m^(6)A修饰对药物代谢酶和药物转运体的调控作用

m^(6)A修饰是RNA甲基化修饰中最丰富的一种修饰,受甲基转移酶和去甲基化酶的动态调控,被m^(6)A识别蛋白识别并结合后可影响mRNA的剪切、稳定性和翻译等生物学过程来调控靶基因的表达。最近的研究发现,m^(6)A修饰可通过多种途径来调控药物代谢酶和药物转运体表达,进而影响机体对药物的代谢速率或影响细胞中的药物浓度,最终导致药物治疗效果发生变化。该文综述了m^(6)A修饰调控药物代谢酶和药物转运体分子机制的研究进展,以期为临床上的合理用药、个体化用药提供新思路。

以合理用药为导向阐述药物代谢酶研究方法的进展

药物代谢酶是药物代谢过程中的关键蛋白,对药物代谢酶的研究,可明确药物对代谢酶的影响,有效避免联合用药时药物不良反应的发生。在用药过程中,药物不良反应的发生将会给患者、家属以及社会带来不必要的负担,严重的药物不良反应甚至会危及患者生命。不良反应的发生与药物代谢酶的基因表达量、蛋白表达量、酶活性强弱和空间结构等方面密切关联。因此,采取何种技术对上述四方面的研究极为重要。然而,未曾有过阐述药物代谢酶基因、蛋白、酶活性及空间结构研究方法的报道。故此,本文总结近几年药物代谢酶基因、蛋白、酶活性及空间结构等方面的研究方法,为研究代谢酶避免药物不良反应的发生提供借鉴。

大蒜有机硫化物对药物代谢酶和转运体影响的研究进展

近年来,大蒜有机硫化物(GOSCs)及其活性代谢产物在慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗中表现出低毒高效的效果,且可减少布地奈德等药物的不良反应,因此GOSCs具有单独开发和与现有药物复方开发的巨大潜力。为发现可能存在的药物相互作用,我们需明确GOSCs及活性代谢产物对药物代谢酶和转运体的影响。通过查阅PubMed、中国知网及万方数据等数据库,检索到GOSCs药理作用相关文献46篇,GOSCs代谢转运和生物转化机制相关文献46篇及COPD相关文献6篇。作者对主要的GOSCs及活性代谢物的药理活性、生物转化机制,对主要的药物Ⅰ相、Ⅱ相代谢酶及药物转运体的调控机制进行综述,并结合目前主流COPD治疗药物的代谢机制,推测了药物联用可能发生的药物相互作用,以期为GOSCs的进一步开发和临床合理用药提供理论基础。

当归总多糖对小鼠肝脏药物代谢酶活性具有调节作用

目的:观察当归总多糖(ASP)对正常及泼尼松龙(PSL)所致肝损伤小鼠肝脏药物代谢酶活性的影响。方法:PSL皮下注射15mg·kg-1,连续5d造成小鼠肝损伤。酶学测定Ⅱ相酶谷胱甘肽相关酶活性;测定细胞色素P450(CYP)含量、NADPH-细胞色素C还原酶、氨基比林N-脱甲基酶(AMD)及苯胺羟化酶(ANH)活性。结果:ASPig使正常小鼠肝微粒体及线粒体谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性升高,肝线粒体谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽还原酶活性无明显改变,对肝微粒体细胞色素P450酶系统有诱导作用。大剂量PSL使小鼠血清ALT明显升高,肝线粒体GSH含量明显下降,上述各项酶活性升高。ASP对PSL所致酶活性及GSH含量改变有恢复作用。结论:ASP具有调节肝脏药物代谢酶活性作用。

河南地区汉族人群药物代谢酶CYP2C19，NAT2和TPMT基因多态性分析(英文)

