疾病 被引量:3
4
作者 江帆 丁渭 +5 位作者 王霞 袁玉枝 屈艳霞 陈桂兰 卢航 陈华云 《检验医学与临床》 CAS 2012年第15期1846-1847,1849,共3页
目的探讨多重定量荧光PCR快速检测染色体非整倍体标本疾病的价值。方法利用21,18,13号及X染色体上15个STR(短串联重复序列)位点进行多重PCR扩增,在24h内快速检测染色体非整倍体标本。通过建立两个多重PCR体系,对921例临床标本(包括外周... 目的探讨多重定量荧光PCR快速检测染色体非整倍体标本疾病的价值。方法利用21,18,13号及X染色体上15个STR(短串联重复序列)位点进行多重PCR扩增,在24h内快速检测染色体非整倍体标本。通过建立两个多重PCR体系,对921例临床标本(包括外周血、绒毛膜及羊水标本)进行检测。结果 921例标本中915例结果与染色体核型结果相符,其中2例45,X外周血标本,2例21-三体综合征标本、1例46,XX标本未检出,1例羊水标本分析失败,与传统染色体核型分析方法相比,其灵敏度及特异度分别为97.64%、99.85%。结论多重定量荧光PCR技术可用于快速诊断非整倍体疾病。 展开更多
关键词 多重定量荧光PCR染色型分析 21-三体综合征 Klineflter′综合征 Turner′综合征
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黑木耳亲本、单核、杂交菌株鉴定的研究 被引量:10
5
作者 韩增华 张丕奇 +3 位作者 戴肖东 孔祥辉 马庆芳 张介驰 《菌物研究》 CAS 2009年第2期99-103,共5页
应用荧光核染色技术、酯酶同工酶鉴定技术,对黑木耳亲本双核菌株、原生质体单核菌株和单-单杂交菌株进行筛选鉴定。结果表明:荧光核染色技术可快速有效地鉴定获得菌株的核相,酯酶同工酶技术可准确地区分单核菌株及杂交新菌株的不同核型... 应用荧光核染色技术、酯酶同工酶鉴定技术,对黑木耳亲本双核菌株、原生质体单核菌株和单-单杂交菌株进行筛选鉴定。结果表明:荧光核染色技术可快速有效地鉴定获得菌株的核相,酯酶同工酶技术可准确地区分单核菌株及杂交新菌株的不同核型,研究得到1个酶带差异显著的新菌株。 展开更多
关键词 黑木耳 原生质体单 杂交菌株 荧光核染色 酯酶同工酶 菌株鉴定
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食用真菌核荧光染色技术的研究 被引量:19
6
作者 罗信昌 陈大年 《真菌学报》 CSCD 北大核心 1990年第1期64-68,84,共5页
本文报道荧光染料双苯并咪唑Hoechst 3325 8(bi sbenzimide),应用于香菇(Lentinusedodes)、平菇(pleurotus ostreatus)、金针菇(Flammulina velutipes)、木耳(Aurtculariaauricula),毛木耳(A.polytricha)等5种食用菌菌丝体。担孢子、分... 本文报道荧光染料双苯并咪唑Hoechst 3325 8(bi sbenzimide),应用于香菇(Lentinusedodes)、平菇(pleurotus ostreatus)、金针菇(Flammulina velutipes)、木耳(Aurtculariaauricula),毛木耳(A.polytricha)等5种食用菌菌丝体。担孢子、分生孢子核的荧光染色研究。配制染液的McIlvaine缓冲液pH值、缓冲液含0.6M MgSO_4·7H_2O、菌丝生长期、孢子贮存期亦与染色效果密切相关。我们观察到,使用插片法,爬片2/5的菌丝体,pH7.0—7.4Hoechst 3325 8染液,染色3分钟为菌丝体核荧光染色的最佳效果。新鲜的担孢子,分生孢子、使用pH 6.8含0.6 M MgSO_4·7 H:O Hoechst 3325 8染色液染色3分钟比使用pH 6.8Hoechst 3325 8的染液有明显增效作用。 展开更多
关键词 食用真菌 荧光染色
原文传递
Fluorescent vital staining of plant sexual cell nuclei with DNA-specific fluorochromes and its application in gametoplast fusion 被引量:2
7
作者 YANGHONGYUAN XINLIWU 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1993年第2期121-130,共10页
DNA-binding fluorochromes are often used for vital staining of plant cell nuclei. However, it is not always sure whether the cells after staining still remain in living state. We chose several criteria to estimate the... DNA-binding fluorochromes are often used for vital staining of plant cell nuclei. However, it is not always sure whether the cells after staining still remain in living state. We chose several criteria to estimate the validity of real vital staining for sexual cell nuclei. These were: the cytoplasmic streaming in pollen tubes whose nuclei were stained, the simultaneous visualization of fluo-rochromatic reaction and nucleus staining in isolated generative cells, and the capability of isolated, prestained generative or sperm cells to fuse with other protoplasts. The results confirmed that 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), Hoechst 33258 and mithramycin could be used as real vital stains, though their efficiency varied from case to case; among them DAPI showed best effect. The fluorescent vital staining technique offered a useful means fori-dentification and selection of heterokaryons in gametoplast manipulation studies. 展开更多
