鞘内药物分布的计算模拟和体外实验研究:关于注药容积、脑脊液搏动和药物摄取的参数研究

在临床医师进行鞘内药物输注治疗时,可供于确定输注参数设置的指南较少。本文的目的是通过研究输注参数设置、药物化学作用以及受试者个体化解剖学和脑脊液动力学,阐明本计算机模型预测药物生物分布的能力。采用影像学技术从受试者分别获得解剖学数据和脑脊液流动速度的数据,以此重建受试者个体化中枢神经系统计算机模型,并构建受试者个体化中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)台式模型。通过人体磁共振成像(MRI)数据的重建和优化,构建一种用于预测受试者个体化药物扩散的计算机模型。通过实验发现,脊髓MRI测量的脑脊液速度大小与受试者个体化计算机模型的流场相符,台式模型的药物扩散情况与相应的计算模型中的示踪剂扩散情况相符。通过模拟表明,多次注药可将药物靶向输注至颈段和胸段,而连续药物输注泵和单次给药可将药物靶向输注于腰段。通过多次给药并且冲洗可以将药物靶向输注于组织。本研究提出的指导涉及了组织药物摄取能力的药物特异性动力学,可帮助医师为病人选择临床输注参数,优化治疗方案。

耐甲氧西林金葡球菌对环丙沙星摄取的研究

１１株耐甲氧西林金葡球菌（ＭＲＳＡ）对１４种抗菌药物的敏感度进行了测定，除２株ＭＲＳＡ对环丙沙星敏感外，其他９株ＭＲＳＡ均对环丙沙星耐药，最低抑菌浓度（ＭＩＣ）≥１６ｍｇ／Ｌ。此组耐药菌株对其他受试的氟喹诺酮类药物也呈交叉耐药。ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取在２～５ｍｉｎ内达到稳定态。１９９０年以前的ＭＲＳＡ菌株对环丙沙星的摄取几乎不受氰氯苯腙（ＣＣＣＰ）影响；而１９９０年以后的菌株对环丙沙星的摄取量大多受ＣＣＣＰ影响，ＣＣＣＰ（１０ｍｇ／Ｌ）可增加ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取，为不加ＣＣＣＰ时的１．５３倍。此结果提示能量依赖性流出系统的改变与ＭＲＳＡ对氟喹诺酮耐药有关。诱导耐药株ＭＲＳＡ８７－９０Ｒ对环丙沙星的摄取量较诱导前（ＭＲＳＡ８７－９０）明显为少，但两者对药物的摄取均不受ＣＣＣＰ影响。

葛根素的SH-SY5Y细胞摄取及其改善Aβ1-42诱导细胞损伤的研究

目的建立葛根素的SH-SY5Y细胞摄取定量分析方法,筛选药物摄取条件并研究其对Aβ1-42诱导细胞损伤的细胞存活率的影响。方法 CCK-8法检测分别含葛根素0、20、40、60、80、100、200、300、400、500μg/mL 10个浓度梯度的SH-SY5Y细胞存活率,确定药物的摄取最高浓度;HPLC法测定细胞内药物含量,并对其进行方法学的专属性、回收率、精密度考察;药物摄取条件筛选分别对1、2、6、12、24 h 5个摄取时间点及20、40、60、80、100μg/mL 5个摄取浓度进行药物摄取定量考察;CCK-8法检测葛根素对Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞损伤的细胞存活率的影响。结果葛根素浓度在100μg/mL以下时,SH-SY5Y细胞存活率在90%以上,选择药物浓度100μg/mL作为最高摄取浓度;葛根素在0.2~100μg/mL浓度范围内线性良好,回归方程为y=104684x+3818.1(R2=0.999 9),专属性、回收率、精密度考察均满足要求;SH-SY5Y细胞中葛根素摄取量在6 h达到最大并且在最高摄取浓度范围内呈剂量依赖性;采用Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞建立AD细胞模型,与对照组相比,模型组细胞经Aβ1-42处理后,细胞活力显著减弱(P<0.01),细胞存活率为56%。与模型组相比,葛根素5、10μg/mL组细胞存活率差异无统计学意义,葛根素20、40、80、100μg/mL组SH-SY5Y细胞存活率显著提高,分别为71.10%、79.71%、83.41%、84.77%(P<0.01)。结论对于SH-SY5Y细胞葛根素的最佳摄取时间和浓度分别是6 h和100μg/mL,葛根素能剂量相关地改善Aβ1-42对SH-SY5Y细胞增殖的抑制,其有效范围在20~100μg/mL。

阴沟杆菌外膜通透性改变与其耐药性关系的研究

用头孢噻肟梯度平板法多步诱导一株阴沟杆菌达稳定耐药 ,经药敏测定表明其对氟喹诺酮类、头孢菌素类、青霉素类交叉耐药。对耐药株外膜蛋白行 SDS- PAGE电泳 ,结果发现 36、39、40 k D等外膜蛋白带含量下降 ,与文献报告一致。用扫描透射电镜分别观察了阴沟杆菌的敏感株与耐药株 ,结果诱导耐药菌菌体变短 ,外膜皱褶明显 ,间隙加宽 ,胞内空泡减少 ,提示外膜屏障功能加强 ,细菌代谢不活跃 ,进一步以 HPL C测定细菌耐药前后对环丙沙星的摄取量 ,耐药菌与敏感菌摄取曲线峰浓度比 1∶ 1.2 8且耐药株中环丙沙星浓度低于临界耐药浓度 1mg/ L,这和药敏试验结果一致。本实验结果提示阴沟杆菌外膜通透性的下降可导致菌株对各类抗生素的交叉耐药 。

