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山羊角膜缘干细胞荧光蛋白(Venus)细胞株的建立及角膜上皮植片构建
被引量:
1
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作者
殷吉庆
刘文强
+6 位作者
刘超
赵贵民
张翊华
刘维帅
华进联
窦忠英
雷安民
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1636-1644,共9页
角膜缘干细胞是角膜上皮更新与修复的来源,角膜上皮受损严重常会导致角膜盲。尽管近几年通过角膜缘干细胞移植术(LSCT)治愈角膜上皮受损的临床应用已被推广,但是对于角膜缘干细胞移植受损机体后的修复机理并不明确。为了实现角膜缘干细...
角膜缘干细胞是角膜上皮更新与修复的来源,角膜上皮受损严重常会导致角膜盲。尽管近几年通过角膜缘干细胞移植术(LSCT)治愈角膜上皮受损的临床应用已被推广,但是对于角膜缘干细胞移植受损机体后的修复机理并不明确。为了实现角膜缘干细胞移植后的活体追踪,使用G418筛选标记有Venus荧光蛋白的角膜缘干细胞株(GLSC-V),并以其为种子细胞接种于去上皮羊膜上,体外培养21d构建成荧光角膜上皮植片。荧光倒置显微镜下观察GLSC-V的细胞质和细胞核均有绿色荧光表达,在体外培养荧光至少持续3个月。免疫荧光检测GLSC-V细胞P63、Integrinβ1均呈阳性表达,对GLSC-V细胞及未转染的GLSCs进行半定量RT-PCR检测显示,两组细胞皆未表达终末分化角膜上皮细胞基因k3、k12,GLSC-V中p63及pcna较未转染组细胞略上调,venus强表达。经HE染色观察构建的人工角膜组织由5~6层上皮细胞组成,组织中上表皮细胞个数少、体积大且呈扁平状;基底部细胞密集、体积小且成立方状。经免疫荧光检测仅组织基底部最基层细胞表达P63,上表皮细胞不表达。该人工角膜与正常角膜上皮组织结构特性相似,可用于移植,为研究角膜缘干细胞修复严重受损角膜上皮机理奠定基础。
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关键词
角膜
缘干细胞
Venus
荧光
蛋白
去
上皮
羊膜
角膜
缘干细胞移
植
术
荧光角膜上皮植片
原文传递
题名
山羊角膜缘干细胞荧光蛋白(Venus)细胞株的建立及角膜上皮植片构建
被引量:
1
1
作者
殷吉庆
刘文强
刘超
赵贵民
张翊华
刘维帅
华进联
窦忠英
雷安民
机构
西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心
杨凌示范区医院病理科
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1636-1644,共9页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA02A133)资助~~
文摘
角膜缘干细胞是角膜上皮更新与修复的来源,角膜上皮受损严重常会导致角膜盲。尽管近几年通过角膜缘干细胞移植术(LSCT)治愈角膜上皮受损的临床应用已被推广,但是对于角膜缘干细胞移植受损机体后的修复机理并不明确。为了实现角膜缘干细胞移植后的活体追踪,使用G418筛选标记有Venus荧光蛋白的角膜缘干细胞株(GLSC-V),并以其为种子细胞接种于去上皮羊膜上,体外培养21d构建成荧光角膜上皮植片。荧光倒置显微镜下观察GLSC-V的细胞质和细胞核均有绿色荧光表达,在体外培养荧光至少持续3个月。免疫荧光检测GLSC-V细胞P63、Integrinβ1均呈阳性表达,对GLSC-V细胞及未转染的GLSCs进行半定量RT-PCR检测显示,两组细胞皆未表达终末分化角膜上皮细胞基因k3、k12,GLSC-V中p63及pcna较未转染组细胞略上调,venus强表达。经HE染色观察构建的人工角膜组织由5~6层上皮细胞组成,组织中上表皮细胞个数少、体积大且呈扁平状;基底部细胞密集、体积小且成立方状。经免疫荧光检测仅组织基底部最基层细胞表达P63,上表皮细胞不表达。该人工角膜与正常角膜上皮组织结构特性相似,可用于移植,为研究角膜缘干细胞修复严重受损角膜上皮机理奠定基础。
关键词
角膜
缘干细胞
Venus
荧光
蛋白
去
上皮
羊膜
角膜
缘干细胞移
植
术
荧光角膜上皮植片
Keywords
Limbal Stem Cell
Venus
denude amniotic membrane
LSCT
fluorescent corneal epithelium sheets
分类号
R779.6 [医药卫生—眼科]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
山羊角膜缘干细胞荧光蛋白(Venus)细胞株的建立及角膜上皮植片构建
殷吉庆
刘文强
刘超
赵贵民
张翊华
刘维帅
华进联
窦忠英
雷安民
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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