应用免疫荧光直接法诊断鸡新城疫

长期以来,国内确诊鸡新城疫一直采用分离病毒中和试验,血凝和血凝抑制试验,以及流行病学、临床检查和剖检变化等方法,这些方法费时费力,做出及时诊断也是困难的。

荧光直接法测定Co的研究

本文研究了Co（Ⅲ）－SB荧光体系。钴的浓度在10(-7)～10(-5)范围内，荧光强度与其浓度成正比，此法的灵敏度明显高于钴的比色法及原子吸收法。

直接免疫荧光法和间接免疫荧光法检测患儿下呼吸道感染病原体方法的比较

目的比较在下呼吸道感染患儿病原体检测中,直接免疫荧光法(DFA)和间接免疫荧光法(IFA)的检测结果及影响因素。方法选取2022年1—5月该院住院部下呼吸道感染患儿103例为研究对象,分别采集两份鼻咽拭子和2 mL静脉血,用DFA检测病毒抗原和IFA检测血清中病原体IgM抗体,同时用荧光PCR法进行复检。比较两种方法的灵敏度、特异度及一致性,分析患儿年龄、性别、发病天数、是否用药对检测结果的影响。结果DFA和IFA两种方法检测的灵敏度分别为60.71%和12.50%,特异度分别为100.00%和48.94%,差异有统计学意义(P<0.001)。流感病毒(IFV)B、腺病毒(ADV)两种方法的检测结果具有一致性,但一致性程度差;IFVA、呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒(PIV)两种方法的检测结果不具有一致性。患儿发病天数、性别、是否用药的检测阳性率经比较,差异无统计学意义(P>0.05)。≤1岁和2~3岁患儿的检测阳性率均高于4~5岁、6~7岁和≥8岁患儿,RSV和ADV为主要病原体,且各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在下呼吸道感染患儿中,3岁以下的儿童呼吸道病毒感染率最高,以RSV和ADV为主。DFA和IFA检测结果差异显著,DFA的检测灵敏度和特异度均高于IFA。因此DFA更利于明确患儿下呼吸道感染病原体种类。

直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用

目的采用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原,为临床呼吸道病毒感染的早期诊断提供病原学依据。方法选择呼吸道感染患者762例,采集鼻咽深部分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒A型(InfA)、流感病毒B型(InfB)以及副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)7种呼吸道常见病毒抗原。结果在762例呼吸道感染患者(儿童724例、成人38例)中,呼吸道病毒抗原阳性者264例(儿童261例、成人3例),阳性检出率为34.65%;其中RSV 186例(70.45%)、PIV3 29例(10.98%)、InfA 20例(7.58%)、ADV 13例(4.92%)、PIV1 4例(1.52%)、PIV2 2例(0.76%)、InfB 2例(0.76%)、混合型8例(3.03%)。结论直接免疫荧光法病毒抗原测定可以用于呼吸道病毒感染的早期诊断。

直接免疫荧光法对多种呼吸道病毒检测的临床意义

目的为临床提供一种快速诊断呼吸道病毒感染的方法。方法采用直接荧光免疫法检测呼吸道分泌物的合胞病毒、腺病毒、流感病毒A、流感病毒B及副流感病毒1、2、3型。结果对195例呼吸道感染者的鼻咽分泌物标本采用直接荧光免疫法进行病毒原检测,结果显示本地区病毒感染率为57.94%,病毒原以呼吸道合胞病毒为主,副流感病毒1、3型次之,感染以冬季好发。结论该法具有快速、简便、特异性高等优点,对确定临床呼吸道病毒感染是一种非常好的方法。直接荧光免疫法操作简便,费用较低,适合基层医院推广使用。

金标法和直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒的比较

目的 金标法和直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒的方法比较.方法同时用金标法和直接免疫荧光法检测350例儿童患者的鼻咽拭子中呼吸道合胞病毒.结果 350例中,直接免疫荧光法检出173例阳性,阳性率为49.4%;金标法检出121例阳性,阳性率为34.6%,两种检测方法灵敏度比较差异有统计学非常显著性意义（P＜0.01）,但两种检测方法的检测结果一致性检验,kappa=0.702,基本一致.结论 直接免疫荧光法比金标法的灵敏度高,两种检测方法的检测结果基本一致.