关键词 fluorescent vital staining DNA-specific fluorochrome generative cell sperm cell gametoplast fusion.
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茯苓原生质体单核化及同核体杂交
8
作者 李寿建 董彩虹 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1258-1272,共15页
茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体... 茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体杂交育种体系,但是部分茯苓菌株子实体形成困难或子实体贴生,导致担孢子收集困难,因此原生质体单核化的研究具有重要意义。本研究以两株存在较大遗传差异且同核体类型不同的菌株776和775为材料,核荧光染色表明超过60%的原生质体具有细胞核,原生质体再生率分别为11.0%和7.6%,不易生长的再生菌株中既有同核也有异核菌株。原生质体单核化获得了两个菌株的同核体菌株,比例可达到10%以上,菌株776获得了两种交配型的同核体菌株(5:3),不存在偏分离(χ~2=0.5),但菌株775原生质体单核化仅获得了一种交配型的同核体菌株,表现出严重的交配型偏分离。通过杂交菌株与两亲本对峙试验及基于rpb2的杂合位点验证,证实获得了原生质体同核体杂交菌株25株,原生质体同核体与单孢同核体杂交菌株50株,表明茯苓原生质体同核体杂交育种的可行性。 展开更多
关键词 原生质体单 交配型因子偏分离 原生质体荧光染色 rpb2
原文传递
Expression and role of PAK6 after spinal cord injury in adult rat
9
作者 CHEN Xiang-dong ZHAO Wei SHEN Ai-guo 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2011年第5期277-281,共5页
Objective: To observe p21-activated kinase 6 (PAK6) expression and its possible role after spinal cord injury (SCI) in adult rat.Methods: Sprague-Dawley rats were subjected to spinal cord injury. To explore the ... Objective: To observe p21-activated kinase 6 (PAK6) expression and its possible role after spinal cord injury (SCI) in adult rat.Methods: Sprague-Dawley rats were subjected to spinal cord injury. To explore the pathological and physiological significance of PAK6, the expression patterns and distribution of PAK6 were observed by Western blot, immunohistochemistry and immunofluorescence.Results: Western blot analysis showed PAK6 protein level was significantly up-regulated on day 2 and day 4,then reduced and had no up-regulation till day 14. Immunohistochemistry analysis showed that the expression of PAK6 was significantly increased on day 4 compared with the control group. Besides, double immunofluorescence staining showed PAK6 was primarily expressed in the neurons and astrocytes in the control group. While after injury, the expression of PAK6 was increased significantly in the astrocytes and neurons, and the astrocytes were largely proliferated. We also examined the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and found its change was correlated with the expression of PAK6. Importantly, double immunofluorescence staining revealed that cell proliferation evaluated by PCNA appeared in many PAK6-expressing cells on day 4 after injury.Conclusion: The up-regulation of PAK6 in the injured spinal cord may be associated with glial proliferation. 展开更多
关键词 PAK6 protein human p21-activated kinases Spinal cord injury ASTROCYTES
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