miR-152-3p表达下调降低紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇的耐药性

目的探讨miR-152-3p对紫杉醇耐药人卵巢癌细胞A2780T对紫杉醇耐药性的影响及机制。方法①紫杉醇(1.875,3.75,7.5,17和23μmol·L^(-1))与人卵巢癌A2780和A2780T细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率,计算抑制细胞存活半数抑制浓度(IC50)值和耐药指数(RI)。Western印迹法检测A2780和A2780T细胞耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)蛋白表达。②实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测A2780和A2780T细胞miR-152-3p表达水平。脂质体瞬时转染技术转染miR-152-3p抑制物降低A2780T细胞中miR-152-3p表达(miR-152-3p抑制物组),同时设转染miR-152-3p阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法、划痕实验和流式细胞术分别检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞存活、迁移和凋亡的影响;Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物对A2780T细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。③用miRDB,Targetscan,miRWalk和Starbase数据库预测miR-152-3p的靶基因,并用Western印迹法检测转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞磷酸酯酶张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达的变化及RT-qPCR检测A2780和A2780T细胞PTEN mRNA表达水平予以验证。随后,脂质体瞬时转染技术转染PTEN siRNA沉默A2780T细胞中PTEN表达,同时设转染siRNA阴性对照组,RT-qPCR检测转染效率,MTT法检测沉默PTEN表达后A2780T细胞存活率和IC50值,Western印迹法检测P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达。结果①紫杉醇处理后A2780和A2780T细胞存活率均降低(P<0.01),A2780T细胞RI为2.8。与A2780细胞相比,A2780T细胞P-gp,MRP1和ABCG2蛋白高表达(P<0.05,P<0.01)。②与A2780细胞相比,A2780T细胞miR-152-3p明显高表达(P<0.01)。与转染miR-152-3p阴性对照组比较,转染miR-152-3p抑制物后A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和细胞迁移能力(P<0.05)明显降低,细胞凋亡率升高(P<0.01);Bax蛋白表达增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。③生物信息学数据库分析结果提示,PTEN是miR-152-3p的一个靶基因;Western印迹法验证显示,转染miR-152-3p抑制物组A2780T细胞PTEN蛋白表达低于转染miR-152-3p阴性对照组(P<0.05);RT-qPCR结果显示,A2780T细胞PTEN mRNA表达水平高于A2780细胞(P<0.01)。转染PTEN siRNA沉默PTEN表达后,与转染siRNA阴性对照组相比,A2780T细胞存活率(P<0.05,P<0.01)和IC50值(P<0.01)显著降低,P-gp,MRP1和ABCG2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论miR-152-3p在A2780T细胞中高表达,其表达下调可抑制A2780T细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡,降低A2780T细胞对紫杉醇的耐药性,该作用可能是通过降低其靶基因PTEN表达发挥的。

中药人参药对的药理活性研究进展

人参是五加科人参属多年生草本植物,在我国具有悠久的药用历史。药对是通过合理有效的中药配伍组成方剂用于临床治疗疾病,具有多途径、多靶点、多系统以及副作用小的优势。近年来,有关人参药对药理活性的研究日益增多。主要以网络药理学结合典型药对的药理活性研究为主。本文对人参及其药对的药理活性和化学成分变化进行较为全面的分析探讨,在阐明了其在临床应用价值的同时,为人参药对的组方规律研究提供了新的参考方法,同时也为相关新药研发提供依据。

金复康口服液对耐药人肺腺癌A549/DDP膜转运蛋白LRP MRPmRNA表达的影响

目的:从逆转多药耐药的角度,研究金复康口服液对耐药人肺腺癌细胞A549/DDP的化疗增效的作用和分子机制。方法:应用血清药理学方法,选择A549、A549/DDP细胞,实验分为实验组和空白对照组,从细胞水平、分子水平进行研究。结果:金复康口服液低剂量能够逆转A549/DDP对DDP的耐药,逆转耐药倍数为3.45倍,与DDP(320μmol/L)合用,使DDP(320μmol/L)对A549/DDP细胞的抑制率由47.55%升高为73.32%,且q>1.15,表明金复康口服液与DDP合用有明显的协同增效作用,增加了DDP对A549/DDP细胞的敏感度;金复康口服液低剂量能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。结论:(1)低剂量金复康口服液与DDP合用能够增加DDP对A549/DDP的增殖抑制作用,二者具有显著的协同增效作用。(2)金复康口服液能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。金复康口服液可能通过降低耐药肿瘤细胞膜转运蛋白的表达而逆转肿瘤多药耐药,为扶正方药对化疗增效机理提供了新的实验依据。