直接免疫荧光法检测阴道毛滴虫

目的 研究多克隆抗体直接免疫荧光法(direct immunofluorescence assay,DFA)检测阴道毛滴虫的最佳反应条件及临床应用意义。方法 确诊为阴道炎的患者取阴道分泌物,经培养收集虫体,稀释成悬液,制作抗原片。取阴道毛滴虫免疫山羊血清,按Marssall氏法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体,观察不同抗体稀释度(1:10～1:2560)、不同孵育时间(15,30,45,60,90,120 min)、不同封闭剂(1％牛血清白蛋白,10％牛血清白蛋白及10％小牛血清)对DFA检测阴道毛滴虫的影响。对102例阴道炎患者标本分别用培养法、悬滴法和DFA作临床检验。结果抗体稀释度1:160、37℃孵育45min、封闭剂1％或10％牛血清白蛋白为最佳反应条件。检测102例临床标本,3种方法均阳性的16例,均阴性的68例。有13倒悬滴法、3例DFA检测阴性,而另2法阳性。1倒悬滴法阴性,DFA阳性,培养法未能证实。以培养法为标准,DFA敏感性为87.9％,特异性为98.6％。结论 DFA可作为悬滴法的一种替代手段用于临床检验。

直接免疫荧光法分析儿童呼吸道病毒的分布

[目的]采用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原,为儿童呼吸道病毒感染诊断提供帮助。[方法]选择398例呼吸道感染的住院患儿,采用直接免疫荧光法对咽部脱落细胞中的呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、腺病毒(adenovirus,ADV)、流感病毒A型(the influenza virus type A,IFVA)、流感病毒B型(the influenza virus type B,IFVB)、副流感病毒1型(parainfluenza virus type 1,PIV1)、副流感病毒2型(parainfluenza virus type 2,PIV2)和副流感病毒3型(parainfluenza virus type 3,PIV3)7种常见病毒抗原进行检测,并进行统计学分析。[结果]在398例呼吸道感染患儿中,阳性91例,检出率为22.86%。其中最高为RSV 37例(40.66%),其次为PIV3 19例(20.88%)、IFVB 14例(15.38%)。急性扁桃体炎、毛细支气管炎、肺炎、急性支气管炎、上呼吸道感染的病毒阳性率分别是46.67%(14/30)、40.00%(20/50)、26.67%(40/150)、18.42%(7/38)、7.69%(10/130)。随着年龄的增长,呼吸道病毒的感染率逐步下降(P<0.05),≤1岁的病毒感染率最高,为26.52%。儿童呼吸道病毒感染以冬春两季好发。[结论]本地区儿童急性呼吸道感染的主要病毒是RSV,病毒感染随年龄增加而下降,治疗中应谨慎使用抗生素。

直接免疫荧光法在阴道加德纳菌感染诊断中的应用研究

加德纳菌（GV）是一类革兰阴性或阳性短杆菌,厌氧,嗜血,培养困难。阴道加德纳菌不仅引起尿道炎和阴道炎,还可导致早产、低体质量儿、绒毛膜炎、羊膜炎、羊水感染、子宫内膜炎、急性输卵管炎、手术后感染和子宫颈癌等[1]。GV还可经性接触传播,与男性非淋菌性尿道炎、男性不育亦有一定关系。细菌性阴道病是妇科和产科感染的高危险因素[2]。临床实践中如果能迅速检测并及时处理,

