ABI 7500与TL 988实时荧光PCR仪的性能评价

目的探讨ABI 7500与TL 988荧光定量PCR仪之间的性能差异。方法参照EP9-A2文件中的评价标准,两台仪器分别对5种不同浓度的甲型流感病毒阳性质控品进行检测,每个浓度测量20次,比对两种仪器的精密度、灵敏度,并评价两台仪器结果一致性。结果精密度:TL 988的变异系数(CV)从0.68%到1.52%,ABI7500的CV从1.93%到2.69%。两台仪器在检测高浓度的甲型流感病毒DNA时(107、106、105 copies/m L)差异无统计学意义(P>0.05),检测低浓度的病毒DNA时(104、103copies/m L)差异有统计学意义(P<0.05)。灵敏度:两种仪器检测浓度103copies/m L时,TL 988阳性检出率为100%,ABI 7500检出率为0。两种仪器检测数据相关性良好(r=0.998)。结论荧光定量TL 988 PCR仪器的性能(精密度和灵敏度)比ABI 7500好。

荧光定量PCR仪校准技术指标及结果分析

根据不同荧光定量PCR仪器品牌的市场占有率挑选了不同型号、不同工作频率和使用年限的仪器进行校准和质量风险分析,重点针对温度示值误差、温度均匀度、样本重复性和样本线性四个技术指标作了检测和比较,探讨了这四个技术指标出现偏差可能造成的检测结果失准的风险,并对仪器生产厂商和仪器使用者提出了建议。通过分析评估得出了该类仪器应该重点关注的技术参数指标和技术难点,为仪器使用者了解该产品的质量状况及相关政策措施的制定提供了参考依据。

基于不同型号荧光定量PCR仪比对HBV DNA检测结果的一致性分析

目的:评价ABI-7500和ABI-ViiA7 Dx两台荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果的一致性。方法:按照美国临床实验室标准化委员会EP9-A2文件的要求,以通过卫生部室间质评的ABI-7500 PCR仪为参比仪器,以ABI-ViiA7 Dx作为实验仪器,分别在两台PCR仪上检测40份临床血浆样本的HBV DNA,并进行结果比对和偏移比较。结果:两仪器检测40份血浆标本均无离群;两仪器检测每份样本的偏倚均<±7.5%,符合ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》中扩增检验项目实验室内分析系统定期比对的标准。结论:ABI-7500和ABI-ViiA7 Dx检测HBV DNA结果具有良好的一致性,可同时用于临床标本的检测。

荧光定量PCR仪多通道光学参数校准与结果分析

近年来,多重荧光PCR法广泛应用于肿瘤检测、动植物检疫、基因分型和物种鉴定等领域,但荧光定量PCR仪多荧光通道及免干扰设计会直接影响多重PCR检测结果。本文结合多重荧光PCR法的应用和荧光定量PCR仪多通道荧光检测能力设计,提出一种荧光定量PCR仪多通道光学参数校准方法,并通过实验,对荧光定量PCR仪的5个通道同时进行光学校准。实验证明:该方法具有可行性。

荧光定量PCR仪光学参数校准方法研究

荧光定量PCR仪性能参数主要包括温度参数和光学参数,其中温度参数校准较为成熟,而光学参数校准方法种类较多。本文对荧光定量PCR仪光学参数校准的DNA质粒标准物质法、染料标准物质法和温度光学物理装置法进行介绍和分析,并提出结合荧光定量PCR仪多通道荧光检测特点,开展对其多通道光学校准的物理校准方法研究。

乳品检测中实时荧光定量PCR仪的研制

完成了荧光检测系统、PCR热循环扩增系统、DNA核酸定量分析诊断系统等仪器关键技术研究,针对乳品检验及临床应用要求,在国家权威部门完成了仪器性能检测、使用验证、临床试验等全过程,实现了产品化和应用示范,并达到了准确性、安全性和有效性的要求。