利福平-异烟肼-控释型载药人工骨的实验研究

开发研究一种能承载多药并有控释特性的载药人工骨。利用三维打印技术，制备具有多层同心圆柱体结构的载药人工骨，并将利福平和异烟肼由内到外按特定顺序加载，观察微观结构、孔隙率、体外药物释放特性和体外细胞生物相容性。所制备的载药人工骨呈多孔结构，孔隙率（61．76±2．53）％、微孔孔径50—100μm，体外药物呈现序贯释放，双药释放峰值依次交替出现，持续释放时间超过50d，NTT检测示细胞毒性0级，电镜观察细胞生长分化良好，并有大量细胞黏附于载药人工骨表面；三维打印技术可以精确地制备具有复杂结构的载药人工骨，制备的多药控释型载药人工骨具有药物缓释和序贯控释的特性，同时具有良好的孔隙率和细胞相容性，为骨结核治疗提供一种新型有效的手段。

哌柏西利胶囊空腹和餐后给药人体生物等效性研究

目的评价哌柏西利胶囊受试制剂(T)和参比制剂(R)在中国健康受试者空腹和餐后状态下的生物等效性和安全性。方法采用单中心、随机、开放、两制剂、两序列、两周期的交叉试验设计,空腹试验和餐后试验分别入组32例和28例健康受试者,受试者随机分配到2个试验组(T-R组和R-T组),每周期给药1次,125 mg/次。采用HPLC-MS/MS法测定血浆中哌柏西利浓度,用Phoenix Win Nonlin 8.3软件得出PK参数集,由非房室模型计算各受试者体内哌柏西利胶囊的药动学参数,进行统计分析,并对受试者的临床观察指标进行安全性评价。结果空腹试验和餐后试验分别有31例和28例受试者完成两个周期给药。受试者空腹和餐后状态下服用哌柏西利胶囊受试制剂和参比制剂的血浆药物最大浓度(C_(max))、时间-浓度曲线下面积(AUC_(0-t)和AUC_(0-∞))的几何均值比值的90%置信区间均在80.00%~125.00%范围内,两制剂生物等效。整个试验过程中未发生任何严重不良事件。结论受试制剂和参比制剂在中国健康志愿者空腹和进食条件下均具有生物等效性,且安全性良好。

推进药医工融合 培养跨学科应用型医药人才

药学、医学与工学的融合对推进“健康中国”建设和培养“新医科”人才具有重要意义。广东药科大学充分发挥办学优势,以“跨学科集群式”思维为指导,同步推进学科集群与专业集群建设,构建了“药医工融合”人才培养体系,在培养跨学科应用型医药人才方面取得了明显成效。

职业接触卫生杀虫剂对施药人员健康影响及预防

为保护建国五十周年首都国庆阅兵部队驻地负责杀虫施药人员安全,防止发生中毒,我们于1999年7月～9月,对25名职业接触杀虫剂的卫生员进行了健康检查、血液胆碱酯酶活性测定和预防中毒效果观察,结果报告如下.

