马尔尼菲青霉菌药靶基因发掘与利用

随着免疫抑制剂、深度化疗、广谱抗生素等的广泛应用,真菌感染尤其是条件致病真菌感染在艾滋病、恶性肿瘤等病人中发病率日趋升高,成为艾滋病、恶性肿瘤等患者的主要致死因素。其中马尔尼菲青霉菌感染已被公认是艾滋病指征之一。本文论述了马尔尼菲青霉菌药靶基因发掘与利用。

藤龙补中汤对大肠癌RKO细胞癌药靶基因表达的影响

目的 观察藤龙补中汤对人大肠癌RKO细胞癌药靶基因表达影响。方法 藤龙补中汤作用RKO细胞,TRIzol试剂提取RNA,试剂盒纯化RNA,药靶基因PCR芯片(Cancer Drug Targets PCR Array)检测基因表达。结果 藤龙补中汤作用RKO细胞后,PLK3和TP53表达升高,ABCC1、AURKA、BCL2、BIRC5、CDK2、CDK4、FLT4、HDAC1、HIF1A、MDM4、MTOR、NFKB1和PLK1表达降低,涉及细胞增殖、细胞周期、凋亡、细胞衰老、多药耐药、转移、淋巴管生成和表观遗传修饰。结论 藤龙补中汤可调控RKO细胞多个癌药靶基因表达,与藤龙补中汤对大肠癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、细胞衰老、转移和表观遗传作用相关;藤龙补中汤还可能对大肠癌多药耐药和淋巴管生成有抑制作用。

肝靶向基因给药系统AsOR-PL+PEG-PEI的研究

目的:研制含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的肝靶向的DNA给药系统。 方法:分别制备AsOR-PL偶合物及PEG-PEI偶合物,然后按照不同的比例先后与报告基因DNA形成复合物,再进行Huh-7细胞的体外转染试验和静脉给药后小鼠体内的表达试验。 结果:AsOR-PL/PEG-PEI/DNA复合物对受体阳性的Huh-7细胞具有较高的转染效率;小鼠尾静脉给药后能够在肝脏特异性表达。 结论:含有靶向配基、DNA聚合亚基、溶酶体活性成分及聚乙二醇等多种组分的载体系统能将DNA选择性的投放于小鼠肝脏,显示了较好的应用前景。

接受中药治疗的慢性痛风性关节炎患者用药规律探讨、核心药物疾病共同靶基因分析

目的探讨接受中药治疗的慢性痛风性关节炎患者用药规律,筛选核心药物、慢性痛风性关节炎共同作用靶基因,并分析共同靶基因的生物学作用及信号通路。方法以2020版《中国药典》和《中药学》为基础,针对138首慢性痛风性关节炎的临床有效处方,运用中医传承辅助平台(V2.5)对药物的使用频率,四气、五味、归经、功效分类和处方模式的关联规则、聚类分析等进行分析,并据高频药物及关联规则的最终结果综合分析筛选出核心药对,通过TCMSP检索核心药对的化学成分及其治疗靶点,与Genecards和OMIM等4个数据库共同筛选出的慢性痛风性关节炎靶点相交集,获得共同靶基因,经STRING11.0数据库构建共同靶基因的PPI网络。用R语言对共同靶基因进行生物学功能分析。结果治疗慢性痛风性关节炎的中医药物共涉及中药237味,频次≥20次药物25味;牛膝、薏苡仁、苍术为最高频药物;四气以温、平、寒为主;五味以甘、苦、辛为主;多归肝、脾、肾经;功效分类以补虚药为主,利水渗湿药、活血化瘀药次之;获得高频药组16组,新方2首。“黄柏-牛膝-苍术”与慢性痛风性关节炎共同靶基因38个,据PPI网络关联度截取关键靶基因20个,前10位分别为IL-6、TNF、IL1B、CXCL8、PPARG、CCL2、IL10、MMP9、PTGS2、VCAM1。共同靶基因的基因本体功能主要有对脂多糖的反应,对细菌源性分子的反应以及抗氧化反应等,参与的信号通路有20条,主要参与脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路。结论慢性痛风性关节炎临床用药常寒温并用,补泻兼施,治疗以“泄浊利湿,化瘀通络,补益肝脾肾”为主;“黄柏-牛膝-苍术”的作用靶基因主要有IL-6、TNF、IL1B、CXCL8(IL8)、PPARG、CCL2,基因本体功能有对脂多糖的反应等生物,主要参与脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路等。

