荧光示踪法在沥青材料研究中的应用现状综述

荧光示踪法因能够通过荧光示踪剂标记沥青,帮助研究人员更加直观地观测到沥青的微观结构,从而广泛应用于沥青材料研究中。首先简要介绍了目前广泛应用的4类示踪剂的特点及其应用的主要领域;在此基础上,重点概述了荧光示踪法的原理及在沥青材料研究中常用的荧光示踪剂;接着总结了当下沥青荧光显微试样的制备方法并分析了各种方法的优点与不足;最后综述了荧光示踪法在新-旧沥青融合、沥青改性机理等方向的应用并提出了新型荧光示踪剂使用设想。该研究成果可为荧光示踪法在精确量化分析沥青微观性能方向提供新的研究思路。

染料示踪法联合荧光示踪法提高乳腺癌前哨淋巴结活检术成功率

背景近年来乳腺癌前哨淋巴结活检术(SLNB)愈来愈受到重视,而示踪剂的选择对于其成功率至关重要。目的评价染料示踪法联合荧光示踪法在乳腺癌SLNB中的临床有效性以及应用价值。方法选取2010年1月—2015年9月同济大学附属杨浦医院乳腺外科符合纳入标准的原发性浸润性乳腺癌患者449例为研究对象。采用随机数字表法将患者分成A组(226例,采用染料示踪法)和B组(223例,采用染料示踪法联合荧光示踪法)。收集患者一般资料〔包括年龄、体质指数(BMI)〕,计算各组患者SLNB成功率。将患者以BMI(≤22.5 kg/m2和>22.5 kg/m2)、年龄(≤55岁和>55岁)进行分层分析。结果 A组患者年龄、BMI小于B组(P<0.05)。223例BMI≤22.5kg/m2患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔94.7%(108/114)〕高于采用染料示踪法〔78.0%(85/109)〕〔OR=5.082,95%CI(1.988,12.993)〕。226例BMI>22.5 kg/m2患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔85.3%(93/109)〕高于采用染料示踪法〔63.2%(74/117)〕〔OR=3.378,95%CI(1.763,6.471)〕。不同BMI层之间同质(χ2BD=0.495,P=0.482)。去除BMI的混杂作用后,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率高于采用染料示踪法(χ2MH=25.979,P<0.001,ORMH=3.896)。244例≤55岁患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔92.6%(112/121)〕高于采用染料示踪法〔75.4%(94/123)〕〔OR=3.928,95%CI(1.731,8.515)〕。205例>55岁患者中,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率〔87.3%(89/102)〕高于采用染料示踪法〔63.1%(65/103)〕〔OR=4.002,95%CI(1.975,8.111)〕。不同年龄层之间同质(χ2BD=0.006,P=0.939)。去除年龄的混杂作用后,采用染料示踪法联合荧光示踪法SLNB成功率高于采用染料示踪法(χ2MH=26.686,P<0.001,ORMH=3.928)。Logistic回归分析结果显示,示踪法、BMI、年龄是SLNB结果的影响因素(P<0.05)。Logistic回归模型分类预测准确率为80.2%。结论染料示踪法联合荧光示踪法可有效提高乳腺癌SLNB成功率,值得临床推荐使用。

稀土元素铕荧光示踪法在食物链上的应用

首次报道稀土元素铕荧光示踪法在稻田生态系统食物链上的应用， 通过食物链各营 养级对铕的吸收与传递，运用荧光示踪法定量分析水稻—稻纵卷叶螟—蜘蛛为代表的食 物链的营养关系。结果表明：该法灵敏度高,准确性好,应用前景广。