荧光定量PCR仪的边缘效应与实验误差分析

目的:探讨荧光定量PCR分析仪边缘效应及实验误差的原因。方法:通过比较部分国外知名品牌荧光定量PCR仪的光路系统及加热模块设计原理,分析边缘效应及实验误差产生的原因。结果:传统荧光定量PCR仪光路设计缺陷和加热模块的孔间温度均一性不足会导致边缘效应和实验误差,是影响荧光定量PCR结果重复性的重要原因。结论:了解不同品牌荧光定量PCR仪的检测原理,选购性能优良的荧光定量PCR仪,尽量避免实验误差,以保证实验结果的准确性。

ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能评估

目的为参加医学实验室认可和评价仪器性能,对ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能进行评估。方法参照美国临床实验室标准化委员会（CLSI）文件对ABI 7300荧光定量PCR仪检测HBV-DNA定量结果的精密度、正确度、灵敏度及线性进行评价。结果精密度：批内变异系数（CV批内）为2.38%-4.61%,批间变异系数（CV批间）为3.87%-5.33%,达到《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准（CV批内〈4.8%,CV批间〈6.4%）。正确度：参加2011年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.14%,符合卫生部质评要求（偏倚不超过8%）;功能灵敏度：100IU/mL检测限浓度的CV值最接近于20%,与试剂盒检出下限相符;线性：相关系数（r2）为1.0,线性关系符合要求。结论 ABI 7300实时荧光定量PCR仪各项性能指标精确,可以为临床提供快速、准确的报告。

比对两台荧光定量PCR仪检测HBV-DNA结果一致性研究

目的对ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测HBV-DNA的结果进行比对和偏差评估。方法参照EP-9A2文件,分别在两台仪器上检测40例患者样本(浓度分布整个线性范围),获取HBV-DNA检测数据。以ABI-7300荧光定量PCR仪作为参比仪器,DA-7600荧光定量PCR仪作为实验仪器,建立回归方程,计算其绝对偏差与相对偏差。根据ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》中扩增检验项目分析性能标准,判断偏倚是否可接受。结果 ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测HBV-DNA的定量结果相对偏倚为6.6%,符合ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》中扩增检验项目实验室内分析系统定期比对的标准(系统误差绝对值小于7.5%)。结论 ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测的HBV-DNA结果具有可比性,可为临床提供可接受的HBV-DNA检验结果。

上海宏石SLAN96P荧光定量PCR仪性能验证

目的对上海宏石SLAN96P荧光定量PCR仪进行性能验证和评价。方法在本院检验科ISO15189实验室认可中对宏石SLAN96P荧光定量PCR仪的准确度、精密度、线性范围、生物参考区间进行验证。结果上海宏石SLAN96P荧光定量PCR仪的准确度、精密度、线性范围、生物参考区间均在厂家规定的范围内。结论宏石SLAN96P荧光定量PCR仪各项性能均符合规定要求,可用于临床基因扩增检验。

iQ^(TM)5多重实时荧光定量PCR仪应用及使用方法

实时定量PCR(real-time quantitative PCR)通过连续监测PCR扩增指数期间荧光信号强弱变化反应特异性的表达量,并据此计算出目的基因的表达量。此方法不需要分离PCR产物并作为极有效的实验方法,目前已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。本文主要介绍iQ^(TM)5型荧光定量PCR仪的原理及组成并以植物材料为例,分析介绍仪器的性能、使用方法及操作过程中的注意事项。

