中国荷斯坦公牛不同耐冻性精子的蛋白质组学分析

在以冷冻精液和人工授精为主导技术的奶牛繁育体系中,公牛精液的冻后活力备受关注。精子的耐冻性是影响精液冻后活力的关键。已有研究发现解冻后的精子活力在不同公牛之间存在显著差异。因此,迫切需要从遗传水平挖掘影响精子耐冻性的关键基因和分子标记,为提高我国种公牛的精子耐冻性提供理论依据。本研究筛选了精子高耐冻组公牛9头(鲜精活力>0.65,冻后活力>0.40)和精子低耐冻组公牛6头(鲜精活力>0.65,冻后活力≤0.27),使用Label-free蛋白质组学技术对15头公牛的精子细胞进行定量蛋白质组学分析和生物信息学分析。结果显示,在高、低耐冻组间共检测到432个差异表达蛋白,主要富集在“代谢途径”和“氧化磷酸化”等与精子能量供应密切相关的生物学过程。差异表达蛋白互作网络分析显示与能量代谢相关的蛋白之间具有强相互作用。与QTL数据库比对,发现9个差异表达蛋白与已定位到的冻后活精子百分比性状关联基因重叠。最终筛选到HSPA1A、BSP3、ACSL4等重要候选蛋白可作为公牛精子耐冻性的潜在生物标志物。本研究揭示了具有不同耐冻性公牛精子的蛋白质组特征,这些发现为我国种公牛冻后精液品质的分子选育提供了重要信息。

德系西门塔尔×荷斯坦公牛的屠宰性能和肉质性状分析

为探讨德系西门塔尔牛冻精改良荷斯坦奶牛的后代西荷杂公牛(西门塔尔×荷斯坦)育肥后的生长和屠宰性能、肉质性状的差异,为该品种改良荷斯坦奶牛杂交模式提供基础,本试验分别选取9头22月龄的西荷杂公牛和荷斯坦奶牛公牛,在相同日粮水平和相同饲养管理条件下饲养166 d后屠宰,分别测定2组公牛的生长性能、屠宰性能及肉质性状。结果表明:西荷杂公牛在空体重、胴体重、净肉重、肉骨比、屠宰率和净肉率上较荷斯坦牛有较大幅度提高,尤其是西荷杂交公牛的特级肉块、高档肉块、优质肉块和一般肉块重高于荷斯坦公牛(P<0.05),但2种牛的一般肉块总重占总肉重的比例差异不显著;在肉质性状方面西荷杂交公牛的背最长肌和股二头肌的蛋白质含量和肌纤维密度高于荷斯坦公牛(P<0.05),肌纤维剪切力低于荷斯坦公牛(P<0.05)。西荷杂交公牛在胴体性状方面杂交优势明显,在净肉重、屠宰率、净肉率上较荷斯坦牛有较大幅度提高,尤其是肌肉的蛋白质含量增加较为突出,此外,西荷杂交公牛背最长肌和股二头肌肉质较嫩。

抗菌肽对荷斯坦公牛生产性能和血清抗氧化能力的影响

为研究饲粮中添加抗菌肽对育肥期荷斯坦公牛的生产性能及血清抗氧化性能的影响,试验选取10月龄、健康且初始体重为(345.19±3.89)kg的荷斯坦公牛12头,随机分为2组。对照组(CK)饲喂基础饲粮,抗菌肽组(AP)在每头牛的基础饲粮中添加8 g·d^(-1)抗菌肽。试验期270 d,每30 d进行一次称重。试验期结束后静脉采血,测定血液生理指标和抗氧化指标,并于屠宰后测定屠宰性能、胴体性状和肌肉营养成分含量。结果表明:1)AP组的终末体重(FBW)显著高于CK组(P<0.05),料重比(F/G)显著低于CK组(P<0.05)。2)AP组的单核细胞百分比、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽S-转移酶(GSH-ST)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)均显著高于CK组(P<0.05),丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)显著低于CK组(P<0.05)。3)AP组的宰前活重、肉重、骨重、热胴体重、72 h冷胴体重和皮下脂肪覆盖率、高档肉重和优质肉重以及肌肉粗脂肪(EE)和粗蛋白(CP)含量均显著高于CK组(P<0.05),水分和粗灰分(Ash)显著低于CK组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加抗菌肽可以提高荷斯坦公牛的生长性能、屠宰性能和胴体性状,增强抗氧化功能,提高肌肉营养成分含量,改善肌肉品质。