吲哚菁绿荧光示踪法在进行前哨淋巴结活检术中的应用价值

目的:分析吲哚菁绿荧光示踪法在前哨淋巴结活检术(Sentinel Lymph Node Biopsy,SLNB)中的应用价值。方法:使用计算机检索Pubmed、EMbase、the Cochrane Library等数据库自建库之日起至2018年12月期间收录的有关前哨淋巴结活检术的文献资料。对数据库中的文献进行筛选后,使用RevMan 5.3软件对所选文献资料进行Meta分析。结果:最终纳入本次研究的文献共有16篇(包括2312例患者),其中,对照试验研究文献有2篇,前瞻性队列研究文献有14篇。上述16篇文献中的2312例患者分别采用核素标记物示踪法和吲哚菁绿荧光示踪法进行SLNB。按照所使用示踪剂的不同,将这2312例患者分为两个亚组,将采用吲哚菁绿荧光示踪法进行SLNB的患者作为试验组,将采用核素标记物示踪法进行SLNB的患者作为对照组。两个亚组患者前哨淋巴结的检出率无异质性(P=0.08,I2=62%),故采用固定效应模式对其前哨淋巴结的检出率进行Meta分析。进行Meta分析的结果显示,两个亚组患者乳腺癌前哨淋巴结的检出率相比,差异无统计学意义(OR=1.07,95%CI:0.46~2.44)。两个亚组患者前哨淋巴结的假阴性率无异质性(P=0.08,I2=62%),故采用固定效应模式对其前哨淋巴结的假阴性率进行Meta分析。进行Meta分析的结果显示,两个亚组患者前哨淋巴结的假阴性率相比,差异无统计学意义(OR=1.83,95%CI:0.26~12.88)。结论:吲哚菁绿荧光示踪法在进行前哨淋巴结活检术中具有较高的应用价值。

荧光示踪法在水库渗漏勘察中的应用

在高山峡谷的岩溶地区建设水库工程,岩溶渗漏问题是水库渗漏的主要问题,渗控处理是工程建设的重要工程地质问题之一。示踪试验用于初步查明岩溶系统发育特征并证明系统之间的连通性,可作为分析岩溶渗漏的重要技术手段。本次试验选用萤光素为示踪剂,采用国产F96C型荧光分光光度计作为检测仪器,在KS4地下水出口成功检测到最低含量为0. 7PPb的荧光素示踪剂。根据示踪试验结果,以KS4示踪曲线为例,解译了上坝洼地—KS4的流场类型为存在额外输出型,该系统上游区为管道流场、下游区为脉管并联溶隙流场,经过建设施工进一步证实KS4系统的存在,经过地下工程开挖对KS4系统的探测,发现该系统平面上分别有东北支和南支两条支脉,证明前期流场类型与结构的解译基本上正确,说明荧光示踪法的有效性,在岩溶高原水库中可以作为水库建设前期调研的一种廉价、有效示踪手段,广泛使用。

荧光示踪法在应急支援护士个人防护装备培训中的应用研究

目的探究荧光示踪法在护士个人防护装备培训中的应用效果。方法采用荧光示踪法联合传统培训方法对疫情期间抽组的200名应急支援队护士进行个人防护装备培训,并进行理论与操作的考核。结果应用荧光示踪法培训后应急支援队护士的理论考核全部合格,操作考核成绩优于应用前,穿脱个人防护装备时间均缩短(P<0.01)。结论荧光示踪法应用于护士个人防护装备培训,有助于护士快速正确掌握个人防护装备穿脱操作技能,提高效率。

ICG荧光示踪法联合亚甲蓝染色在乳腺癌患者前哨淋巴结活检中的应用价值

目的探讨乳腺癌患者前哨淋巴结活检(SLNB)中应用吲哚菁绿(ICG)荧光示踪法联合亚甲蓝染色的临床价值。方法选择118例乳腺癌患者,以随机数字表法分为2组,对照组、观察组各59例。2组均进行SLNB,术中对照组使用亚甲蓝染色法,观察组使用ICG荧光示踪法联合亚甲蓝染色。比较2组SLN检出情况及血压下降、注射部位感染、坏死、发热等并发症发生情况。结果观察组示踪成功率为98.31%(58/59),高于对照组的86.44%(51/59),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组共检出246枚SLN,每位患者平均检出(4.17±0.36)枚;对照组共检出162枚SLN,每位患者平均检出(2.75±0.32)枚;组间对比差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者术后均未发生明显并发症。结论与单用亚甲蓝染色相比,联合ICG荧光示踪法在乳腺癌患者SLNB中的应用效果更佳,其示踪成功率更高,检出数量更多,临床应用价值较高。