基于“药人”学说的新型冠状病毒肺炎预防方药探讨

新型冠状病毒肺炎疫情期间,大量无症状的集中隔离、居家隔离人群和密切接触者,无有效预防干预手段。同时,针对数量更为巨大的未感染人群,各地公布众多预防方药,但预防方药的使用并未考虑人群体质差异。该文基于“药人”学说,分析了“麻黄人”“桂枝人”“柴胡人”“半夏人”“黄芪人”“大黄人”6种“药人”的基本体质特征,同时分析不同“药人”感染新型冠状病毒肺炎的发病特征,并在此基础上提出基于“药人”的预防处方,用以指导新型冠状病毒肺炎疫情中密切接触者、隔离人群及未感染人群预防方药的选择。

银川市药店售药人员对紧急避孕知识的知晓率及影响因素分析

目的:了解银川市药店售药人员对紧急避孕知识的掌握情况,并分析其影响因素,为对药店售药人员进行紧急避孕知识宣教提供依据。方法:采用横断面调查研究,从银川市194家社会零售药店中抽取86家作为研究现场,选择研究现场中的450名售药人员作为研究对象进行问卷调查。结果:分析有效问卷438份,药店售药人员对紧急避孕的知识掌握的不够,其中对紧急避孕使用方法的2个问题的正确回答率分别为19.1%、26.5%,对服药后发生副作用处理的掌握正确的仅为41.6%;不同民族、年龄、学历和工龄的药店售药人员对于紧急避孕知识的掌握情况不同,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,民族、年龄(<24)、对紧急避孕的态度及行为是影响药店售药人员掌握紧急避孕知识的因素。结论:银川市药店售药人员对紧急避孕的相关知识较欠缺,应对售药人员开展有针对性的紧急避孕宣教工作。

某市医药人员对抗菌药物认知情况的调查分析

目的评估某市医药人员对抗菌药物的认知度,为提高全市药事管理水平提出建议,以进一步保障患者用药安全。方法本研究于2019年9—10月通过问卷星平台设计医药人员网络调查问卷,面向全市12个旗县区33所医疗机构的医药人员进行调查,通过问卷星后台对数据进行整理、统计、分析。结果共回收问卷565份,不同群体对抗菌药物的认知度比较,差异有统计学意义(χ^(2)=20.022,P<0.05);不同工作年限、及不同职称对抗菌药物的认知度,差异有统计学意义(χ^(2)=11.332、8.645,P<0.05)。结论某市医生群体对抗菌药物的认知度不如药师群体,医疗机构对抗菌药物管理制度执行不到位。

中医药学生须实施个性化培养 回应“从教育看中医药人才培养”

随着中医学的发展，中医药教育日益受到重视。而目前中医药教育还存在教学与临床脱节、中医传承和科研创新能力不足等诸多问题。因此，中医药院校必须在培养模式中保持和发挥自身的特点和优势，克服套用西医办学模式的负面影响，从中西医学发展规律的差异进行反思，进行中医药教育模式的改革。

多旋翼植保无人飞机水稻飞防中的农药飘移和施药人员暴露

为研究多旋翼植保无人飞机施药时农药雾滴飘移规律以及施药作业人员职业暴露情况,依据喷雾飘移田间测试国际标准ISO22866和人体暴露贴片测试法,对多旋翼植保无人飞机和电动背负式喷雾器在水稻田喷施氯虫苯甲酰胺和苯醚甲环唑时的农药雾滴飘移量及施药作业人员人体农药沉积量进行了对比测试和分析评价。结果表明:在本试验环境条件下,多旋翼植保无人飞机在作业速率4 m/s和作业高度1.8 m参数下施药时,在距施药区下风向边界0~30 m范围内地面均有农药飘移性沉积,30 m处氯虫苯甲酰胺飘移率为0.9%,而背负式喷雾器施药的飘移量则主要集中在距施药区0~3 m区域内,3 m以外区域飘移率均≤0.6%;背负式喷雾器在距施药区5 m以及10 m远处空中不同高度的飘移量均小于0.001μg/cm^2,多旋翼植保无人飞机在距施药区5 m远处空中的飘移量大于10 m处,并且在垂直分布上,距冠层2 m左右(无人飞机的飞行高度)处飘移量最多。结合两种施药机具的雾滴粒径(背负式喷雾器DV50值为149.4μm,多旋翼植保无人飞机DV50值为115.3μm)分析,无人飞机的雾滴具有更高的飘移潜力。由于实现了人机分离,多旋翼植保无人飞机进行作业时人体暴露量很低,而背负式喷雾器施药时对作业人员身体各部位均会造成一定的暴露,其中以手前臂和腿部正面暴露最为严重,在施用苯醚甲环唑时,右前臂背面暴露量最高,达到15.19μg/cm^2。本文中针对多旋翼植保无人飞机喷雾作业时在下风向的飘移沉积研究方法和试验结果,以及对多旋翼植保无人飞机施药过程中职业暴露的研究,可为农药喷雾作业缓冲区距离确定和人员作业安全评估提供参考。