目的：了解细胞色素P450(cytochromes P450,CYP)2C19,N-乙酰基转移酶2(arylamine N- acetyltransferase 2,NAT2)和硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase,TPMT)基因常见的遗传多态性在河南地区汉族人群中的分布及其频率。方法：应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)对210名河南地区汉族人群的CYP2C19突变基因(*2和*3)、NAT2突变基因(*6和*7)和TPMT突变基因(*3A,*3B和*3C)进行检测。用聚合酶链反应-等位基因特异性扩增(PCR-ASA)对NAT2突变基因(*5)和TPMT突变基因(*2)进行检测。结果：CYP2C19*2和*3等位基因分布频率分别为34．76%和6．4%,同时携带2个等位突变基因的慢基因型频率占14．8%。NAT2*4(wt),*5(341C),*6(590A)和*7(857A)等位基因分布频率分别为59．1%,4．1%,26．4%和9．5%,慢基因型分布频率占19．5%。TPMT*3C等位基因分布频率为1．2%,未发现TPMT*2,TPMT*3A或TPMT*3B。结论：CYP2C19,NAT2和TPMT基因常见的遗传多态性在汉族人群中的分布及其频率与白人存在明显差异,这将有助于我国汉族人群临床药动学研究和给药剂量的确定。

盐酸小檗碱与环孢素A合用对小鼠肝药物代谢酶的影响

目的 阐明盐酸小檗碱与环孢素 A合用对药物代谢酶的影响。方法 采用分光光度法测定盐酸小檗碱、环孢素 A及二者合用时小鼠肝微粒体 CYP4 5 0、ERD、ADM和 GST的含量或活性。结果 ig给药 3和 6 d,盐酸小檗碱 (2 0 0 mg/ kg)对 CYP4 5 0、ERD没有明显的抑制作用 ,但对 ADM和 GST有抑制作用 ;环孢素 A(45 m g/kg)对 ERD、ADM和 GST均有抑制作用 ;盐酸小檗碱与环孢素 A合用对 CYP4 5 0、ERD、ADM和 GST均有明显抑制作用。结论 盐酸小檗碱与环孢素 A的组合是药物代谢酶 CYP4 5 0、ERD (CYP3A )、ADM (CYP1A1、2 B1、2 C11)和 GST的强抑制剂 。

中药有效成分对药物代谢酶的影响

目的 :综述近年来中药有效成分对药物代谢酶的影响的研究进展。方法 :查阅近年来国内外报道中药有效成分对药物代谢酶的影响的文献 ,进行分析、总结。结果 :黄酮及黄酮衍生物、呋喃香豆素化合物、贯叶连翘和丹参的有效成分等均可抑制或诱导药物代谢酶细胞色素P4 5 0、尿苷二磷酸 葡萄糖醛酸转移酶、谷胱甘肽S 转移酶 ,从而影响多种常用药物在体内、外的代谢。结论

中药与肝脏药物代谢酶之间的相互作用

肝脏药物代谢酶是决定中药复方体内过程的关键因素,复方中化学成分对药物代谢酶的抑制或诱导作用是中药复方在药动学层次上产生相互作用的主要机制.本文首先建立中药配伍与肝脏药物代谢酶的相互作用技术,在有效组分、有效部位和饮片三个层次发现中药与肝脏药物代谢酶之间的相互作用,筛选发现中药复方中对肝脏药物代谢酶的诱导或抑制成分,探索肝脏药物代谢酶对中药成分代谢作用的具体亚型,结合中药复方作用的体内过程,系统阐述中药成分与机体之间的相互作用,为中药配伍、药效和安全性评价提供理论依据,为建立基于肝脏代谢酶表达方剂整体性研究的新模式提供技术支撑.