妇幼卫生

9800027 未成熟儿和母乳喂养[日]/高田昌亮//周产期医学.-1996,26(4).-531～534 友谊医9800028 母子同室和母乳、授乳:母乳育儿[日]/福田雅文//周产期医学.-1996,

白桦脂酸在Caco-2细胞中的摄取及转运机制研究

目的:研究白桦脂酸在人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中的摄取与转运机制。方法:建立Caco-2细胞模型并进行验证,液相色谱-质谱联用(LC-MS)测定样品中白桦脂酸含量,同时考察白桦脂酸浓度和转运体抑制剂维拉帕米、丙磺舒对其在Caco-2细胞中的摄取及转运的影响。结果:Caco-2细胞模型建立成功,LC-MS可以准确测定样品中白桦脂酸含量,白桦脂酸250、175、100μg/mL组转运实验表观渗透系数Papp(AP→BL)分别为1.40×10^(-7)、1.38×10^(-7)、1.31×10^(-7)cm/s(P>0.05),外排率(ER)均小于1.5;摄取实验单位质量蛋白药物摄取量分别为0.857、0.781、0.661μg/mg(P<0.05)。结论:白桦脂酸跨膜渗透性差,摄取转运机制主要为被动扩散,无明显外排现象,转运体抑制剂维拉帕米、丙磺舒对其摄取转运无明显影响。

基于“鼻-脑”通路细胞模型组探索相对分子质量及粒径因素对药物制剂经鼻入脑的影响

目的基于"鼻-脑"通路体外细胞模型,探索药物制剂经鼻入脑的影响因素。方法将Calu-3细胞与嗅神经鞘细胞(OECs)细胞共培养,构建"鼻-脑"通路细胞模型组。以荧光素异硫氰酸酯右旋葡萄糖苷(FD)和荧光纳米银粒子(AgNPs)为模型药物,探索药物相对分子质量(Mw)因素及制剂粒径因素对药物经鼻入脑的影响。结果 FD随Mw增大其跨细胞单层膜转运表观渗透系数(Papp)减小;OECs对不同Mw FD的摄取在90 min后摄取量趋于饱和,随其Mw增大,相同摄取时间OECs摄取量有明显下降趋势。不同粒径荧光AgNPs在"鼻-脑"多通路细胞模型组Calu-3单层的Papp随纳米粒的粒径增大而减小,粒径<40 nm,其在Calu-3的转运特性表现为中等吸收(1×10-6<Papp<10×10-6),粒径>60 nm,其转运特性为难吸收(Papp<1×10-6);OECs对不同粒径荧光AgNPs的摄取在60min趋于饱和且随其粒径增大,相同摄取时间OECs摄取量有明显下降趋势。结论药物Mw大小及纳米制剂的粒径对于药物经鼻转运入脑具有重要影响,Mw<4 000的药物,粒径<40 nm的纳米粒子具有更好转运和摄取特性。

二氢噻吩并吡啶-查尔酮衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性研究

以2-噻吩乙胺与自制的查尔酮酸进行酰化反应得到酰胺类中间体5a~5j,经Bischer-Napieralski环合反应合成了10个未见报道的二氢噻吩并吡啶-查尔酮衍生物6a~6j,再经去氢反应获得2个噻吩并吡啶-查尔酮衍生物7a和7b.通过噻唑蓝(MTT)法对11种细胞进行体外抗癌活性及安全性测试.结果表明,化合物6a(p-F)、6d(o-Br)和6h(m-OCH3)对HeLa、SGC-7901细胞的抗癌活性优于紫杉醇.当短时间处理(<4 h)时,6j(3,4,5-OCH3)在不影响正常细胞MCF-10A的情况下对癌细胞MCF-7显示强效抗癌效果,值得进一步研究和开发.

Drug design based on the function of membrane transporters in drug absorption,distribution,metabolism and excretion

Membrane transporters mediate the influx and efflux of various drugs,and play essential roles in drug absorption,distribution,metabolism and excretion（ADME）.The unique characteristics of membranes transporters potentiate them as targets for developing drugs with ideal pharmacokinetics profiles,including targeted distribution,improved clinical efficacy and low adverse reaction.In this review,we summarize the tissue-specific expression,transport functions and substrates profiles of the major influx and efflux transporters,including solute carrier（SLC） superfamily and adenosine triphosphate（ATP）-binding cassette（ABC） superfamily.Moreover,we describe examples of successful drug or prodrug design based on the function of transporters that yielded drugs with excellent ADME properties.Lastly,we discuss the in vitro and in vivo methods that are broadly applied in the drug designing process to study the interactions between the drugs and the transporters.