载药人工骨研究的应用进展

背景:骨科药物缓释系统现已成为治疗骨科疾病的一大重要方法,作为其中之一的载药人工骨是目前新兴前沿的治疗手段。目的:综述载药人工骨的分类及特点、研究方法和研究方向。方法:由第一作者检索2001至2011年PubMed数据库及维普外文期刊库有关载药人工骨材料分类、载药人工骨研究方法及载药人工骨应用研究等方面的文献。结果与结论:载药人工骨主要分为羟基磷灰石、磷酸钙骨水泥、生物玻璃3类,前两者已逐步应用于临床研究及治疗中,生物玻璃是最近比较新的研究材料,在充当填充骨材料和药物释放载体上具有独特的功能,关于其特性、具体应用还要进一步研究。载药人工骨的研究方法主要从药物载体孔洞选择、人工骨制备、载药人工骨药物成分、人工骨药物释放机制等方面入手。载药人工骨具有药物载体和修复骨缺损的双重作用,且能诱导骨的生长和同步降解,具有操作简便,疗效好等优点,应用于骨髓炎、骨缺损和预防人工关节感染等方面是一种理想且有效的方法。

儿茶素对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV200凋亡的影响

目的 研究两种儿茶素ECG、EGCG对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的促凋亡作用。方法 MTT法检测药物对细胞的毒性作用 ,用形态学观察法、TUNUL法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪PI染色法观察细胞凋亡。结果 30mg·L-1ECG或 8mg·L-1EGCG联合 0 0 2 4mg·L-1长春新碱 (VCR)可用形态学观察、免疫组化法、琼脂糖凝胶电泳法见到细胞凋亡改变 ,而对照组无此类改变或改变不明显。结论 两种儿茶素在低细胞毒剂量时可促进长春新碱对耐药口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的细胞凋亡作用。

肠胃清对多药耐药人结肠癌裸鼠异位移植瘤的抑制作用及其细胞凋亡的影响

目的观察肠胃清对裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,随机分为4组:生理盐水组(简称空白组)、长春新碱组(简称化疗组)、肠胃清组(简称中药组)、长春新碱联合肠胃清组(简称联合组),分别采用HE染色法和TUNEL法观察药物干预后多药耐药人结肠癌裸鼠移植瘤的病理改变及凋亡指数。结果治疗组均能在一定程度上改变人结肠癌多药耐药裸鼠异位移植瘤的病理形态,肠胃清组凋亡指数高于化疗组,肠胃清联合化疗组凋亡指数最高。结论中药复方肠胃清能在一定程度上诱导结肠癌多药耐药细胞凋亡,并与化疗药具有协同作用。

贝母素甲对多药耐药人白血病细胞活力和凋亡的影响及机制

目的观察贝母素甲对多药耐药白血病人细胞K562/A02活力与细胞凋亡的影响,探讨活性氧(ROS)在此过程中的作用。方法将K562/A02细胞成3组,药物组分别加入终浓度为100、200、400μmol/L的贝母素甲;NAC预处理组采用5 mmlo/L ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)预处理后,再加入终浓度为400μmol/L的贝母素甲;对照组加等体积的药物溶解介质RPMI1640培养基。采用MTT法检测各组细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,紫外分光光度法检测细胞内ROS、GSH水平。结果与对照组比较,药物组细胞活力均降低(P<0.05或<0.01)、细胞内ROS水平增高(P均<0.01)、GSH水平下降(P均<0.01)、细胞凋亡率上升(P均<0.05),NAC预处理组的细胞活力、细胞凋亡率和ROS水平无明显变化(P均>0.05)。结论贝母素甲可抑制多药耐药人白血病细胞K562/A02的细胞活力、诱导其凋亡;其机制是通过诱导细胞ROS爆发,引起GSH水平下降,从而逆转多药耐药的发生。