N-氨甲酰谷氨酸对荷斯坦公牛胃肠道微生物组成的影响

本试验旨在研究添加不同水平的N-氨基甲酰谷氨酸(NCG)对荷斯坦公牛瘤胃及直肠微生物组成的影响。试验选择45头健康荷斯坦公牛[初始体重(478.00±13.66)kg,12~13月龄],随机分成3组,每组15头。3组公牛分别饲喂在基础饲粮中添加0(Ⅰ组)、15(Ⅱ组)、25 g/(d·头)(Ⅲ组)的NCG的试验饲粮。试验预试期7 d,正试期90 d。结果表明:随着NCG添加水平的增加,瘤胃微生物群多样性未受显著影响(P>0.05),但添加NCG后拟杆菌门的相对丰度呈线性降低趋势(0.050.05);从门水平上分析,添加NCG对直肠微生物区系无显著影响(P>0.05),但随着NCG添加水平的增加,Patescibacteria相对丰度呈二次曲线变化(0.050.05)。综上所述,除瘤胃中瘤胃球菌属1以及直肠中双歧杆菌属、瘤胃球菌科UCG-010之外,添加NCG对瘤胃和直肠微生物相对丰度均无显著影响。

不同饲养水平对荷斯坦公牛网胃和瓣胃器官发育及组织形态的影响

本试验旨在研究不同饲养水平对6月龄荷斯坦公牛网胃和瓣胃器官发育及组织形态的影响。选择9头健康的荷斯坦公牛,随机分为3组,日粮精粗比分别为6∶4(Ⅰ组)、5∶5(Ⅱ组)和4∶6(Ⅲ组),试验3个月后,通过制作组织切片及电镜观察,测定3组试验牛网胃和瓣胃官发育及组织形态的变化情况。试验结果表明:(1)各试验组网胃和瓣胃的黏膜结构均比较完整;(2)网胃和瓣胃的鲜重及鲜重/体重随日粮中粗料比例的增加而提高,Ⅲ组网胃和瓣胃的鲜重比Ⅰ组分别高出21.90%和19.93%(P<0.05);鲜重/体重方面,Ⅲ组比Ⅰ组分别高出29.86%和27.68%(P<0.05);(3)随日粮中粗饲料含量的增加,网胃和瓣胃的组织形态发育情况更好。通过与其他2试验组相比,Ⅲ组网胃和瓣胃的角化层厚度、固有膜宽度及乳头的发育显著增加(P<0.05)。结论:随着日粮中粗饲料的适当增加,促进了荷斯坦公牛网胃和瓣胃器官发育及组织形态变化。

饲粮能量和蛋白质水平对荷斯坦公牛生长育肥性能及血液生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮不同能量和蛋白质水平对荷斯坦公牛生长育肥性能及血液生化指标的影响，筛选出荷斯坦公牛生长育肥期适宜的饲粮营养水平参数。选取4～5月龄体重（约180 kg）相近的健康荷斯坦公牛30头，随机分为Ⅰ（低能量低蛋白质水平饲粮）、Ⅱ（中能量中蛋白质水平饲粮）和Ⅲ组（高能量高蛋白质水平饲粮），每组10头。试验期362 d。结果表明：1）与Ⅰ组相比，Ⅲ组日增重（DG）显著提高（P＜0．05），Ⅱ组DG有增加的趋势（P＞0．05）。Ⅲ组的料重比低于Ⅰ和Ⅱ组（P＞0．05）。2）Ⅲ组血液中葡萄糖含量和生长激素含量比Ⅰ组显著提高（P＜0．05），尿素氮含量比Ⅰ组显著降低（P＜0．05），Ⅱ和Ⅲ组之间无显著差异（P＞0．05）。3）粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率随饲粮能量和蛋白质水平的提高而增加，Ⅲ组显著高于Ⅰ组（P＜0．05）。综上，依据荷斯坦公牛代谢体重（ W0．75，kg）和DG（ kg）推算出荷斯坦公牛生长育肥期（180～500 kg 体重阶段）产奶净能[ NEL， MJ／（ d ·头）]和小肠可消化粗蛋白质[IDCP，g／（d·头）]需要量的计算公式分别为：NEL＝0．57W0．75＋1．02DG（R2＝0．9368）；IDCP＝2．65W0．75＋202．03DG（ R2＝0．8929）。

