苯及同系物接触者Ⅰ、Ⅱ相代谢酶基因多态性与CYP1A1酶活性关系研究

目的研究职业性接触苯系物与Ⅰ、Ⅱ相代谢酶CYP1A1、CYP2E1、GSTT1和GSTM1基因多态性对CYP1A1酶活性的影响。方法以52例广东省某公司苯系物接触者为接触组,以38例未接触苯系物的"正常人"为对照组,抽提外周血淋巴细胞,Ⅰ、Ⅱ相代谢酶基因多态性检测用PCR和PCR-RLCP方法,CYP1A1酶活性用EROD酶活性表示。结果与对照组比较,苯系物接触组CYP1A1酶活性显著高于对照组(P<0.01),但无性别差异。苯接触组中不同Ⅰ、Ⅱ相代谢酶CYP1A1、CYP2E1、GSTT1和GSTM1基因多态性CYP1A1酶活性差异无统计学意义。结论苯作业工人外周血CYP1A1酶的活性受到苯接触的诱导作用,但并未发现受Ⅰ、Ⅱ相代谢酶CYP1A1、CYP2E1、GSTT1和GSTM1基因多态性的影响。

药物的Ⅱ相代谢与酶系及其进展

为了解药物ＩＩ相代谢中各酶系的最新研究进展及其临床意义。方法：按药物ＩＩ相代谢的类型分别总结了各酶系的功能、基因超家族和底物等的最新研究进展及临床意义。结果与结论：在人体内有多种类型的结合反应和大量的结合反应酶。葡醛酸结合反应是含羟基等官能团的化合物在葡醛酸转移酶（ＵＧＴ）催化下生成水溶性的Ｂ－Ｄ－葡萄糖醛酸甙，分泌到尿或胆汁中。目前已至少鉴定了１８种人类ＵＧＴ的同工酶。Ｎ－葡醛酸结合反应及其临床意义正受到广泛重视。硫酸化反应是一种重要的结合反应，转磺酶（ＳＴ）是一个基因超家族，包括酚转磺酶、雌激素转磺酶、羟基类固醇转磺酶以及脱水表雄甾酮转磺酶等。ＳＴ酶在人类中具有功能上显著的基因多态性。Ｎ－乙酰化反应在人类由具多态性的ＮＡＴ１和ＮＡＴ２催化，能修饰许多蛋白质，调节许多生理功能，ＮＡＴ的多态性与个体的癌症尤其相关。谷胱甘肽结合反应具有解毒作用，催化谷胱甘肽结合反应的酶为谷胱甘肽－Ｓ－转移酶，包括α，μ，π，θ等亚族，通过测定同工酶表达的类型和底物专属性可以研究ＧＳＴｓ在耐药性上的复杂作用。此外还有甲基化反应、氨基酸结合反应、脂肪酸结合反应、缩会反应等，在ＩＩ相代谢中发挥着各种作用。

Ⅰ、Ⅱ相代谢酶基因多态性与苯遗传易感性的关系(综述)

苯是一种良好的有机溶剂,但人体长期接触苯可引起造血系统的损害.个体对苯致血液毒性的易感性存在着差异,个体易感性与基因的遗传多态性、环境暴露情况、年龄、营养状况等因素有关.出现基因多态性的原因可以是单核苷酸变异,或是某些高度重复序列的考贝数变异.目前,国际、国内关于苯的个体易感性主要是关于代谢类型和代谢酶基因多态性的研究.

小分子药物Ⅱ相代谢缀合物水解方法及促进酶解反应方法的研究进展

目的:为小分子药物Ⅱ相代谢过程研究及相关分析提供参考。方法:查阅近几年相关研究文献,归纳小分子药物Ⅱ相代谢常见结合反应的类型并总结其代谢缀合物水解方法及促进酶解反应方法的研究进展。结果与结论:Ⅱ相代谢是Ⅰ相代谢物在体内的结合反应,包括糖苷结合、硫酸化、甲基化、乙酰化、氨基酸结合、谷胱甘肽结合、脂肪酸结合、缩合反应等。其中,最常见的小分子药物Ⅱ相代谢反应是与葡萄糖醛酸结合或与硫酸结合,生成葡萄糖醛酸苷缀合物或硫酸酯缀合物。小分子药物Ⅱ相代谢缀合物常见的水解方法包括酸水解、碱水解和酶水解。其中,酶水解以其安全、温和、不会引起目标物分解、重复性好、药物回收率高等优点,成为目前使用最广泛的水解方法。促进酶解反应的方法目前主要有红外辐射法和超声波法,两种方法都对不同的酶系反应有促进作用。

