荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原临床应用

目的探讨荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原的临床应用价值。方法分别采用荧光磁微粒酶免疫分析法、放射免疫法检测208例恶性肿瘤患者血清癌胚抗原,并与手术组织病理结果进行对照,比较2种方法诊断恶性肿瘤的符合率。结果与手术组织病理结果进行对照,荧光磁微粒酶免疫分析法的符合率分别为69.6%、44.8%、46.8%、60.0%;放射免疫法的符合率分别为67.6%、48.3%、48.9%、56.7%;二者诊断恶性肿瘤的符合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原对诊断恶性肿瘤有一定价值。

化学发光磁酶免疫分析法检测牛奶中鼠伤寒沙门氏菌

建立化学发光磁酶免疫分析法检测牛奶中鼠伤寒沙门氏菌,并优化化学发光条件和免疫反应条件。结果表明:最佳发光条件为鲁米诺、过氧化氢、对碘苯酚的浓度分别为5.0×10^(-3)、1.76×10^(-2)、5.0×10^(-3)mol/L,辣根过氧化物酶的质量浓度为5.0×10^(-5)mg/mL;最佳免疫条件为免疫磁珠用量50μL、一抗体积稀释比1∶8000;方法的检出限为3.0×10^(3)CFU/mL,回收率为87.94%~113.04%。建立的方法可用于牛奶中鼠伤寒沙门氏菌的检测。

荧光PCR法和微粒子酶免疫分析检测人类巨细胞病毒的比较

目的 比较荧光PCR法和微粒子酶免疫分析检测人类巨细胞病毒 ,探讨检测人类巨细胞病毒的方法。方法 应用荧光PCR法和微粒子酶免疫分析对同份血标本分别进行了HCMV -DNA和HCMV -IgG、IgM检测。结果 荧光PCR法检出的阳性率比微粒子酶免疫分析高 (P <0 .0 5 )。结论 HCMV -DNA -PCR及抗HCMV -IgM对病人同时检测 ,可提高HCMV活动性感染检出率。

磁微粒化学发光酶免疫分析法快速检测血栓4项性能评价

目的探讨磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)和组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)的临床价值。方法采用磁微粒化学发光酶免疫分析法分别检测TM、TAT、t-PAIC和PIC,分析其精密度、携带污染率、正确度、线性检测范围、临床可报告范围、生物参考区间,并按美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP 系列文件的要求,评价其检测结果。结果用磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓4项时,批内、批间精密度[变异系数(CV)]均<10%,携带污染率均<1.0%,线性检测中a值均在1±0.05 范围内,决定系数r^2均≥0.950 0,临床可报告范围、正确度和生物参考区间均符合要求。结论用磁微粒化学发光酶免疫分析法检测血栓4项有较好的临床价值。

改良荧光磁微粒酶免分析法检测三种肿瘤标志物及应用

探讨利用改良荧光磁微粒酶免分析法(A法)检测三种肿瘤标志物及临床应用价值。本文用A法检测352份血清AFP、CEA和CA19-9水平,并与化学发光微粒免疫分析法(B法)比较。A法与B法检测结果相关性好,无显著性差异(P>0.05)。A法在磁性微球基础上对制备冻干试剂、反应杯独立包装和双波长检测荧光信号进行改进;利用A法检测肿瘤标志物具有一定的临床应用价值。

微粒子荧光酶免疫分析法定量检测乙肝病毒e抗原

目的 :应用微粒子荧光酶免疫分析法 (MEIA)定量检测乙肝病毒 e抗原的浓度 ,以反映乙肝病毒感染的程度。方法 :收集 10 6例怀疑乙肝病人血清做乙肝 e抗原定量检测 ,阳性标本同时用荧光定量 PCR法检测 HBV- DNA。结果 :6 4例e抗原阳性标本的 e抗原浓度范围为 0 .49- 1146 6 .2 3 PEI U / m L ,其浓度的变化与 HBV- DNA浓度变化一致。结论 :MEIA法作乙肝