非侵入性方法检测幽门螺杆菌耐药性的价值

目的评价非侵入性方法检测幽门螺杆菌(Hp)耐药性的临床应用价值。方法选取深圳大学总医院2022年1月至5月呼气试验(UBT)及快速尿素酶试验(RUT)检测双阳性的56例患者为研究对象,取其胃黏膜进行Hp培养并行药敏试验,同时取其胃黏膜、唾液、粪便进行多靶点耐药基因检测。结果对56份Hp感染样本进行检测及培养,PCR法复检阳性者有42例(75%),培养阳性者有40例(71.4%),培养及PCR法证实Hp均阳性共39例(69.64%)。以Hp培养法为金标准,PCR法鉴定Hp阳性的灵敏度为97.50%、特异度为81.25%、一致率为92.85%。药敏试验提示本研究的耐药情况为甲硝唑(94.87%)>克拉霉素(30.77%)>左氧氟沙星(25.64%)>阿莫西林(2.56%)>四环素(0%)和呋喃唑酮(0%)。以药敏试验为金标准,巢式PCR法对胃黏膜、粪便、唾液分别行多靶点耐药基因检测,预测Hp对克拉霉素耐药性的灵敏度为58.30%、27.27%、27.27%,特异度为96.30%、100.00%、100.00%,一致率为79.49%、78.38%、78.95%;预测Hp对左氧氟沙星耐药性的灵敏度为20.00%、0%、0%,特异度为86.21%、96.55%、96.67%,一致率为69.23%、77.78%、77.78%;预测Hp对阿莫西林耐药性的灵敏度均为0%,特异度为100.00%、94.87%、100.00%,一致率为97.44%、94.87%、97.44%;预测四环素Hp对耐药性,灵敏度均为0%,特异度及一致率均为100.00%;预测Hp对甲硝唑耐药性的灵敏度为100.00%、78.79%、100.00%,特异度均为0%,一致率为84.87%、76.47%、94.59%。以药敏实验为金标准,巢式PCR法对胃黏膜中Hp耐药基因检测,预测Hp对呋喃唑酮耐药性的灵敏度均为0%,特异度为64.10%。结论胃黏膜组织行巢式PCR法多靶点耐药基因检测,预测Hp对克拉霉素耐药一致率较高,有一定临床使用价值。在无法获得胃黏膜时,粪便和唾液行克拉霉素多靶点耐药基因检测预测Hp耐药性仍有一定意义。

参麦注射液治疗血管性痴呆的网络药理学作用机制研究

目的:采用中药分子机理生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)、中药系统药理学(TCMSP)数据库在线分析工具和FunRich软件预测参麦注射液的主要化学成分、药靶基因及功能。并同治疗血管性痴呆的西药石杉碱甲、茴拉西坦、尼莫地平、多奈哌齐的药靶基因作比对,以期阐述参麦注射液治疗血管性痴呆的药理学作用机制。方法:采用TCMSP和BATMAN-TCM数据库预测红参和麦冬的化学成分及其药靶基因。检索Drugbank数据库提取石杉碱甲、茴拉西坦、尼莫地平、多奈哌齐的药靶基因。利用FunRich软件预测靶基因功能及富集的通路。结果:参麦注射液作用靶基因同尼莫地平、茴拉西坦、多奈哌齐的部分靶基因一致。红参中化合物人参皂苷Rf(ginsenoside Rf)作用于CYP3A4,β-榄香烯(Beta-Elemene)作用于CACNA1D;麦冬中化合物豆甾醇(Stigmasterol)作用于CACNA1D、NR3C2;麦冬二氢高异黄酮E(Ophiopogonanone E)作用于DRD2;尿苷(Uridine)作用于NOS1;Stigmasterol作用于IL1B。20个靶基因细胞组分主要集中在电压门控钙通道(Voltage-gated calclum channel complex),细胞质膜(plasma membrane);细胞功能主要集中于Voltage-gated ion channel activity;生物过程主要集中于转运(transport)。结论:参麦注射液主要作用靶基因和上述几种西药作用靶基因部分重叠,所以其可能同尼莫地平等药物具有相类似的功能,临床可应用于血管性痴呆的治疗。