荧光酶法测定大鼠附睾精子ATP含量

参照ＬＫＢ公司新的ＡＴＰ测定法，测定了大鼠附睾精子ＡＴＰ含量，并比较了大鼠附睾头、尾部精子ＡＴＰ含量的差别及活动精子百分率的关系。结果表明。

孕早期绒毛高雪氏病产前诊断法

目的:采用荧光酶学手段,建立一种测定绒毛β-葡萄糖苷酶活性的方法。方法:分析β-葡萄糖苷酶的酶动力学特性,并检测36例正常胎盘绒毛组织及高雪氏病胎儿绒毛酶活性。结果:正常胎盘绒毛组织酶活性均数为776.3,标准差为190.5;高雪氏病胎儿绒毛酶活性为0。结论:该法可成为孕早期高雪氏病产前诊断的简单。

以Insig-2基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立

目的通过双荧光素酶报告基因检测系统建立以胰岛素诱导基因2(insulin-induced gene 2,Insig-2)启动子为靶点的药物筛选模型。方法将人Insig-2基因启动子序列克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建重组质粒pGL3-Insig-2并与内参质粒pRL-TK瞬时共转染工具细胞,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化反映Insig-2基因启动子启动转录的活性,并对共转染质粒比例、工具细胞选择等条件进行探索和优化,相关药物处理进行验证。结果成功构建了重组质粒pGL3-Insig-2;确认pGL3-Insig-2:pRL-TK共转染比例为4∶1,确定3T3-L1细胞为工具细胞;1,25-(OH)2D3、小檗碱和姜黄素均能明显增强Insig-2基因启动子活性。结论成功建立了以Insig-2基因启动子为靶点的药物筛选模型,为筛选新型调脂药奠定基础。

人NRAGE基因启动子转录活性的初步研究

利用生物信息学软件搜寻NRAGE启动子区域的转录因子结合位点,并根据这些位点利用PCR技术克隆NRAGE启动子不同区域的缺失突变体,分别插入Luciferase报告载体pGL3-Basic载体中,构成8种缺失突变体的报告基因表达载体.通过双荧光素酶体系检测在HEK-293细胞中NRAGE启动子不同区域的转录活性,从而确定起主要作用的启动子区域.结果发现NRAGE基因转录起始位点上游-300 bp到-100 bp的区域起到主要的转录调控作用.

活性污泥中的ATP浓度及检测方法

活性污泥微生物的代谢活性会影响其对污染物的脱除效率,ATP作为与能量代谢密切相关的活性指标已经广泛用于活性污泥的活性监测。由于以往相关研究中测定方法不同,浓度表述方法各异,很难对众多研究者获得试验数据做有效的比较。通过仔细研究文献资料,对相关数据进行折算,本论文总结出正常情况下不同水质活性污泥中ATP的浓度范围,并对两种ATP检测方法——定磷法和荧光素酶法的原理和优缺点做了比较,便于相关领域的研究者参考使用。

三磷酸腺苷生物荧光法监测宫腔吸管清洗质量的研究’

目的探讨三磷酸腺苷（ATP）生物荧光法在监测官腔吸管清洗质量中的应用价值j方法按随机原则选择使用后的宫腔吸管120件，A组60件采用纯水浸泡＋高压水枪冲洗＋干燥的方法，B组60件采用碱性清洗液浸泡＋超声＋高压水枪冲洗＋手工擦洗＋干燥的方法。用目测法初步检测宫腔吸管清洗后的质量，用ATP生物荧光法和细菌计数法作平行比较，检测官腔吸管头内部顶端、吸管接头端内口2．5em处、吸管外壁前端、吸管腔内壁10am处，清洗前后细菌的残留量。结果两组宫腔吸管完成清洗干燥程序后吸管头内部顶端、吸管接头端内口2．5cm处、吸管外壁前端、吸管腔内壁10cm处相对光单位值（RLU）差异均有统计学意义（t=26．81、29．13、7．14、55．74，均P〈0．01），B组清洗效果明显优于A组。细菌计数法检测未检出致病微生物，上述四个部位清洗合格率分别是：A组：70．0％、85．0％、93．3％、93．3％；B组：95．0％、98．3％、100．0％、100．O％；B组合格率均高于A组（X^2=12．99、6．98、4．14、4．14，均P〈0．05）。结论碱性清洗液浸泡、超声和手工擦洗是官腔吸管清洗的重要环节；ATP生物荧光法可动态地快速检测官腔吸管清洗前后的细菌残留量，能作为有效检测官腔吸管清洗质量的评价方法。