氟喹诺酮类药物免疫分析方法的研究进展

氟喹诺酮类药物具有广谱高效的优点,现已广泛用于预防和治疗动物的各种感染性疾病。然而,氟喹诺酮类药物长期大量的滥用,在食品中的残留超标,导致体内耐药病原菌的产生,引起人类的耐药性问题。因此,建立快速灵敏的氟喹诺酮类药物检测方法具有重要意义。免疫分析法具有高灵敏和低成本的优势,故受到食品安全领域的广泛关注。因此,该文对氟喹诺酮类药物的抗体制备、各种免疫分析方法(包括酶联免疫吸附法、免疫层析法、荧光免疫分析法和免疫传感器)的原理、特点和应用进行总结,并对氟喹诺酮类药物免疫分析方法的发展趋势进行了展望。

丙肝病毒抗体检测运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法的应用价值观察

研究分析时间分辨荧光分析法和酶联免疫法于丙肝病毒抗体检测中应用效果。方法 丙型肝炎行丙肝病毒抗体检测患者2022年1月至同年12月选取521例,运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法做丙肝病毒抗体检测,检测作用做比对分析。结果 时间分辨荧光分析法对于丙肝病毒抗体检出率与酶联免疫法丙肝病毒抗体检出率比对无差异(P>0.05),丙肝病毒抗体检出情况与金标准比对,时间分辨荧光分析法较酶联免疫法准确率、灵敏度较高,优于酶联免疫法(P<0.05)。结论 丙肝病毒抗体检测,时间分辨荧光分析法行检测,对于丙肝病毒抗体有较高,且检测精准度、灵敏度良好。

口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立

【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。

全自动酶标免疫分析仪的技术原理与故障案例分析

分析全自动酶标免疫分析仪的技术原理及典型故障案例,以提升全自动酶标免疫分析仪的使用效果。通过微粒子酶免疫分析(MEIA)技术完成酶免试验,以主定标、标准定标、定性定标及定标液修正为全自动酶标免疫分析仪的定标方式,提升酶免试验分析精度。通过分析全自动酶标免疫分析仪使用中遇到的洗板机、开机初始化报警、启动软盘、加样臂和滤光器等典型故障案例,提出故障解决应对措施,为全自动酶标免疫分析仪后期维修与管理提供参考。

磁微粒酶联免疫吸附法测定玉米中的伏马毒素B1

将磁微粒的偶联物替代酶标板作为固定相,用于酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测玉米中的伏马毒素B1（fumonisin B1,FB1）.在直接竞争ELISA反应中,分别引入羊抗兔抗体-磁微粒、蛋白A-磁微粒,并比较二者替代效果.通过对检测方法的优化,使用羊抗兔抗体、蛋白A与磁微粒的偶联物作为固定相的检出限分别为0.024μg/mL和0.030 μg/mL.羊抗兔抗体-磁微粒偶联物替代酶标板后具有更低的检出限,为常规ELISA法检测限的三分之一.玉米样品中FB1回收率范围在76.4％～110.6％之间,相对标准偏差小于11％.研究建立了一种灵敏度高、稳定性好的FB1检测方法.

化学发光微粒子免疫分析法、酶联免疫吸附法在丙肝病毒抗体检测中的应用对比观察

目的比较化学发光微粒子免疫分析(CMIA)法、酶联免疫吸附(ELISA)法在丙肝病毒抗体(HCV-Ab)检测中的应用效果。方法 190例疑似丙肝病毒感染者,收集空腹促凝血,分别采用CMIA法、ELISA法检测HCVAb,采用RFQ-RT-PCR检测HCV RNA。529例健康查体者,收集空腹促凝血,分别采用CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab。精密度试验分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的精密度,绘制浓度与S/CO曲线分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的灵敏度。特异度实验分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的特异度。根据719例份(190例疑似丙肝病毒感染者+529例健康查体者)空腹促凝血HCV-Ab检测结果,比较CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的阴性、阳性一致率及总一致率。结果 190例份疑似丙肝病毒感染者中,CMIA法检测HCV-Ab阳性、阴性分别为190、0例,ELISA法分别为145、45例。529例份健康查体者标本中CMIA法检测阳性、阴性分别为0、529例,ELISA法分别为156、563例。CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的批内精密度水平1分别为4. 70%±0. 27%、7. 11%±0. 90%(P <0. 05),水平2分别为19. 10%±0. 59%、22. 08%±2. 22%(P <0. 05),CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的批间精密度水平1分别为4. 64%±0. 16%、6. 71%±0. 81%(P <0. 05),水平2分别为19. 11%±0. 48%、21. 39%±1. 67%(P <0. 05)。CMIA法检测HCV-Ab的灵敏度高于ELISA法(P <0. 05)。CMIA法与ELISA法检测HCV-Ab阴性一致率为97. 92%,阳性一致率为72. 32%,总一致率为92. 21%,两者一致率比较,χ2=4. 400,P <0. 05;CMIA与ELISA法HCV RNA检测阳性率分别为54. 21%和46. 32%,CMIA法的HCV RNA检测阳性率高于ELISA法(χ2=51. 045,P <0. 05)。结论与ELISA法比较,CMIA法测定HCV-Ab的精密度、灵敏度、特异度、阳性预测值均较高。