中国对虾肝胰脏细小病毒病的直接荧光抗体法诊断研究

中国对虾肝胰脏细小病毒（ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｔｉｃｐａｒｖｏｖｉｒｕｓｄｉｓｅａｓｅ，ＨＰＶＤ）是一种广泛流行于中国对虾中的危害性较大的疾病。由于该病没有特异的肉眼症状，因此早期、快速诊断方法的研究就十分重要。作者曾完成了ＳＰＡ协同凝集试验法和免疫金银染色法的诊断研究。本文用直接荧光抗体法进行研究，观察其诊断效果。结果是，将抗ＨＰＶ的荧光抗体滴加到对虾肝胰脏组织涂片以后，在某些样品的肝胰脏上皮细胞中出现了圆形、椭圆形，大小６～１３μｍ的黄绿色荧光物。经比较，该荧光物的大小和形状与同一样品病理组织切片上经Ｈ－Ｅ染色后上皮细胞中出现的ＨＰＶ包涵体是一致的。由此认为，这些存在于肝胰脏上皮细胞内的荧光物是ＨＰＶ包涵体，而直接荧光抗体法用于诊断中国对虾ＨＰＶ是有效可行的。

用直接荧光抗体法和细菌培养法对中华鳖体内的嗜水气单胞菌的检测

用直接荧光抗体法和细菌培养法对中华鳖体内的嗜水气单胞菌的检测陈昌福（华中农业大学水产学院，武汉４３００７０）ＦＬＵＯＲＥＳＣＥＮＴＡＮＴＩＢＯＤＹＴＥＣＨＮＩＱＵＥＣＯＭＰＡＲＥＤＴＯＰＬＡＴＥＣＵＬＴＵＲＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＣＯＵＮＴＯＦＡｅｒｏ...

直接荧光抗体法检测禽波氏杆菌

制备了兔抗禽波氏杆菌特异性荧光抗体并建立了直接荧光抗体检测方法 ,对禽波氏杆菌在人工感染雏鸡内的致病机理作了初步研究。结果 ,该荧光抗体只与其相应菌株发生特异性荧光反应 ,而不与其他病原菌株发生反应。对人工感染发病雏鸡的检测结果表明 ,禽波氏杆菌主要定植于上呼吸道黏膜 ,并造成损害。该技术具有简便、快速。

直接免疫荧光法对儿童呼吸道病毒感染病原学检测的临床意义

目的建立一种快速检测呼吸道病毒感染的方法,了解儿童呼吸道病毒感染的流行特征。方法采用直接免疫荧光法对2012年8月至2013年7月住院的1801例呼吸道疾病患儿鼻咽部抽吸物进行呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A、B型、副流感病毒1、2、3型、腺病毒检测。结果检测下呼吸道感染的患儿1801例,共检出呼吸道病毒766例,检出率42.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)是儿童下呼吸道感染最常见的病原体,婴幼儿最高,通常在冬春季节流行。结论直接免疫荧光法具有快速、简便、特异性高等优点,适应于呼吸道病毒感染的早期诊断。

酶联免疫吸附试验和直接免疫荧光检测沙眼衣原体的方法学比较

目的:评价酶联免疫吸附试验(ELISA)和直接免疫荧光(DFA)法检测沙眼衣原体(CT)的灵敏度和特异性。方法:分别采用CT抗原DFA和ELISA法检测泌尿生殖道CT,两法结果不一致时采用荧光定量PCR确证。以DFA和ELISA法均阳性或经PCR确证阳性的结果作为真阳性,分别计算DFA和ELISA法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果:共检测222份女性宫颈拭子和69份男性尿道拭子,真阳性66例,真阴性225例,其中DFA和ELISA检测结果均阳性63例,另10例两法结果不符的样本经PCR检测阳性3例。ELISA法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为97.0%、98.7%、95.5%和99.1%,而DFA分别为98.5%,98.2%,94.2%,99.5%。两种方法检测结果符合率为96.6%。结论:ELISA和DFA法检测CT有较高的灵敏度和特异性,均可为临床治疗和性病监测工作提供可靠依据。