健脾解毒方对多药耐药人结肠癌裸鼠异位移植瘤多药耐药相关基因蛋白mdr1及P-gp的影响

目的观察健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤mdr1基因及P-gp的影响。方法采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,随机分为4组,生理盐水组(空白组)、长春新碱组(化疗组)、健脾解毒方组(中药组)、长春新碱联合健脾解毒方组(联合组),观察各组多药耐药相关基因蛋白的影响。结果健脾解毒方联合化疗组mdr1基因表达水平显著低于空白组,P-gp表达量下降。结论中药复方健脾解毒方能在一定程度上可联合化疗逆转多药耐药,与化疗药具有协同作用。

板蓝根组酸对耐药人肝癌原位移植瘤的耐药逆转研究

目的 研究板蓝根组酸对耐药人肝癌原位移植瘤的耐药逆转作用及机制。方法 利用已建立的人耐药肝癌BEL - 74 0 4 /ADM动物模型 ,应用 FCM、HPL C和 RT- PCR等方法观察板蓝根组酸在体内对多药耐药逆转。结果 板蓝根组酸联合 ADM作用于耐药肝癌动物后 ,肿瘤体积和肿瘤重量分别为 0 .17± 0 .0 5 (cm3)、0 .73± 0 .19(g)明显小于 ADM组的 0 .5 8± 0 .13(cm3)、1.4 1± 0 .32 (g) ,两组间差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,肿瘤抑制率达 5 3%。其细胞内 ADM的含量 :板蓝根组酸 +ADM组为 1.0 7± 0 .0 7,ADM组为 0 .2 8± 0 .11,有显著性差异 (P<0 .0 1)。但 MDR1- m RNA,P- gp的表达改变不明显。结论 板蓝根组酸在体内能逆转耐药肝癌细胞对 ADM的耐药性 ,其逆转作用可能与降低 P- g P药物外排功能、增加细胞内药物浓度有关 。

榄香烯对多药耐药人红白血病细胞株的影响

[目的]探讨抗肿瘤药β-榄香烯对多药耐药细胞系的影响。[方法]利用MTT，荧光染料Hoechst33342染色、透射电镜的方法观察β-榄香烯对多药耐药性（mdr）人红白血病细胞株K562／ADM细胞的生长和凋亡的影响。[结果]β-榄香烯对K562／ADM细胞的抑制作用在5—40μg／mL的药物浓度范围内呈上升趋势，加药组24—72h范围内细胞凋亡率不断增加，浓度40μg／mL72h时达高峰62．73％±，二者呈现药物浓度和作用时间依赖性（P〈0．05或P〈0．01）。[结论]诱导细胞凋亡是β一榄香烯抗肿瘤细胞作用机制之一。

康莱特注射液对多药耐药人白血病细胞株作用的实验研究

目的 观察康莱特注射液 (KL T)对耐药人白血病细胞 K5 6 2 /adr和 K5 6 2 /vcr的作用。方法 (1) MTT法检测耐药细胞对 KL T及多种化疗药物的敏感性 ,观察 KL T对紫杉醇 (泰素 )、泰索帝、乐沙定的化学增敏作用。(2 )运用流式细胞仪检测 KL T作用过程中细胞的凋亡及 P- gp蛋白表达情况。结果 (1)人白血病耐药细胞对 KL T有轻度抗性。 (2 ) KL T能明显增强多药耐药细胞对化疗药物的敏感性 ,其逆转作用呈剂量依赖关系。 (3) KL T能诱导人白血病细胞凋亡。(4 ) KL T不能降低耐药细胞 P- gp蛋白表达。结论 KL T能明显逆转多药耐药人白血病细胞株的耐药性 ,并能诱导其凋亡 ,KL T的化学增敏作用机制可能与 P- gp蛋白表达无关。