日粮精粗比水平对荷斯坦公牛消化器官发育及血液生化指标的影响

试验旨在研究日粮精粗比水平对荷斯坦公牛血液生化指标及内脏器官发育的影响。选择9头健康荷斯坦奶公牛,随机分为3个处理组,日粮精粗比分别为6∶4(处理Ⅰ组)、1∶1(处理Ⅱ组)和4∶6(处理Ⅲ组),试验3个月后对各处理组消化道器官发育及血液生化指标进行测定。结果表明:瘤胃和网胃的鲜重及鲜重/体重随日粮中粗料的增加而提高,其中Ⅲ组瘤胃和网胃的鲜重比Ⅰ组分别高出22.36%和21.29%(P<0.05);鲜重/体重方面,Ⅲ组比Ⅰ组分别高出26.42%和25.33%(P<0.05);精粗水平对瓣胃和皱胃的发育无显著影响;随着日粮精粗水平的提高,血液中总蛋白和谷丙转氨酶含量不同程度地增加(P<0.05),而尿素氮含量则呈现下降趋势(P<0.05);日粮精粗水平对血糖和谷草转氨酶含量的影响不大。本试验说明粗饲料可促进荷斯坦公牛瘤胃和网胃的器官发育,而精饲料则有增加机体血液总蛋白和谷丙转氨酶含量的趋势。

维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响

试验旨在研究维生素C(VC)对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻(37.5℃,30 s)后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、23、h精子活率与对照组差异显著(P<0.05)。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著(P>0.05),但数值依然高于对照组。解冻后存放2、34、h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著(P<0.05),24、h与对照相比差异不显著(P>0.05),但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。

日粮能量和蛋白质水平对荷斯坦公牛肉品质的影响

本试验旨在研究日粮中不同能量和蛋白质水平对荷斯坦公牛肉品质的影响。本试验选取4～5月龄的健康荷斯坦公牛30头，随机分为3组，I组（低能量低蛋白）、Ⅱ组（中能量中蛋白）、Ⅲ组（高能量高蛋白），试验期362d。结果表明：屠宰率、胴体产肉率、净肉率和眼肌面积均以Ⅲ组最高；pH、蒸煮损失、剪切力和失水率各试验组之间无显著差异，但随日粮能量和蛋白质水平的提高，pH呈增加趋势，蒸煮损失和剪切力呈下降趋势（P〉O．05）；与I组相比，Ⅲ组肉中水分含量随日粮能量和蛋白质水平提高而显著下降（P〈0．05），粗蛋白质和粗脂肪含量随日粮能量和蛋白质水平提高而显著上升（P〈0．05）；随着日粮能量和蛋白质水平的提高，背最长肌饱和脂肪酸（SFA）含量下降，单不饱和脂肪酸（MUFA）和多不饱和脂肪酸（PUFA）含量提高；EPA和DHA各试验组之间无显著差异，但随着日粮能量和蛋白质水平的提高呈增加趋势。综上所述，在本试验吾件下，提高日粮能量和蛋白质水平可以提高公牛的肉品质。

中药饲料添加剂对荷斯坦公牛血液生化指标及生长发育的影响

研究中药饲料添加剂对荷斯坦公牛生长发育及血液生化指标的影响。结果表明,中药饲料添加剂能显著增加荷斯坦公牛的体重,添加中药量1%和2%的组平均日增重比空白对照组分别提高了39.91%和52.13%,饲料转化率比空白对照组分别提高了28.61%和34.28%,头均日增重收入比空白对照组分别提高51.58%和60.35%;血清中的葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)随着药量的增加而增加;中药饲料添加剂可降低牛血清中胆固醇(CT)的含量及血清酶如谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)等的活性。

PPARγ基因在荷斯坦公牛不同组织部位表达差异性研究

为研究PPARγ基因在荷斯坦公牛组织及月龄间的相对表达差异性。运用实时荧光定量PCR法检测了PPARγ基因在15和17月龄荷斯坦公牛脂肪组织(背部脂肪、腰部脂肪、肾周脂肪、肠系膜脂肪)和肌肉组织(背最长肌和半腱肌)间的相对表达差异性。结果表明:PPARγ基因的表达在荷斯坦公牛不同月龄间没有发现差异性,而组织间差异表达分析表明:肠系膜脂肪、肾周脂肪和腰部脂肪的相对表达量显著高于背最长肌和半腱肌(P<0.05);肠系膜脂肪和肾周脂肪相对表达量显著高于背部脂肪(P<0.05)。由此可见,PPARγ基因在荷斯坦公牛不同部位脂肪组织和肌肉组织中均有表达且部位不同表达不同,存在部位差异性。