荧光示踪和蓝染法在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用

目的探讨荧光示踪法和蓝染法在乳腺癌患者中进行前哨淋巴结活检的应用价值。方法 80例无明显腋窝淋巴结肿大的乳腺癌患者分别采用荧光示踪法和蓝染法进行标记,均按常规行前哨淋巴结活检术,并且行腋窝清扫,全部组织送石蜡切片病理检查,根据术后病理结果 ,对比两种方法的前哨淋巴结检出率、假阴性率、平均前哨淋巴结检出数,并记录所有患者平均手术时间。结果荧光示踪法前哨淋巴结检出率为97.5%,明显高于蓝染法的88.8%,差异具有统计学意义(P<0.05)。病理结果显示腋窝淋巴结癌转移的有25例,其中荧光示踪法漏诊1例,蓝染法漏诊6例,即荧光示踪法假阴性率为4.0%,明显低于蓝染法的24.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光示踪法患者平均前哨淋巴结检出数为(3.5±0.8)枚,明显多于蓝染法的(2.6±0.6)枚,差异具有统计学意义(P<0.05)。本组患者平均手术时间(30.90±10.61)min。结论荧光示踪法和蓝染法应用于乳腺癌前哨淋巴结活检术具有良好示踪效果,其中荧光示踪法具有更高的前哨淋巴结检出率和检出数,假阴性率低,更具有应用价值,值得临床推广。

荧光示踪法在cN0期甲状腺乳头状癌的临床应用研究

目的探讨荧光法在示踪c N0期甲状腺乳头状癌患者前哨淋巴结（SLN）中的应用价值。方法收集2015年1月至2016年1月期间在笔者所在医院住院治疗的c T1~3N0M0甲状腺乳头状癌患者共40例,用吲哚菁绿（ICG）作为荧光示踪剂,通过术中冰冻病理学检查及术后石蜡病理学检查,观察并检出SLN,分析ICG示踪SLN的作用和前哨淋巴结活检（SLNB）对颈部中央区淋巴结清扫的指导作用。结果 40例甲状腺癌患者均行SLNB后再做中央区淋巴结清扫,有37例检出SLN,其检出率为92.5%（37/40）,共检出SLN 98枚,1~5枚/例,平均2.65枚/例。术中冰冻病理学检查示28例患者SLN有癌转移,9例患者SLN无癌转移,其中有1例术中检测SLN无癌转移的患者,术后石蜡病理学检查检测出微转移,其余8例术后病理学检查结果提示中央区淋巴结未见癌转移。3例未检出SLN者中央区淋巴结无癌转移。ICG荧光示踪法行SLNB的灵敏度为96.6%（28/29）,假阴性率为3.45%（1/29）。结论荧光示踪法检测甲状腺癌的SLN,具有检出率高及灵敏度高的优势,能较为准确地对c N0期甲状腺癌患者的颈部中央区淋巴结清扫进行指导。

荧光物示踪法定量测定水稻-叶蝉-蜘蛛食物链的营养关系

首次采用稀土元素铕荧光物示踪法 ,对水稻 -叶蝉 -蜘蛛这一食物链营养关系进行了初步的定量测试。结果表明 ,所选用的稀土元素铕可以通过该食物链而传递 ,证明铕用于食物链营养关系定量分析是可行的 ;早稻孕穗期、晚稻分蘖期施铕 7d后 ,其含铕量均表现为叶片 >茎及叶鞘 ;根据叶蝉取食水稻后测定的含铕量和叶蝉体重的不同进行折算 ,每 1 0 0头叶蝉每天可取食水稻 0 .71～ 1 .1 3g;根据拟水狼蛛、锥腹肖蛸、食虫沟瘤蛛捕食叶蝉后含铕量计算 ,每头拟水狼蛛、锥腹肖蛸、食虫沟瘤蛛平均每天捕食叶蝉分别为 4 .6 3头、2 .81头、1 .0头。捕食能力 :拟水狼蛛 >锥腹肖蛸 >食虫沟瘤蛛。