环孢素A与盐酸小檗碱合用对大鼠肝脏和小肠药物代谢酶的影响

目的:研究盐酸小檗碱(berberine chloride,Ber)与环孢素 A(CsA)合用对大鼠肝脏和小肠药物代谢酶的影响。方法:采用分光光度法测定各给药组大鼠肝脏和小肠微粒体中红霉素 N- 脱甲基酶(ERD)、氨基比林 N 脱甲基酶(ADM)和谷胱甘肽转移酶(GST)的活性。结果:Ber组和Ber+CsA组能明显抑制肝微粒体中 ERD、ADM和 GST酶活性(P<0.05),而且 Ber+CsA组较CsA单用组有更明显的抑制作用(P<0.05)。Ber+CsA组还能明显抑制肠微粒体中 ERD、ADM和 GST酶活性(P<0.05)。结论:Ber与CsA合用时,能显著抑制大鼠肝脏和小肠药物代谢酶活性,这可能是Ber增加CsA血药浓度的一个重要机制。

肝病患者药物代谢酶细胞色素P450酶1A2、多态性N-乙酰化酶、黄嘌呤氧化酶活性的变化

目的 :以咖啡因为代谢探针 ,研究肝病患者咖啡因代谢物比值 (caffeinemetaboliteratios ,CMRs)的变化 ,探讨CMRs作为药物代谢酶细胞色素P45 0酶 1A2 (CYP1A2 )、多态性N 乙酰基转移酶 (NAT2 )、黄嘌呤氧化酶 (XO)的活性指标 ,用于调整某些药物用药方案的可行性。方法 :选择健康受试者 30例 ,慢性肝病受试者 30例。采用高效液相色谱 (HPLC)法测定受试者尿液中 5种咖啡因主要代谢物浓度 ,计算特定的CMRs。对研究结果进行统计学处理 ,对健康受试组与肝病受试组、慢性活动性肝炎受试组、代偿期肝硬化受试组的CMRs数据分别进行t检验 ,分别考察组间数据的差异性 ,判断肝病患者药物代谢酶CYP1A2、NAT2、XO的酶活性变化。结果 :肝病患者包括慢性活动性肝炎或代偿期肝硬化患者CYP1A2、NAT2活性显著降低(P <0 .0 5 ) ;而XO活性无显著性变化 (P >0 .0 5 )。结论 :可为临床调整经去甲基化。

抗结核药所致肝损害与药物代谢酶等基因多态性的关联性研究

肺结核是由结核分枝杆菌(MTB)感染引起的慢性传染病,是严重危害人类健康的传染病之一。抗结核药物所致肝损害(anti-tuberculosis drug-induced hepatotoxicity,ATDH)是结核病治疗过程中备受关注的问题。有关ATDH的致病机制尚不完全明确,深入探讨肝损害发生的机制显得尤为重要。抗结核药在体内经各种代谢酶及转运体作用形成毒性较低的产物,而这些酶的基因多态性很可能是影响ATDH的重要因素。本文就相关酶的基因多态性与ATDH致病原因作一概述。

植物药及果蔬对药物代谢酶P450活性的影响

中草药及其他植物药在我国及东南亚国家应用广泛,在欧美也逐渐受到重视,一些中草药及植物药可能诱导或抑制肝脏细胞色素P450(CYP)药物代谢酶,从而引起自身及其他合用药物代谢的改变,因此可能导致药物不良反应和药物相互作用。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测药物代谢酶基因多态性平台的建立

目的：建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术检测患者体内药物代谢酶基因多态性的平台。方法选取2013年10月～2014年6月在北京协和医院门诊就诊患者53例 EDTA抗凝外周血，提取全血基因组DNA，用 MALDI-TOF-MS技术检测53例患者药物代谢酶基因 CYP2C9＊2（rs1799853），CYP2C9＊3（rs1057910）， CYP2C19＊2（rs4244285），CYP2C19＊3（rs4986893），CYP2C19＊4（rs28399504），CYP2C19＊5（rs56337013）和 CYP2C19＊17（rs12248560）的单核苷酸多态性（SNP）位点，并用 Sanger测序法进行验证。结果用 MALDI-TOF-MS 技术可以同时完成53份样本，2个药物代谢酶基因，7个 SNP位点的检测。53例患者中，发现CYP2C19＊2（rs4244285）AG型25例， AA型6例，GG型22例，A等位基因频率为34.9％。CYP2C19＊3（rs4986893）AG型4例，GG型49例，A等位基因频率为3.8％。CYP2C9＊3（rs1057910）CA型5例，AA型48例，C等位基因频率为4.7％。未发现 CYP2C9＊2（rs1799853）， CYP2C19＊4（rs28399504），CYP2C19＊5（rs56337013）和CYP2C19＊17（rs12248560）位点突变。经与 Sanger测序法比较，两种检测方法结果的符合率为100％。结论成功建立 MALDI-TOF-MS技术检测药物代谢酶基因多态性的平台，该平台具有高通量、准确的特点，对个性化用药治疗具有重要的临床应用价值。