Ⅱ相代谢及其酶的研究进展

以结合反应为特征的Ⅱ相药物代谢是机体处置药物重要环节,主要包括葡萄糖醛酸化、乙酰化、甲基化、谷胱甘肽化、硫酸化等结合反应。不同基团对应的结合反应均由多个同类基因或超基因家族介导催化完成。Ⅱ相代谢反应都具有各自不同的反应特征与各自不同的功能意义。Ⅱ相药物代谢酶活性受联合用药影响会导致临床药物相互作用,其基因多态性一方面会影响内源性物质的代谢,可能导致某些疾病发生率升高,同时也会影响外源性物质的代谢,引起药物疗效的改变或毒性反应的发生。

18α-甘草酸二铵对大鼠肝脏细胞色素P450和II相酶的影响

目的 研究 18α 甘草酸二铵 (18α GL)对肝脏药物代谢酶的影响。方法 ♂Wistar大鼠ig 18α GL 12 5和 5 0mg·kg-1,分别给药 3 ,6和 12d ,对照组给等容量的溶媒。酶学测定肝微粒体细胞色素P45 0 (CYP) ,尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 (GT)和谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)活性。结果 18α GL抑制苯胺羟化酶 ,乙氧异唑脱乙基酶和红霉素脱甲基酶活性 ,抑制率分别可达 5 3 2 % ,47 3%和 34 3 % ;增加GT1(底物为 7 甲基 4 羟基 香豆素 ) ,GT2 (底物为 4 羟基联苯 )和GST活性 ,分别可达 2 9 9% ,70 3%和 48 3 %。结论 18α GL对大鼠肝微粒体I相酶(CYP2E1,CYP1A1和CYP3A)主要是抑制作用 ,对II相酶 (GT1,GT2 和GST)

肝纤维化状态下小肠药物代谢功能的改变

目的 探讨肝纤维化时小肠药物代谢功能的变化 ,为合理用药提供依据。方法 在大鼠肝纤维化模型上 ,测定小肠粘膜上皮细胞药物代谢酶、抗氧化酶及膜流动性变化 ,并与急性肝损伤、慢性肝硬化大鼠小肠相关指标进行比较。结果 与正常对照组相比 ,肝纤维化大鼠小肠粘膜上皮细胞药物代谢Ⅰ相酶红霉素N 脱甲基酶 (CYP3A)、7 乙氧异口恶唑O 脱乙基酶 (CYP1A1)和苯胺羟化酶 (CYP2E1)活性分别增加 2 .2 ,0 .6和 0 .3倍 ,而Ⅱ相酶葡糖醛酸转移酶 (UDPGT)和α 、π 谷胱甘肽S 转移酶 (GST)活性则分别减少 15 % ,4 3%和 5 7% ,同时膜脂质过氧化产物增加 ,抗氧化酶活性减弱 ,膜流动性降低。急性肝损伤时 ,上述指标无明显变化 ,而肝硬化时上述指标与肝纤维化组变化一致 ,并进一步增强。结论肝纤维化可影响小肠粘膜上皮细胞药物代谢功能 ,使Ⅰ相氧化功能增强 ,Ⅱ相结合反应减弱。小肠抗氧化功能降低可能与Ⅰ相氧化代谢增强有关。

人类Ⅱ相药物毒物代谢酶非同义单核苷酸多态性的表型预测：分子进化观

药物毒物代谢酶编码区的非同义单核苷酸多态性(nsSNPs)导致氨基酸改变,从而可能改变相应蛋白质的功能,使人体对有关药物毒物产生异常反应,亦与疾病易感性关联.在人类Ⅱ相代谢酶基因中已发现大量nsSNPs,但对这些酶nsSNPs基因型和表型间的关系了解甚少.本研究从Ensembl基因组数据库和NCBISNP数据库识别出104个人类Ⅱ相酶基因的923个经确认的nsSNPs.用PolyPhen,Panther和SNAP算法预测,发现44%～59%的nsSNPs影响到蛋白质功能.本研究的预测结果与已有实验研究证据基本吻合.68%的已知有害nsSNPs被正确预测为有害.本研究识别出多个尚未经实验研究的功能氨基酸.Panther和PolyPhen的预测结果吻合,SNAP非中性预测结果与PolyPhen预测分值亦吻合.进化上非中性的(去稳定化的)氨基酸替换可能是Ⅱ相酶活性改变,产生疾病易感性和药物/外源物毒性的致病基础.本研究还在有害nsSNPs预测的框架内阐明了Ⅱ相酶的分子进化模式.

