直接荧光组化法检测激素受体方法改进的探讨

直接荧光组化法检测激素受体方法改进的探讨成孃，姚先莹华西医科大学病理教研室用直接荧光组化法检测激素受体一直采用新鲜标本，于送检当天完成实验。本文通过７例乳腺癌雌激素受体过夜与不过夜对比实验，发现差异较小。这不仅给技术工作者带来较大方便，也为更多的病人...

雌激素受体和孕激素受体与喉癌关系的探讨

本文采用荧光组织化学法,对25例喉癌患者进行雌、孕激素受体检测,结果发现雌激素受体阳性12例占48%,孕激素受体阳性17例占68%,受体水平与喉癌分化程度有关,分化程度越低,受体含量越少。研究表明:喉癌细胞存在有雌、孕激素受体,性激素受体与喉癌发病可能有关。

毛发疾病

941577 正常人体多毛部位皮肤雌激素受体的比较研究/周光平…//临床皮肤科杂志。-1994,23(2).-71～73 对10例毛发分布正常的健康男性头皮、眉部、胡须、腋部、阴部皮肤应用直接荧光组织化学法检测雌激素受体(ER)。结果:表皮细胞、毛囊外毛根鞘及少数内毛根鞘、皮脂腺、大小汗腺、立毛肌、真皮纤维母细胞。

MMP14在胰腺癌中的表达及其与肿瘤免疫微环境特征的相关性研究

目的·探究基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase 14,MMP14)在胰腺癌组织中的表达及其与临床特征的相关性,并分析其与胰腺癌肿瘤免疫微环境特征的相关性。方法·通过GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据平台分析MMP家族成员在30种常见肿瘤组织中的表达情况。通过R语言整合GTEx(Genotype-Tissue Expression)数据库中167例胰腺正常组织和TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中178例胰腺癌组织及4例配对癌旁组织的转录组数据,比较MMP14在胰腺癌与正常组织及癌旁组织中的表达差异。使用GEPIA数据平台对不同MMP14表达水平胰腺癌患者进行生存分析。从TCGA数据库中下载178例胰腺癌患者的相关临床信息,应用Perl和R语言分析MMP14的表达与临床特征的相关性。应用R语言和GSEA v3.0进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析和基因本体论(Gene Ontology,GO)功能富集分析。采用CIBERSORT反卷积算法计算胰腺癌免疫微环境中各类免疫细胞亚群比例,分析MMP14的表达与各免疫细胞亚群比例的相关性。收集6例新鲜胰腺癌组织和配对癌旁组织,流式细胞术检测各类免疫细胞亚群;通过t-SNE降维与统计学分析,描述胰腺癌免疫微环境的特征。利用胰腺癌组织芯片进行多色荧光免疫组织化学实验,检测MMP14的表达与免疫细胞亚群的比例,验证生物信息学分析结果。结果·在生物信息学数据库中,与MMP家族其他成员相比,MMP14在多种肿瘤中高表达,且胰腺癌中MMP14的表达水平高于其他肿瘤;MMP14在胰腺癌中表达水平显著高于胰腺正常组织和癌旁组织(P=0.000),TNM分期Ⅱ期肿瘤MMP14表达水平显著高于Ⅰ期(P=0.012),病理组织学分级G2和G3期肿瘤MMP14显著高于G1期(均P=0.000)。MMP14低表达组患者生存预后显著优于高表达组(P=0.033)。KEGG和GO分析结果显示MMP14主要富集在胰腺癌和免疫相关通路。MMP14的表达水平与CD8+T细胞、单核细胞的比例呈负相关(均P<0.05),与巨噬细胞的比例呈正相关(P=0.000)。流式细胞实验结果提示胰腺癌肿瘤微环境呈现免疫抑制性。多色荧光免疫组织化学实验结果显示,MMP14在肿瘤组织中表达水平显著高于癌旁组织(P=0.000),TNM分期较晚及病理组织学分级较高的肿瘤MMP14的表达水平也相对较高(均P<0.05)。在MMP14高表达的肿瘤组织中,CD8+T细胞比例降低(P=0.001),巨噬细胞比例升高(P=0.000),与生物信息学分析结果一致。结论·与正常胰腺组织和癌旁组织相比,MMP14在胰腺癌中的表达显著升高且与患者不良预后相关;MMP14高表达的胰腺癌组织中CD8+T细胞比例降低,巨噬细胞比例升高;高表达MMP14的胰腺癌肿瘤微环境呈现高度免疫抑制性。