微粒子酶联免疫分析法与化学发光微粒子免疫法在检测甲肝病毒抗体IgM中的比较

目的比较微粒子酶联免疫分析法（MEIA）与化学发光微粒子免疫法（CMIA）检测甲型肝炎病毒（HAV）抗体IgM。方法对中日友好医院349份门诊或体检患者血清（包括10份含干扰物质的血清），同时用MEIA和CMIA进行甲肝病毒抗体IgM检测，结果进行卡方检验统计。结果MEIA和CMIA检测的349份标本，两者之间阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为100％，一致性高，统计学上无差异。同时干扰实验显示：RF因子、高血脂、重度溶血、黄疸及急性乙肝感染（HBc—IgM抗体阳性）对甲型肝炎病毒抗体IgM检测无明显影响。结论MEIA法检测HAV抗体IgM与已荻认可批准上市的CMIA法具有临床等效性，可以用于HAV抗体IgM的检测，为临床甲型肝炎感染提供诊断依据。

酶增强免疫分析法与微粒子酶联免疫吸附法检测他克莫司药物浓度的结果对比研究

目的对酶增强免疫分析法(EMIT)与微粒子酶联免疫吸附法(MEIA)进行比对实验,评估SYVAViva-E临床化学分析仪(简称SYVA Viva-E)和Abbott IMX分析仪(简称Abbott IMX)2种检测系统测定他克莫司(FK506)药物浓度的一致性。方法将Tac/Csa CONTROL质控品分别用SYVA Viva-E(EMIT)和Abbott IMX(MEIA)进行批内、批间精密度测定。FK506的靶值(检测范围):A1水平为4.3(2.1～6.5)ng/mL、A2水平为8.9(5.3～12.5)ng/mL、A3水平为18.0(14.0～22.0)ng/mL。将158份临床患者样本分为极低浓度(0.1～<2.0 ng/mL)、低浓度(2.0～<8.0 ng/mL)、中浓度(8.0～<14.0 ng/mL)、高浓度(14.0～<20.0 ng/mL)和极高浓度(20.0～24.0 ng/mL)5个组,用SYVA Viva-E和Abbott IMX平行测定FK506浓度,观察2种检测系统测定临床样本的相关性。结果当FK506浓度处于A1水平时,SYVA Viva-E的批内、批间精密度及检测结果均值均高于Abbott IMX(P<0.05);处于A2、A3水平时,2种检测系统批内、批间精密度及检测结果均值相近,差异无统计学意义(P>0.05)。Abbott IMX的检测精密度优于SYVA Viva-E。当临床样本浓度<8.0 ng/mL时,SYVAViva-E检测结果的均值比Abbott IMX约高1.0 ng/mL,二者比较差异有统计学意义(P<0.01),与测定质控品的结果一致;当样本浓度≥8.0 ng/mL时,SYVA Viva-E检测结果的均值与Abbott IMX相近,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。2种检测系统测定临床样本的总体相关性较好(r=0.977),但SYVA Viva-E检测结果均略高于Abbott IMX。结论应用EMIT检测FK506时,其检测结果略高于MEIA,尤其在低浓度范围更加明显。2种检测系统在检测FK506浓度时可能存在系统偏差。

