单克隆抗体与药物交联的方法学简述

长期以来,细胞毒类抗肿瘤药物因毒性大,选择性低,限制了它们的临床应用。近十几年来,人们将这些药物与针对肿瘤细胞表面抗原的单克隆抗体相连接,利用抗体的特异性导向作用,将药物运载到肿瘤病灶处,增加其中的药物浓度,提高疗效,减少全身性毒性作用。但是,药物与单克隆抗体(McAb)的结合,需要特定的化学反应过程来完成,结合后的交联体,既要保持药物的活性,又要保证抗体的活性不受影响。

抗癌药物多西紫杉醇与10-十一烯酸及人血清白蛋白化学交联的研究

抗癌药物多西紫杉醇在临床使用中会引起许多毒副作用,开发低毒和具有靶向性的新型紫杉烷类药物制剂是一个非常重要的研究课题。本研究探索多西紫杉醇与人血清白蛋白化学交联药物的合成,试验将多西紫杉醇的2’羟基位与人血清白蛋白的34位半胱氨酸上的巯基处通过10-十一烯酸进行精确的共价交联。合成的中间产物及最终产物使用了质谱进行了鉴定和表征。测定结果证实了抗癌药物多西紫杉醇可通过10-十一烯酸与人血清白蛋白进行化学交联并能生成1:1的交联产物。本研究的结果对于进一步开发新型的紫杉烷类白蛋白化学共价交联药物制剂提供了一种新策略。

京尼平交联羊膜生物支架的生物物理特性

目的探讨京尼平交联羊膜作为生物支架的生物特性及可行性。方法获取新鲜脐带，采用贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）。采用流式细胞技术测定细胞表面标志物PE-CD34、PE-CD45、PE-CD90、FITC-105和FITC-Oct-4单克隆抗体及鉴定细胞。取第3代hUCMSCs进行成脂、成骨诱导培养，分别用茜素红和油红O染色鉴定。无菌条件下取健康剖宫产羊膜，将修剪的组织块固定于硝酸纤维素膜并按照京尼平质量浓度、交联温度和时间的不同分为12个组，分析质量分数0.5%、1%京尼平在37 ℃、45 ℃条件下交联羊膜24、36和48 h后羊膜的最大拉伸位移和最大载荷。将hUCMSCs分为hUCMSCs组、新鲜羊膜组（孔板中铺上新鲜羊膜后加入hUCMSCs进行培养）、交联羊膜组、交联羊膜＋明胶组和明胶组，分别按照分组在培养孔中铺上相应物质对hUCMSCs进行培养，采用羟脯氨酸试剂盒检测各组交联羊膜中羟脯氨酸含量。于培养后第3天采用MTT法检测各组细胞增生值（吸光度，A值）以评估交联羊膜的生物相容性。结果与0.5%京尼平交联羊膜相比，1%京尼平交联羊膜最大拉伸位移减小[（8.31±0.43）mm与（4.49±0.37）mm]，差异有统计学意义（t＝6.785，P〈0.05）。0.5%京尼平在37 ℃和45 ℃条件下交联24 h羊膜最大拉伸位移分别为（9.89±1.09）mm和（5.39±0.59）mm，差异有统计学意义（t＝6.389，P〈0.05）；0.5%京尼平在37 ℃条件下交联24、36和48 h羊膜最大拉伸位移逐渐减小，但差异无统计学意义（P〉0.05）。与0.5%京尼平交联羊膜相比，1%京尼平交联羊膜最大载荷增大[（3.94±0.31）N与（5.19±0.27）N]，差异有统计学意义（t＝3.034，P〈0.05）。0.5%京尼平在45 ℃条件下交联24 h羊膜载荷明显高于37 ℃条件下，差异有统计学意义（t＝5.528，P〈0.05）。1%京尼平交联羊膜、0.5%京尼平交联羊膜和新鲜羊膜中羟脯氨酸质量分数分别为（1.28±0.36）、（2.03±0.49）和（2.11±0.10）mg/g，1%京尼平交联羊膜中羟脯氨酸质量分数明显低于0.5%京尼平交联羊膜和新鲜羊膜，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。新鲜羊膜组、明胶组和hUCMSCs组培养3 d后细胞增生值均明显低于交联羊膜组和交联羊膜＋明胶组，差异均有统计学意义（均P〈0.05），交联羊膜组与交联羊膜＋明胶组间细胞增生值的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论不同温度、不同交联时间和不同质量分数京尼平均影响交联羊膜的力学特性，交联羊膜的细胞毒性小，可塑性更好，有望作为人工角膜的载体支架。

遗传密码子扩展技术在蛋白质及多肽类药物中的应用

通过遗传密码子扩展技术位点特异性插入非天然氨基酸(noncanonical amino acids,ncAAs)可在原子水平上对蛋白质的结构与功能进行操控。目前该技术能够向包括高等动植物在内的各种生命体中插入200多种ncAAs,已被广泛应用于生物医药领域。凭借能够在蛋白质中定点引入可控生物正交化学官能团的独特优势,该技术不仅可以用于蛋白质及多肽药物的研发,提高蛋白质及多肽药物的质量与疗效,而且可以为一些人类重大疾病的预防和治疗提供开创性解决方案。本文将重点关注遗传密码子扩展技术的前沿进展及其在各类抗体、细胞因子以及抗菌肽等蛋白质及多肽类药物中的应用,同时也对其衍生的新型生物治疗手段进行简单阐述。

SYNTHESIS AND DRUG RELEASE OF CROSSLINKING POLYPHOSPHATES

A new class of crosslinking polyphosphates were synthesized characterizedby IR 1HNMR, 31PNMR spectroscopy as well as elemental analysis. In vitrodegradation of the polyphosphates obtained and the release of antineoplastic drugMethotrexate (MTX) and contraceptive Levonorgestrel (LNG ) by nsing thesepolymers as matrix were studied. Zero order release rate was rkserved in the case ofLNG release.