二氧化硅致肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的改变

目的 研究SiO2 刺激肺泡巨噬细胞 (PAM)培养基上清液对肺成纤维细胞连接蛋白Cx43定位的影响 ,以深入探索SiO2 抑制肺成纤维细胞间隙连接通讯 (GJIC)的作用水平。方法 用0～ 5 0 0 μg/mlSiO2 刺激PAM和佛波酯 (TPA)诱导分化的THP 1(TPA primedTHP 1,pTHP 1)细胞 (具有PAM特性的人血单核细胞株 )的培养上清液对培养的中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)作用 2 4h ,采用间接免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦扫描显微镜 (LCSM)进行连接蛋白Cx43定位的测定。结果 正常对照组相邻细胞连接处有明亮的斑片状标记 ,聚集分布连接成线 ;SiO2 刺激PAM和pTHP 1细胞培养上清液作用的CHL细胞连接处标记斑点逐渐减少 ,Cx43蛋白标记斑点出现在胞浆内 ,呈无特异性定位状态 ;随着SiO2 剂量的增加 ,细胞内Cx43蛋白标记斑点向细胞核聚集。结论 SiO2 刺激PAM和pTHP 1细胞培养上清液可以改变肺成纤维细胞Cx43蛋白的定位。

异基因造血干细胞移植后长期生存患者CMV 感染的监测

目的：分析异基因造血干细胞移植（ allo-HSCT）后长期生存患者巨细胞病毒（ CMV）感染的状况及危险因素。方法对2008年1月至2011年12月期间在浙江大学附属第一医院进行allo-HSCT的患者应用免疫荧光组织化学法定期监测患者的外周血CMV被膜蛋白（ CMV-pp65）抗原，应用更昔洛韦或磷甲酸钠预防及治疗CMV感染；选择allo-HSCT后存活1年及以上患者共159例，对其临床资料进行回顾性分析。结果159例患者，均为allo-HSCT后长期生存的患者，移植后时间为18～66个月，共检测8047份外周血标本，其中有2553份为阳性。所有患者移植后均有CMV-pp65抗原血症阳性史，移植前、移植后100 d内、第100天到1年以内患者CMV抗原血症阳性率逐渐上升，1年后阳性率逐渐下降，差异有统计学意义（均P＜0．01）。清髓性预处理allo-HSCT患者移植后CMV抗原血症阳性率高于非清髓性预处理患者[32．1％（2386/7439）比27．5％（167/608），P＝0．019]。是否合并有急、慢性移植物抗宿主病（ GVHD）患者间CMV抗原血症阳性率的差异均无统计学意义（均P＞0．05），但Ⅲ～Ⅳ度急性GVHD患者的CMV抗原血症阳性率高于Ⅰ～Ⅱ度患者[35．4％（227/641）比31．0％（1017/3284），P＝0．027]。预处理未应用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）患者移植后CMV抗原血症阳性率为高于应用ATG患者[33．4％（1255/3755）比30．2％（1298/4292）， P＝0．002]。 Logistic多因素分析均显示预处理中未应用ATG（OR＝1．174，95％CI：1．068～1．290，P＝0．001）及移植后合并Ⅲ～Ⅳ度急性GVHD（OR＝1．174，95％CI：0．681～0．958，P＝0．014）是移植后发生CMV抗原血症的独立危险因素。结论 allo-HSCT后定期监测CMV抗原有利于及时预防和治疗CMV感染。长期生存患者合并CMV感染可能与预处理方案的选择相关，与GVHD的发生无明显相关，但与急性GVHD的严重程度相关。