不同示踪剂在乳腺癌新辅助化疗后前哨淋巴结活检中的应用

目的:比较不同示踪剂在乳腺癌新辅助化疗后前哨淋巴结活检中的应用效果。方法:选择2018年8月至2022年9月来惠州市中心人民医院接受治疗的142例乳腺癌患者作为研究对象。患者均接受新辅助化疗,后分别采用亚甲蓝染色法和吲哚菁绿荧光示踪法检测,再行前哨淋巴结活检。根据前哨淋巴结检出情况分为A组(仅有蓝染的淋巴结)、B组(仅有荧光显影的淋巴结)以及C组(有蓝染或荧光显影的淋巴结),以病理检查结果为标准,比较各组间的前哨淋巴结检出情况,并计算三组的灵敏度、特异度、阳性率、假阴性率以及准确度。结果:B、C两组的平均淋巴结检出数均高于A组,差异均具有统计学意义(P<0.05);B、C两组间的平均淋巴结检出数比较,差异无统计学意义(P>0.05);B、C两组的前哨淋巴结灵敏度、特异度、阳性率以及特异度均高于A组,假阴性率均低于A组,差异均具有统计学意义(P<0.05);B、C两组间各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:吲哚菁绿荧光联合亚甲蓝染色法可提高乳腺癌患者新辅助化疗后的前哨淋巴结检出个数以及阳性率,但其与单独使用吲哚菁绿荧光标记效果相当,建议临床上对前哨淋巴结活检首选吲哚菁绿荧光示踪。

浅谈各类示踪法在排水管道探测中的应用

目前排水管道由于材质问题无法采用常用的电磁感应法进行探测,就需要采用各类示踪法,为此根据大量的实验,汇总了性价比比较高的几种方法,能有效地查明排水管道连通问题。

一种快速可靠筛选作用于细胞缝隙连接药物的方法建立

目的建立一种可以快速有效地筛选能影响细胞缝隙连接(gap junction,GJ)功能药物的方法;为研制以GJ为靶点的新型药物提供技术手段。方法构建能同时双向表达两种不同连接蛋白(connexins,Cxs)的质粒;用能表达Cx26/Cx32的质粒转染HeLa细胞,建立可以稳定表达Cx26/Cx32并形成异质性GJ的HeLa细胞模型。用荧光传递示踪法测定荧光示踪剂在细胞之间的传递,以此反映GJ的功能。观察公认的GJ激活剂——维甲酸(retinoid acid,RA)和GJ抑制剂——油酸酰胺(oleamide)对GJ功能的影响,检验该方法是否能够准确地检测出GJ功能。结果 Western blot和荧光传递示踪法的结果表明,转染含有Cx26/Cx32 cDNA质粒的HeLa细胞,可以稳定表达Cx26/Cx32;并能够形成可以传递荧光示踪剂在相邻细胞间的GJ。RA和油酸酰胺能分别增强和抑制荧光示踪剂的传递。结论在转染Cx26/Cx32质粒并稳定表达Cxs的HeLa细胞上,用荧光传递示踪法测定GJ功能,可以快速准确地检测出药物对GJ的作用。该方法的建立为筛选作用于GJ的药物提供了一种有用的技术手段。

斜管中异质固体颗粒运动规律实时观测

为实现对斜管中陶瓷球与生物质半焦两种异质固体颗粒运动规律的实时观测,设计了一套倾斜角度45°的斜管试验装置,运用荧光示踪法和PIV技术对管径60 mm的斜管中粒径2 mm的陶瓷球颗粒和生物质半焦颗粒在3种不同质量比例(10∶1、30∶1和50∶1)、同一位置截面(X=690 mm)颗粒轴向时均速度分布特性进行了实时观测。试验结果表明,两种异质固体颗粒主要分布在管道中心平面以下,此位置的陶瓷球速度远大于生物质半焦颗粒的速度;管道中心轴线以上,陶瓷球颗粒数目急剧减少,而生物质半焦颗粒也大多是质轻和粒径较小的,且受管壁粘滞作用力影响较大,导致二者速度相差不大;同时证明利用荧光示踪法实时观测陶瓷球颗粒运动规律是可行的。