中国荷斯坦公牛脊椎畸形综合征和尿苷酸合酶缺乏症遗传缺陷检测

本研究旨在研究中国荷斯坦公牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)和尿苷酸合酶缺乏症(Deficiency of uridine monophosphate synthage,DUMPS)两种遗传缺陷的携带者及系谱来源。通过PIRA-PCR和PCR-RFLP方法对参加全国青年公牛联合后裔测定和国家良种补贴项目的、来自全国27个公牛站的691头荷斯坦公牛分别进行了CVM和DUMPS的遗传缺陷检测,共发现34头CVM和1头DUMPS隐性有害基因携带者公牛,携带者比例分别为4.92%和0.14%,隐性有害等位基因频率分别为2.46%和0.07%。经过系谱分析发现,其中28头CVM携带者均为美国公牛Carlin-M Ivanhoe Bell的后代,另外6头因系谱不完整而无法查询1头DUMPS携带者为美国公牛Skokie Sensation Ned后代因此,我国有必要尽快建立荷斯坦牛隐性遗传缺陷监控体系并进行系谱标注,通过青年公牛预选和选种选配,避免携带者公牛进入后裔测定和良种补贴项目,以逐步降低我国奶牛群体中隐性有害等位基因频率,为提高奶牛群体质量提供依据。

饲喂苹果渣与麦秸混合青贮对荷斯坦公牛增重及血液生化指标的影响

为分析苹果渣麦秸混合青贮饲料替代部分玉米黄贮对荷斯坦公牛增重性能、血液生化指标及经济效益的影响,选取了月龄、体重相近的健康牛52头,采用配对试验设计分为试验组(60%苹果渣青贮+40%玉米黄贮)和对照组(100%玉米黄贮),进行了饲养试验。结果显示:①试验组的平均日增重、饲料转化率相比对照组分别提高18.8%、15.5%,差异显著(P<0.05),而且饲料成本降低3.5%;②试验组和对照组的血液生化指标无显著差异(P>0.05);③从经济效益角度分析,试验组比对照组头均多盈利233.52元。说明用苹果渣麦秸混合青贮饲料替代60%的玉米黄贮,对公牛血液各项生化指标无影响,且可显著提高日增重和饲料转化率,同时降低饲养成本。

脂联素基因在荷斯坦公牛不同组织部位的表达差异

【目的】研究脂联素基因在荷斯坦公牛不同组织及月龄间的相对表达差异性,为脂联素基因作为荷斯坦公牛育肥指标的分子辅助标记提供依据。【方法】运用实时荧光定量PCR法检测了脂联素基因在15和17月龄荷斯坦公牛脂肪组织(背部脂肪、腰部脂肪、肾周脂肪、肠系膜脂肪)和肌肉组织(背最长肌和半腱肌)间的相对表达差异性。【结果】15月龄时脂联素基因在荷斯坦公牛肾周脂肪和肠系膜脂肪中的相对表达量极显著高于腰部脂肪、背部脂肪、背最长肌和半腱肌(P<0.01),17月龄时仅显著高于背最长肌和半腱肌(P<0.05);17月龄时该基因在背部脂肪中的相对表达量显著高于15月龄时(P<0.05)。【结论】脂联素基因在15和17月龄荷斯坦公牛脂肪组织和肌肉组织中均有表达,且在脂肪组织和肌肉组织间具有组织表达差异性。

不同营养调控剂对荷斯坦公牛育肥后期生产性能的影响

选择60头450kg左右的荷斯坦公牛,依据体重和类型随机分为3组,试验1组和试验2组分别使用不同的营养调控剂,基础日粮一致;对照组仅饲喂基础日粮。试验1组使用营养调控剂A,试验2组使用营养调控剂B,剂量均为100g/d。结果表明,使用2种不同营养调控剂配合基础日粮饲喂荷斯坦公牛,其正试期平均日增重分别为2.10和2.28kg,试验2组平均日增重明显高于对照组,差异显著(P<0.05);经济效益明显增加,试验1组和试验2组增重价值、育肥收入和日均收入都明显高于对照组,经济效益以试验2组为最佳。

