酶联荧光分析法测定血清肌钙蛋白Ⅰ的临床应用

心肌肌钙蛋白I（cTnI）免疫层析法检测的灵敏度低,放射免疫法和ELISA操作复杂、检测时间长,化学发光分析法（CLIA）技术要求高,均不易在急诊常规开展。

全自动荧光酶免疫分析仪-国标法检测水产品中单核细胞增生李斯特氏菌的研究

目的:寻找一种快速简便,准确度高,特异性强的单核细胞增生李斯特菌检验方法。方法:采用全自动荧光酶免疫分析仪(miniVIDAS)和国标法相结合,能在48 h内对样品进行快速筛选,对于阴性样品可以直接出具报告,对于阳性样品则根据国标法进一步确认。结果:对11种海产品以及单核细胞增生李斯特菌标准菌株进行检测,miniVIDAS法阳性样本为4个(包括单核细胞增生李斯特菌标准菌株),国标法确认后阳性样本为4个。结论:miniVIDAS和国标法相结合是一种很好的检测单核细胞增生李斯特菌的方法,检验周期短,准确度和特异性高。

微粒子荧光酶免疫分析法定量检测乙肝病毒e抗原

目的 :应用微粒子荧光酶免疫分析法 (MEIA)定量检测乙肝病毒 e抗原的浓度 ,以反映乙肝病毒感染的程度。方法 :收集 10 6例怀疑乙肝病人血清做乙肝 e抗原定量检测 ,阳性标本同时用荧光定量 PCR法检测 HBV- DNA。结果 :6 4例e抗原阳性标本的 e抗原浓度范围为 0 .49- 1146 6 .2 3 PEI U / m L ,其浓度的变化与 HBV- DNA浓度变化一致。结论 :MEIA法作乙肝

改良荧光磁微粒酶免分析法检测三种肿瘤标志物及应用

探讨利用改良荧光磁微粒酶免分析法(A法)检测三种肿瘤标志物及临床应用价值。本文用A法检测352份血清AFP、CEA和CA19-9水平,并与化学发光微粒免疫分析法(B法)比较。A法与B法检测结果相关性好,无显著性差异(P>0.05)。A法在磁性微球基础上对制备冻干试剂、反应杯独立包装和双波长检测荧光信号进行改进;利用A法检测肿瘤标志物具有一定的临床应用价值。

酶联荧光分析法测定血清心肌肌钙蛋白I

目的对酶联荧光分析法(ELFA)检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)进行方法学评价,并探讨其临床应用价值。方法系统研究ELFA法测定cTnI的精密度、灵敏度、线性范围、回收率、标准曲线的稳定性及干扰因素,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相比较。同时应用ELFA法测定50名正常人、62例非心肌梗死患者及53例急性心肌梗死(AMI)患者的血清cTnI水平。结果ELFA法检测cTnI的总CV值为2.58%～4.82%,分析灵敏度为0.05μg/L,线性范围0.1～50μg/L,稀释标本的平均回收率为101.2%,标准曲线至少可稳定14d。ELFA法(Y)与ELISA法(X)具有良好的相关性(Y=0.983X-0.148,r=0.996)。加入高浓度的胆红素、三酰甘油和血红蛋白对测定无显著性影响(P>0.05)。AMI患者血清cTnI[(18.6±4.8)μg/L]显著高于正常人[(0.068±0.014)μg/L]和非心肌梗死患者[(0.055±0.021)μg/L](P<0.01);cTnI诊断AMI的阈值为0.8μg/L,诊断敏感度、特异度、准确度分别为91.4%、93.8%、92.9%,阳性和阴性拟然比分别为14.6和0.09。结论ELFA法操作简便、结果准确可靠、自动化程度高,且检测快速,具有较高的精密度;cTnI是敏感、特异的心肌标志蛋白,适合在临床工作中推广应用。

hTERT转录调控区克隆及在人癌细胞的转录特异性分析

目的 通过克隆人癌细胞中端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因上游转录调控区并观察其在不同人癌细胞和正常细胞中的转录活性 ,探讨人hTERT基因在细胞癌变中的激活机制。方法 用PCR方法克隆HeLa和PG癌细胞hTERT基因转录调控区 ,并进行DNA序列测定 ;将转录调控区重组于荧光酶报告载体 ,瞬时转染人癌细胞HeLa、PG、2 93和正常人二倍体细胞 2BS后 ,测定荧光酶活性以确定调控区转录活性。结果 于人HeLa和PG癌细胞分别克隆hTERT基因转录起始点附近 6 36bp(- 5 31～ +90 )和 95 0bp(- 5 31～ +40 4 )的转录调节区 ,其序列与GenBank人hTERT启动子序列相同。将两转录调控区分别重组于荧光酶报告载体pGL2 ,得到pGL2 6 36和pGL2 95 0 ,并同时构建了pGL2 X(- 5 31～ - 2 72 )和pGL2 S (第一内含子区 )。瞬时转染细胞后发现 :pGL2 6 36和pGL2 95 0在癌细胞中的转录活性明显增高 ,而在人二倍体 2BS细胞中几无转录活性。重组体pGL2 S和pGL2 X在端粒酶阳性肿瘤细胞中的转录活性明显降低 ,pGL2 S的转录活性略高于pGL2 X。结论 人HeLa和PG癌细胞中hTERT转录调控区无基因突变并高度保存 ;hTERT调控区具有癌细胞特异性转录调节活性 ,表明hTERT转录水平的激活与端粒酶阳性及细胞癌变密切相关 ;hTERT上游 2