实时荧光定量PCR仪原理与技术关键点分析

本文主要阐述实时荧光定量PCR技术的基本构成、测量原理,以及实时荧光定量PCR仪的部件构成、质量控制和影响其检测精密度的因素。

实验室认可中两台荧光定量PCR仪的比对性研究

目的对ABI-7300荧光定量PCR仪和上海宏石SLAN96P荧光定量PCR仪进行比对和偏差分析。方法在本院检验科ISO15189实验室认可中使用ABI7300和宏石SLAN96P荧光定量PCR仪同时检测20例涵盖整个仪器线性的HBVDNA标本,以ABI-7300荧光定量PCR仪作为参比仪器,SLAN96P荧光定量PCR仪作为实验仪器,进行回归分析,计算偏倚%,评价其是否可接受。结果 ABI-7300荧光定量PCR仪与SLAN96P荧光定量PCR仪检测HBV-DNA的定量结果相对偏倚为6.9%,符合CNAS-CL36《医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明》明确要求即系统误差绝对值小于7.5%。结论 ABI-7300荧光定量PCR仪与SLAN96P荧光定量PCR仪检测的HBV-DNA结果具有可比性,可为临床提供可接受的检验结果。

SLAN-96P型荧光定量PCR仪性能评价及其应用

目的评价SLAN-96P型荧光定量PCR仪（SLAN-96P）的主要性能指标及其应用价值。方法按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）文件制定的评价标准,对40份临床血清标本、质控品和标准品进行乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）定量检测,评价该仪器的准确性、重复性、线性、灵敏度、A模块与B模块的可比性等指标。结果准确度的相对偏倚为0.2%-5.2%;重复性：批内变异系数（CV_（批内））为1.37%-2.75%,批间变异系数（CV_（批间））为1.52%-2.51%;灵敏度：SLAN-96P能检测的最低HBV-DNA浓度为10-2 IU/mL;线性：直线回归方程是Y=0.982 X＋0.094 8,相关系数（r）=0.999;A模块与B模块的可比性：A模块与B模块的检测结果差异无统计学意义（P〉0.05）,直线回归方程为Y=1.000 7 X＋0.012 4,r=0.994。结论 SLAN-96P型荧光定量PCR仪各项性能指标良好,SLAN-96P在病原微生物核酸检测方面具有高效、灵敏、快捷、定量的特点,具有很好的临床应用价值。

应用于微型PCR荧光检测仪的光学系统设计

针对实时微型PCR荧光检测仪系统的核心-光学模块目前仍然存在系统灵敏度低、能量利用率低、聚焦光斑大等问题。文中采用在原共聚焦型光路系统基础上改进元器件的方法,利用全反射透镜收集准直光线,采用非球面透镜进行光线会聚,优化材料选择。搭建实验系统进行实验,实验结果表明,此系统解决了原系统存在的问题,检测灵敏度达到0.01 ng/m L(荧光素),比原系统提高了10倍,可在实际检测中使用。

荧光定量PCR仪的选购

荧光定量PCR技术已成为临床分子检测的重要手段之一,其以敏感性、特异性而被越来越多的科研人员所看好,荧光定量PCR仪的性能与检测结果的准确性密切相关。现将PCR仪选购过程中需注意的几点问题做一简单介绍。

不同品牌荧光定量PCR仪的性能比较及维护策略

了解不同品牌荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪性能的差异性,为荧光定量PCR仪的临床使用与维护提供参考依据。根据工作中常用的荧光定量PCR仪,选定3种品牌型号设备的基本功能结构性能参数进行分析,比较相互之间的差异性。通过比较该类型仪器的加热模块、光源、扫描模式、后期维护等指标,总结了3种品牌型号荧光定量PCR仪各自的性能优势。通过3种品牌型号荧光定量PCR仪的性能优势比较,为荧光定量PCR仪临床使用过程中的仪器维护与使用质量保证提供了参考。

qPCR仪T_(m)校准的影响因素及结果分析

qPCR仪熔解曲线校准在物理参数层面,可更加直观地反应荧光定量PCR仪温控及光学系统的可靠性及相互影响,是全面评估荧光定量PCR仪的校准手段。由于熔解过程中,预熔解至熔解阶段的温度爬升速率不同,导致校准结果差异,因此,本文通过实验设计,分析了不同熔解爬升速率条件下Tm校准结果的差异和熔解曲线校准法的注意事项,为qPCR仪综合物理参数校准提供了参考。