荷斯坦公牛泌乳量育种值的BLUP评价及分析

以公牛女儿数大于 1 0头为限制因子 ,建立线性模型 yijk=μ+ hi+ sj+ eijk,对安徽荷斯坦公牛泌乳量的育种值进行 BLUP评定。分析结果表明 :估计育种值排序在前的公牛女儿数并不是最多的 ,在泌乳量这一生产性状的选择育种上表现优秀的种公牛并没有得到充分利用 ;对部分种公牛在泌乳量估计育种值中排序与其在体型评定中排序进行比较 ,有一定的不一致性。

荷斯坦公牛生长性能与血清中GPT、GOT及LDH活性的相关性研究

为探讨不同生长阶段荷斯坦公牛生长性能血清中GPT、GOT及LDH活性的相关关系,以期为荷斯坦公牛的选育提供初步的理论依据。测定12头6—12月龄荷斯坦公牛血液中GPT、GOT、LDH活性,比较各时期血液酶的变化趋势,用SPSS软件分析不同月龄3种血液酶活性与其相应时期生长性能的相关性及回归方程。结果表明:GPT活性与11—12月龄日增重相关系数分别为0.358和0.400,均达到显著水平(P<0.05),GOT活性与9月龄日增重的相关系数为0.399(P<0.05);LDH活性同9、11月龄日增重的相关系数分别为0.550(P<0.01)和0.466(P<0.05)。因此,可考虑将GPT活性作为11—12月龄阶段;GOT活性作为9月龄阶段;LDH活性作为9、11月龄阶段的生化辅助选择标记进行选育工作。

天津地区荷斯坦公牛CVM、DUMPS和CN遗传缺陷检测

本文旨在研究天津地区中国荷斯坦公牛脊椎畸形综合征(Complex?vertebral?malformation,CVM)、尿苷酸合酶缺乏症(Deficiency?of?uridine?monophosphate?synthase,DUMPS)和瓜氨酸血症(Citrullinemia,CN)3种遗传缺陷的携带者比率及系谱来源。通过PIRA-PCR和PCR-RFLP方法分别对天津奶牛发展中心参加全国青年公牛联合后裔测定和国家良种补贴项目的110头荷斯坦公牛进行了CVM、DUMPS和CN三种遗传缺陷检测。共发现6头CVM隐性有害基因携带公牛,携带者比例为5.45%,隐性有害等位基因频率为2.72%。经过系谱分析,其中4头CVM携带者均为美国公牛Carlin-M?Ivanhoe?Bell的后代,另外2头因系谱不完整而无法查询。未检测到DUMPS和CN隐性有害基因携带者。基于此,我国有必要尽快建立荷斯坦牛隐性遗传缺陷监控体系并进行系谱标注,避免携带公牛进入后裔测定和良种补贴项目,以逐步降低我国奶牛群体中遗传缺陷隐性等位基因频率。

公畜模型BLUP法估计荷斯坦公牛育种值的研究

以公牛女儿数不少于10头为限制因子,建立线性模型yijk=μ+hi+sj+eijk,对荷斯坦公牛泌乳量及体型性状的育种值进行BLUP评定。结果表明,23头公牛平均女儿33头,泌乳量育种值排序前10的公牛平均女儿20.8头。泌乳量育种值排序前10的公牛其体型性状的效应值表现优秀;33头女儿的7号公牛泌乳量及体型性状的效应值均排序第一。数据结果说明,泌乳量育种值表现优秀的种公牛在生产中并没有得到充分利用;种公牛泌乳量与体型性状育种值表现一致。

应用优秀荷斯坦公牛冻精改良我场荷斯坦奶牛的效果分析

近年我场奶牛生产有了较大发展,奶牛饲养头数、牛群质量、生产性能都有了较大的提高。这与我场多年坚持做好奶牛育种工作,应用黑龙江省家畜繁育指导站的优秀荷斯坦公牛冻精改良我场奶牛有关。现将改良结果总结如下。1 材料与方法1.1 材料选取我场1987～1992年转群的一胎牛的生产性能、体型等性状进行分析比较。