化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝表面抗原的比较

目的比较化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)与酶联免疫法(ELISA)两种方法检测乙肝表面抗原灵的敏度。方法采用酶联免疫法测定经化学发光微粒子免疫分析法筛选的低浓度HBsAg阳性患者血清标本107例。同时采用上述两种方法对福建省临检中心提供的不同浓度HBsAg质控品进行测定,比较分析两种方法的灵敏度。结果CMIA法测定灵敏度为0.05 IU/ml,ELISA法测定灵敏度为0.25 IU/ml。107例CMIA法检测阳性标本中ELISA法检出阳性88例。结论CMIA法的检测性能大大优于ELISA法,尤其是对低浓度的HBsAg检测,能最大程度地减少假阴性结果。

化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫吸附法检测血清乙型肝炎表面抗体的比对

乙型肝炎表面抗体（HBs Ab）由乙型肝炎表面抗原（HBs Ag）诱导产生,在乙肝病毒（HBV）感染恢复期或接种乙肝疫苗后出现,是机体对HBV感染产生特异性免疫的标志。自20世纪70年代以来,众多方法应用于血清HBs Ab的检测,其中酶联免疫吸附法（ELISA）应用最广泛,随着近年来中国检验技术的进步,化学发光法也逐步被中国市场推广。

酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb的比较

目的:用酶联免疫吸附法(ELISA)和微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测接种乙肝疫苗后儿童的HBsAb,并对结果进行比较。方法:用美国雅培AXSYM免疫发光仪(MEIA法)定量测定HBsAb,ELISA法定性测定HBsAb。结果:在232份标本中,MEIA法检出HBsAb阳性185份,阳性率79.74%;ELISA法检出阳性165份,阳性率71.12%。MEIA法与ELISA法相比阳性符合率为91.38%。两种方法阳性率经χ2检验,存在显著性差异(χ2=18.5,P<0.01),且MEIA法测定HBsAb浓度13.9 IU/L时,ELISA法为阴性。结论:MEIA法定量检测HBsAb的阳性率高于ELISA法,且MEIA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,可作为乙肝疫苗接种后判断免疫效果的良好方法,还可根据HBsAb浓度的变化确定需要再次免疫的时间。

全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪使用中应注意的几点要素

我院检验科于2008年5月购置一台产自日本东曹株式会社的全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪AIA360,用于肿瘤标志物、甲状腺激素、性腺激素、糖尿病、心脏关联标志物、传染病等系列近30个项目的检测。经过3年多来的临床实验使用，收到了良好的效果，为了尽量减少实验操作中的各种误差，提高检测效率和结果的准确性。通过几年来的实践经验，总结出使用全自动荧光磁微粒酶联免疫分析仪AIA360应注意的几点要素，供同道们参考。

甲状腺过氧化物酶抗体间接时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用

目的建立甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体间接时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）。方法用TPO抗原包板,用铕（Eu^3＋）标记兔抗人IgG做标记物,建立检测人血清TPO抗体的间接TRFIA。结果TPO抗体-TRFIA的敏感性为1.0 IU/mL;线性范围达1 000 IU/mL;批内变异系数（CV）为3.1%-3.6%,批间CV为3.3%-3.6%;平均回收率为98.89%;与电化学发光分析法（ECLIA）比对,相关系数达0.983 2;与临床诊断高度相关。结论本研究建立的TPO抗体-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测方法,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

全自动荧光酶免疫分析仪-国标法检测水产品中单核细胞增生李斯特氏菌的研究

目的:寻找一种快速简便,准确度高,特异性强的单核细胞增生李斯特菌检验方法。方法:采用全自动荧光酶免疫分析仪(miniVIDAS)和国标法相结合,能在48 h内对样品进行快速筛选,对于阴性样品可以直接出具报告,对于阳性样品则根据国标法进一步确认。结果:对11种海产品以及单核细胞增生李斯特菌标准菌株进行检测,miniVIDAS法阳性样本为4个(包括单核细胞增生李斯特菌标准菌株),国标法确认后阳性样本为4个。结论:miniVIDAS和国标法相结合是一种很好的检测单核细胞增生李斯特菌的方法,检验周期短,准确度和特异性高。