甘草对药物代谢酶以及化学药物体内代谢的影响

甘草对肝细胞色素P450(CYP450)酶活性具有诱导或抑制作用,对一些化学药物如氨茶碱、安替比林、丙米嗪、利多卡因、氯沙坦等的体内代谢产生影响,合用时使这些药物的药物代谢动力学发生改变,在临床应用过程中应注意。因此,需要进一步在人体内研究甘草提取物及其有效成分与其他药物的相互作用。从CYP450酶角度研究中药,有利于从分子水平探讨中药的作用机制或毒性机制,并有可能揭示中药之间或中药与西药产生相互作用的关系,防止临床配伍用药后的不良反应,从而提高中药临床应用的有效性与安全性,促进临床合理用药。本文综述了甘草对药物代谢酶以及化学药物体内代谢的影响。

Ⅰ、Ⅱ相药物代谢酶遗传多态性与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的关系

背景与目的目前药物代谢酶遗传多态性与化疗疗效关系的研究结果多不一致,本研究旨在探讨细胞色素P4501A1(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)、2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)、2D6(cytochrome P450 2D6,CYP2D6)和谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-transferase M1,GSTM1)基因多态性与晚期非小细胞肺癌化疗疗效以及与肺癌患者预后的关系。方法采用PCR和PCR-RFLP技术对肺癌患者4种药物代谢酶基因分型,并对他们进行5年跟踪随访。结果携带B型CYP1A1和缺陷性GSTM1肺癌患者比其它基因型患者化疗疗效好(P<0.001)。携带A型CYP1A1肺癌患者接受非铂类化疗药物治疗比B型和C型患者疗效好(P=0.041);携带缺陷性GSTM1肺癌患者接受铂类化疗药物治疗疗效比功能型患者疗效好(P=0.011)。4种酶对晚期非小细胞肺癌患者总生存期(overall survival,OS)没有明显影响(P>0.05)。结论 A型CYP1A1肺癌患者接受非铂类化疗药物治疗比B型和C型患者疗效好;缺陷性GSTM1肺癌患者接受铂类化疗药物治疗比功能型患者疗效好。4种酶基因多态对晚期非小细胞肺癌患者OS影响没有明显统计学差异。

脾肾阳虚大鼠脾中Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶活性变化的研究

【目的】观察脾肾阳虚状态下大鼠脾脏中主要Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶活性的改变。【方法】采用连续17 d灌胃大黄水煎液同时注射氢化可的松的方法复制大鼠脾肾阳虚模型,观察脾脏中6种Ⅰ相代谢酶(CYP2C19、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C8、CYP3A4)和4种Ⅱ相代谢酶[苯酚磺基转移酶(PST)、尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1(UGT1)、谷胱甘肽转移酶(GST)、雌激素硫酸转移酶(SULT1E1)]的活性变化。【结果】模型组PST、UGT1、GST、SULTl E1活性显著低于正常组(P<0.05或P<0.01);CYP1A2活性显著高于正常组(P<0.01),而CYP2C19、CYP2D6、CYP2C8、CYP3A4、CYP2C9等酶的活性无显著变化(P>0.05)。【结论】脾肾阳虚状态下脾脏药物代谢酶特别是II相代谢酶的活性会发生显著改变。