EB病毒急性感染的实验室血清学诊断方法研究

目的对化学发光免疫分析法（CLIA）测定EB病毒衣壳抗原Ig M（EBV-VCA Ig M）的结果进行方法学评价,并与酶联荧光分析法（ELFA）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）诊断EB病毒（EBV）急性感染的效能进行比较。方法选取2011年5月—2012年10月北京大学人民医院不明原因发热患者142例,对受试者使用分离胶真空采血管抽取静脉血3 ml,分离血清,采用CLIA、ELFA和ELISA检测EBV-VCA Ig M,比较3种方法诊断EBV急性感染的价值;并对CLIA进行方法学评价。结果 CLIA低、中和高值（分别为25.8、81.8、184.4 U/ml）血清标本批内变异系数（CV）分别为5.7%、3.9%和2.6%,批间CV分别为11.4%、5.4%和4.2%。理论值与实测值间的回归方程为Y=0.090 4＋1.005 2X,相关系数r=0.998（P〈0.001）,回收率为95.3%~104.8%;当标本中血红蛋白水平达8 g/L,三酰甘油达30 000 mg/L时,均不干扰CLIA。CLIA诊断EBV急性感染的灵敏度为94.2%,特异度为91.1%,Youden＇s指数为0.853;ELFA诊断EBV急性感染的灵敏度为82.7%,特异度为88.9%,Youden＇s指数为0.716,;ELISA诊断EBV急性感染的灵敏度为80.8%,特异度为91.1%,Youden＇s指数为0.719。CLIA诊断EBV急性感染ROC曲线下面积（AUC）为0.962〔SE=0.021,95%CI（0.920,1.004）〕;ELFA诊断EBV急性感染的AUC为0.960〔SE=0.015,95%CI（0.911,0.990）〕;ELISA诊断EBV急性感染的AUC为0.882〔SE=0.031,95%CI（0.823,0.942）〕。ROC曲线显示,CLIA诊断EBV急性感染的最佳诊断界值为41 U/ml,灵敏度为96.2%,特异度为99.7%,Youden＇s指数为0.959。结论 CLIA是目前测定EBV-VCA Ig M较灵敏的定量检测方法,优于ELFA和ELISA,适用于临床EBV感染的早期诊断。

新生儿甲状腺功能低下筛查分析

目的:探讨新生儿甲状腺功能低下(CH)的发病率。方法:采用酶免疫荧光分析法,对2 018例新生儿进行了促甲状腺激素(TSH)水平的检测。结果:检出TSH阳性1例,发病率为1/2 018,高于文献报道,这与标本量小有关。结论:早发现早治疗,可获得满意效果,对于减少我国残疾儿出生,提高人口素质有十分重要的意义。

酶联荧光分析法在HIV感染筛查中的应用

目的分析酶联荧光分析法(ELFA)检测艾滋病病毒(HIV)阳性反应样本与蛋白印迹试验(WB)确证结果的相关性,探讨ELFA在HIV感染筛查中的应用。方法回顾2014年6月至2016年3月,杭州市各筛查实验室上送样本中,ELFA检测HIV抗体阳性反应样本2 113例,HIVp24抗原阳性反应样本39例,用WB试验进行确证。比较ELFA阳性反应结果和WB确证结果的相关性,分析ELFA检测HIV抗体不同检测值对WB确证结果的预测性。结果 2 113例抗体阳性反应样本与WB试验结果符合率为98.25%(2 076例)。剔除46例无随访结果的样本,进一步讨论2 067例抗体阳性反应样本,ELFA法检测HIV抗体阳性预测值为97.92%(2 024例)。39例HIVp24抗原阳性反应样本首次WB确证36例(92.31%)为结果不确定,已随访的23例均确证为阳性。结论ELFA检测HIV抗体抗原结果直观,抗体阳性反应样本和WB确证试验有很好的相关性和预测性,是HIV抗体检测S/CO比值替代策略中一种较好的检测方法。

荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原临床应用

目的探讨荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原的临床应用价值。方法分别采用荧光磁微粒酶免疫分析法、放射免疫法检测208例恶性肿瘤患者血清癌胚抗原,并与手术组织病理结果进行对照,比较2种方法诊断恶性肿瘤的符合率。结果与手术组织病理结果进行对照,荧光磁微粒酶免疫分析法的符合率分别为69.6%、44.8%、46.8%、60.0%;放射免疫法的符合率分别为67.6%、48.3%、48.9%、56.7%;二者诊断恶性肿瘤的符合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论荧光磁微粒酶免疫分析法检测癌胚抗原对诊断恶性肿瘤有一定价值。

常规培养法和酶联荧光免疫分析法在测定空肠弯曲菌中的对比

目的运用常规培养法和酶联荧光免疫分析法对相同食品进行空肠弯曲菌检测,对所得结果进行对比分析。方法对市面上销售的150瓶装酸奶同时采用常规培养法和酶联荧光免疫分析法进行检测。结果采用常规培养法检测出空肠弯曲菌3瓶,其阳性率为2.0%;采用酶联荧光免疫分析法检测出空肠弯曲菌7瓶,其阳性率为4.7%。结论酶联荧光免疫分析法的检出率较高,且方法操作简单、省时,建议有条件的检测机构尽量采用酶联荧光免疫分析法对空肠弯曲菌进行检测。

重组人胰高血糖素样多肽-1(7-36)在健康人体的药代动力学

目的研究重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]（促胰岛素生成药）在健康志愿者的药代动力学.方法选择12,9名健康志愿者,分别单次（0.1,0.15,0.2 mg）和多次（0.2 mg）皮下注射rhGLP-1（7-36）,连续5日,用荧光酶联免疫分析法测定其血药浓度,用DAS软件计算其药代动力学参数.结果单次：药-时曲线符合一房室模型,Cmax、AUC0-t随剂量增加而增加,tmax约为19～21 min,ti/2为10～14min.多次：首次与末次给药后的Cmax分别为（726.76±94.07）,（737.15±72.12）ng·L-1;tmax为18min左右;t1/2为15～17 min.结论在0.1～0.2 mg内,过程呈一级线性动力学特征,体内无蓄积,耐受性较好.

儿童总免疫球蛋白E和特异性免疫球蛋白E临床可报告范围建立的研究

目的建立儿童荧光酶联免疫分析法检测总免疫球蛋白E(tIgE)和特异性免疫球蛋白E(sIgE)的临床可报告范围。方法收集儿童tIgE和sIgE血清样本12例,参考中国合格评定国家认可委员会(CNAS)和美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件,在荧光免疫分析仪上进行tIgE和sIgE的分析测量范围(AMR)验证试验,建立其临床可报告范围(CRR)。结果tIgE的AMR为3~4788kU/L,最大允许稀释倍数为50倍,CRR为3~239400kU/L。sIgE的AMR为0.01~92.97kUA/L,不能进行稀释,CRR为0.01~92.97kUA/L。结论儿童tIgE和sIgE临床可报告范围的建立,对于高值病例的动态监测和病例间比较有重要意义,tIgE能够满足临床需求。

疑似HIV感染者样本抗体筛查蛋白印迹试验及核酸检测结果分析

目的分析HIV WB结果不确定或阴性的疑似HIV感染样本中不同检测方法的检出能力。方法回顾性分析2018年1月至2019年12月期间75例WB结果为不确定或阴性的疑似HIV感染样本,依据核酸检测和抗体随访结果最终判定受检者的HIV感染状态。样本先使用HIV抗体ELISA、HIV抗体快速检测法(RT)、HIV抗体胶体硒法(CS)和HIV抗原/抗体酶联荧光分析法(ELFA)进行筛查和复核试验,再进行WB抗体补充试验和HIV核酸检测。分析不同筛查方法对疑似HIV感染者的检出水平,并分析WB不确定结果中条带分布及p24抗原/抗体与HIV感染状况之间的相关性。结果本研究中纳入的75例疑似HIV感染样本中最终确证38例HIV感染,37例HIV未感染;35例受检者样本筛查试验和复核试验检测结果均呈反应性时,最终确证33例HIV感染者。21例ELFA法HIV抗原有反应样本,HIV核酸检测结果均阳性,而WB检测结果不确定有19例,阴性2例;47例ELFA法仅抗体有反应样本中,HIV核酸阳性15例,阴性32例,而HIV WB不确定38例,阴性9例;对62例WB不确定条带分析显示仅有1个条带的确证HIV感染阳性率占5/26;2个条带中确证HIV感染阳性率占25/30;而出现3个条带的确证HIV感染阳性率为6/6。结论对疑似HIV感染者样本进行检测时WB出现不确定结果时若条带数越多,提示HIV感染的风险越大。对疑似HIV感染者,即使HIV WB结果为抗体阴性,建议结合HIV筛查试验检测结果或进一步做p24抗原检测或HIV核酸检测,以免出现漏检。