豆腐果苷在大鼠体内代谢的初步研究

豆腐果苷（helicid,对苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷）是从我国西南少数民族植物药物豆腐渣果中提取的有效成分。基于药效学实验的基础,我们对豆腐果苷进行了动物体内的药动学研究,发现如下问题：（1）物料不平衡：豆腐果苷原药在大鼠尿、粪和胆汁中24 h的总排泄量约为给药量的5%,提示约有95％豆腐果苷在体内代谢消除。

斑马鱼药物代谢模型的适用性研究进展

根据相关研究及国外有关文献资料,对斑马鱼药物代谢的实验方法、代谢类型及适用性进行归纳和总结。斑马鱼较成功地模拟了哺乳动物Ⅰ相代谢、Ⅱ相代谢、肠道菌群代谢及多途径整体代谢,适用于微量单体化合物及其组合物的在体代谢研究,有利于代谢产物的简单、高效富集,具简单、高效、低成本、化合物用量少(毫克级)等优势,是一种早期、快速预测微量成分在体代谢的极具前景的模式生物模型。

基于体外肝代谢考察大黄素甲醚肝毒性作用

以胆红素代谢过程中UDP-葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1酶)介导的胆红素葡萄糖醛酸结合环节为切入点,评价大黄素甲醚潜在肝毒性风险。实验以胆红素为UGT1A1酶底物,以表观抑制常数K_i为评价指标,采用体外肝微粒体孵育法,启动Ⅱ相代谢反应,考察大黄素甲醚原型成分的抑制作用,启动Ⅰ,Ⅱ相代谢反应,考察代谢产物及原型成分的综合抑制作用。结果显示仅启动Ⅱ相反应时,大黄素甲醚以原型形式直接作用于UGT1A1酶,表现为弱抑制,抑制类型为混合型抑制;同时启动Ⅰ,Ⅱ相反应时,大黄素甲醚对UGT1A1酶的抑制作用变为强抑制,抑制类型为混合型抑制,提示大黄素甲醚存在Ⅰ,Ⅱ相代谢过程,并且其代谢产物大黄素葡萄糖苷结合物及大黄素葡萄糖醛酸化物对UGT1A1酶抑制作用较强。该研究所得结果初步证明大黄素甲醚原型对UGT1A1无明显抑制作用,经由Ⅰ,Ⅱ相代谢后抑制作用增强,推测其代谢产物为引发肝毒性的主要成分。

异烟肼致小鼠肝脏损伤和对Nrf2及GSTA1 mRNA表达的影响

目的研究在异烟肼(INH)致小鼠肝脏损伤进程中,核因子相关因子2(Nrf2)通路及其下游靶基因谷胱甘肽-S转移酶A1(GSTA1)mRNA的表达情况,为INH致肝损伤的预防和治疗提供依据。方法 64只昆明小鼠,随机分为8组,实验组分别为INH 90 mg/kg·d灌胃1 d、3 d、5 d、7d、2周、3周和4周组;对照组给予等容积蒸馏水灌胃。比色法检测肝组织中还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及GSTs活力;应用SYBR Green实时荧光定量RT-PCR法检测肝组织中Nrf2、GSTA1 mRNA表达情况。结果用药2周后,血清ALT含量升高(P<0.001);用药5 d后可见肝组织病理形态学改变;用药5 d、7 d、2周和3周后肝组织中GSH含量明显低于对照组(P<0.001),7 d、2周和4周组肝组织中MDA含量高于对照组(P=0.002);5和7 d组GSTs活力降低(P=0.005),随后又上升至正常水平;4周时,Nrf2 mRNA表达比值增加至6.24倍(P=0.014);用药2、3和4周组GSTA1 mRNA表达上调(P<0.001);GSTA1和Nrf2 mRNA的表达有相关性(r=0.861,P=0.006)。结论在INH导致的肝损伤发生过程中,Nrf2及GSTA1基因表达上调,调节机体的Ⅱ相药物代谢能力,抵御药物毒性作用,提示及时激活Nrf2通路上调其下游靶基因可能会预防肝损伤的发生。