吲哚菁绿荧光导航联合亚甲蓝示踪在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用

目的评估吲哚菁绿(indocyaninegreen,ICG)荧光导航技术联合亚甲蓝染色法应用于早期乳腺癌前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy,SLNB)的有效性及安全性。方法选取2017年5月至8月期间收治于大连医科大学附属第一医院的65例经空芯针穿刺活检确诊的浸润性乳腺癌患者,在行乳房全切或保乳手术前均以ICG及亚甲蓝作为示踪剂进行SLNB,分别统计荧光法、亚甲蓝染色法及亚甲蓝联合荧光法所检出的前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)个数,并计算和比较3种方法SLN的检出率、准确率、灵敏度以及假阴性率有无差异。结果荧光法及亚甲蓝联合荧光法的前哨淋巴结平均检出个数均高于亚甲蓝染色法(P=0.010,P<0.001),并且使用亚甲蓝联合荧光法的前哨淋巴结检出率显著高于亚甲蓝染色法(100%vs.87.69%,P<0.001),但其假阴性率与亚甲蓝染色法相比并无统计学差异(15.38%vs.0,P=0.316)。结论ICG荧光示踪法联合亚甲蓝染色法行乳腺癌SLNB相对于亚甲蓝染色法有检出率高、SLNs平均检出个数多、淋巴管实时显像等优势,是安全、有效的SLNB的新方法。

热再生沥青混合料RAP分散情况的多尺度分析

沥青混合料回收料(RAP)在热再生沥青混合料(RHMA)中的分散情况会影响沥青路面的路用性能及耐久性。为探明热拌过程中RAP在RHMA中的分散情况,采用磁铁矿作为探针集料代替部分再生沥青混合料中新集料,结合抽提与旋转蒸发法获取了不同热拌时间下的融合沥青。在此基础上,采用流变试验、傅里叶红外光谱试验、凝胶渗透色谱试验、原子力显微镜试验分析了不同热拌时间情况下融合沥青的性能、组成以及微观形貌。通过荧光示踪法以及图像分析法探究了不同热拌时间下RAP在RHMA中的分散情况。结果表明:RHMA中融合沥青的复数剪切模量、弯曲蠕变劲度随拌和时间的增加而增加,蠕变速率则反之;融合沥青中羰基、亚砜基以及大分子含量与拌和时间呈正比;融合沥青“蜂状”结构的密度随拌和时间的增加而减小,平均“蜂状”结构面积则反之,因此,随着拌和时间的增加,RAP中老化沥青与新沥青之间的融合程度显著提高;随着拌和时间的增加,RAP中团聚颗粒在拌和过程中逐渐被破坏,进一步增加了RAP与新沥青、新集料之间的接触面积,促进了RAP表面老化沥青与新沥青之间的融合,加剧了融合沥青的老化程度。工程中,为保障RHMA的生产质量以及使用耐久性,建议在考虑经济与环境效益的基础上适当延长RHMA的拌和时间。

头花蓼对幽门螺旋杆菌相关性胃炎的细胞间隙连接通讯功能的影响

目的探讨头花蓼对幽门螺旋杆菌相关性胃炎的胃黏膜上皮细胞株-GES-1细胞间隙连接通讯功能的影响。方法采用划痕标记荧光染料示踪技术检测不同比例(幽门螺旋杆菌与细胞之比为25∶1,50∶1,100∶1)的幽门螺旋杆菌数对胃黏膜上皮细胞株-GES-1细胞作用24h后间隙连接通讯功能的影响。构建幽门螺旋杆菌相关性胃炎(Helicobacter pylori-associated gastritis,HPAG)细胞模型基础上,采用划痕标记荧光染料示踪技术检测不同浓度的头花蓼(8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL、64μg/mL)作用24h后对幽门螺旋杆菌相关性胃炎的细胞间隙连接通讯功能的影响。结果 (1)通过划痕标记荧光染料示踪技术检测结果表明细菌与细胞之比为50∶1作用24h时,减弱了胃黏膜上皮细胞株-GES-1细胞间隙连接通讯功能(P<0.05);(2)通过划痕标记荧光染料示踪技术检测结果表明头花蓼(64μg/mL)作用24h改善了幽门螺旋杆菌相关性胃炎细胞模型的细胞连接通讯功能(P<0.05)。结论头花蓼(64μg/mL)作用24h改善了幽门螺旋杆菌相关性胃炎细胞模型的细胞连接通讯功能,为头花蓼对H.pylori相关性胃炎的抗菌、抗炎机制奠定了实验基础。