药物代谢酶CYP2D6和CYP2C19的基因多态性与个体化治疗

药物代谢酶的活性高低是决定药物代谢强度和持久性的主要因素。参与药物代谢的酶主要有细胞色素P450（cytochromep450，CYP450）同工酶、N-乙酰转移酶（N．acefyltransferase，NAT）、醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH）和酯酶（esterase）等，而在众多代谢酶中，CYP450酶起着非常重要的作用，它可代谢降解大约40％～50％的药物。CYP450酶又称混合功能氧化酶或单加氧酶，是一种以血红蛋白为辅基的B族细胞色素超家族蛋白酶，广泛存在于动物、真核有机体、植物、真菌和细菌中，是必不可少的结构酶。

外源性一氧化氮对大鼠肝脏抗氧化物酶和药物代谢酶活性的影响

用亚硝基铁氰化钠（ＳＮＰ）作为ＮＯ生成前体，以０，１，２，４和８ｍｇ·ｋｇ－１ｉｐ给予大鼠，每日一次，连续５ｄ，来研究外源性ＮＯ对大鼠肝脏细胞色素Ｐ４５０，苯胺羟化酶（ＡＨ），谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）等药物代谢酶和过氧化氢酶（Ｃａｔ），谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）等抗氧化物酶活性以及脂质过氧化的体内影响情况．结果表明外源性ＮＯ能明显降低大鼠肝脏ＳＯＤ，Ｃａｔ，ＡＨ的活性和细胞色素Ｐ４５０的含量（Ｐ＜０．０５），并且高剂量组还能明显促进脂质过氧化发生（Ｐ＜０．０５）。

基于药物代谢酶的中药十八反研究

"十八反"是中药药性理论的重要组成部分,是古今临床医家用药配伍禁忌的核心内容,几千年来指导和影响着中医临床安全用药。随着人类社会的进步和对医疗健康的需求不断提高,中药安全性问题日益受到社会广泛关注,而"十八反"则是目前中药安全性研究亟待解决的关键科学问题。"十八反"中药反与不反的客观界定及其科学本质的阐明,对完善中药配伍禁忌理论,丰富和发展中药配伍理论体系具有重大意义。细胞色素P450酶作为人体重要的Ⅰ相药物代谢酶系统,对药物代谢和药物之间的相互作用有着重要影响。中药以合并用药为主且其中许多成分或许为P450酶的底物、诱导剂或抑制剂,因此有可能存在基于P450酶的中药相互作用。本课题组将现代药理学中药物相互作用的分子基础P450酶引入中药相互作用的研究,对十八反中各组药物与药物代谢酶的关系进行了较系统的研究,为揭示一类基于药物代谢酶的中药相互作用模式,阐明中药配伍产生相反作用的分子机制和中药十八反配伍禁忌的科学内涵提供了实验依据。

临床前大鼠药物代谢酶CYP2D6亚型HPLC技术研究

目的:建立测定临床前大鼠药物代谢酶2D6亚型活性的 HPLC 方法。方法:HPLC 法测定大鼠尿液及肝微粒体中探针药物右美沙芬(DM)、其代谢物去甲右美沙芬(DX)及内标物丁丙诺啡(BP)的含量。采用 Hypersil-C_6H_5柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.01mol-L^(-1)磷酸二氢钾-0.01mol·L^(-1)已烷磺酸钠-乙腈-甲醇(33:33:80:54,v/v,pH4.0)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),荧光检测器激发波长280nm,发射波长310nm。结果:本方法稳定性良好,尿样 DM 在0.04～1.20mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9981),DX 在3.12～100.0mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9971)。肝微粒体重组样品 DM 在30.0～180.0mmol·L^(-1)内线性良好(r=0.9980),DX 在5.0～50.0mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9976),日内、日间样品 RSD 均小于10%,样品-20℃保存30d 后测定稳定良好,体外肝微粒体实验 RSD 小于10%。结论:本方法稳定、准确,可用于新药临床前药物代谢酶途径及药物相互作用研究。