快速检测衣原体的直接免疫荧光法在尿道炎诊断中的应用

沙眼衣原体D-K血清型是目前西方国家性传播疾病的主要病原体。文献报道每年衣原体引起的经性接触传播的新发病例在500万左右,比其它性病的总和还要多。据统计在欧洲约1/3青年人被感染,其中以18～28岁发病率最高。常见衣原体所致性传播疾病有尿道炎、宫颈炎、不育症及新生儿经产道感染的急性结膜炎。近年来芬兰、美国。

直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测分析

目的研究分析直接免疫荧光法用于多种呼吸道病毒抗原的快速检测。方法该院接诊呼吸道感染患者230例,将其分为成人组(105例)和儿童组(125例),均通过直接免疫荧光法对7种病毒抗原进行检测,其中包括流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、呼吸道合胞病毒、腺病毒。结果 230例呼吸道感染的病毒检出呈阳性85例,检出率为37.0%,其中最高为呼吸道合胞病毒50例(21.7%),其次为流感病毒A(16例,6.9%)、流感病毒B(14例、6.0%)。呼吸道病毒的阳性检出率随着年龄增长而下降,其中儿童组检出阳性55例,阳性率为44.0%,明显高于成人组(30例,28.6%),差异有统计学意义(P<0.05),且两者的最高检出率均为呼吸道合胞病毒,分别为27.2%和15.2%。结论呼吸道感染与流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、合胞病毒、腺病毒等7种病毒密切相关,直接免疫荧光法可对其进行快速检测,并且灵敏度及特异性均较高,易于标准化,能满足实验室对病毒检测要求,应在临床中推广应用。

直接免疫荧光法分析白血病及骨髓增生异常综合征患者免疫表型

目的 :检测急性白血病 (AL)及骨髓增生异常综合征 (MDS)免疫表型及其临床意义。方法 :用流式细胞仪CD4 5设门直接免疫三标记法 ,检测 4 9例AL及MDS患者免疫表型。结果 :ALL双克隆型 9例 ,其中髓系伴T -ALL 3例 ,髓系伴B -ALL 4例 ,1例为髓系伴T、B标记 (CD13 +CD7+CD19+ ) ,1例同时CD7+CD19+ ;ALL同时表达CD3 4 及HLA -DR最高 (6 0 .0 1%) ,明显高于AML、MDS(P <0 .0 0 5 )。AML双克隆型 2 0例 ,7例为髓系伴CD7+ ,2例髓系伴CD19+ ,11例为同时表达CD3 4 +HLA -DR +。MDS患者骨髓细胞表达髓系成熟抗原CD13 +及CD3 3 +增高 ,未发现淋系抗原的表达。MDS -RAEB、RAEBT及转为白血病病例均高表达CD3 4 及HLA -DR抗原。结论 :用三标记法简便易行 ,提高诊断准确性 ;单抗组合应兼顾髓、淋系同时表达 ;应加胞浆抗原检测。

皮肤组织冰冻切片在直接免疫荧光法中包埋剂的改良应用

目的用普通胶水代替OCT包埋皮肤组织来制作冰冻切片,不仅降低了成本,而且所制切片与用OCT包埋剂包埋所制切片在制片质量与染色效果上无异。方法行冰冻切片时,用普通胶水代替OCT对皮肤组织起支托固定作用。结果用普通胶水包埋制作的冰冻切片,在制片质量及染色效果上均与用OCT包埋剂包埋制片无异。结论冰冻切片行直接免疫荧光法要求冰冻切片质量优良,且在制片过程中快捷、力求保持抗原的完整性。质量优良的包埋剂在制片过程中可以达到以上要求,但其价格昂贵;用普通胶水代替质量优良的包埋剂,不仅在制片质量及染色效果上与前者无异,且价格便宜,值得推广使用。