荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因多态性与乳房炎相关性分析

本研究采用Hae Ⅲ和BstYⅠ内切酶,以PCR-RFLP方法分别检测了新疆地区引进的澳大利亚荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因的多态性及其与乳房炎的相关性。结果共检测到9种基因型5种等位基因,其中基因型HaeⅢAB和BstYⅠAA为优势基因型,等位基因HaeⅢA和BstYⅠA为优势基因;在高于健康牛的分布频率中,基因型Hae Ⅲ AB和BstYⅠAB,基因Hae ⅢB和BstYⅠA基因频率在感染牛中分布频率最高;在高于感染牛的分布频率中,基因型Hae Ⅲ AA和BstYⅠAA,基因Hae Ⅲ A和BstYⅠA在健康牛中分布频率最高。经χ2适合性检验,Hae Ⅲ酶切位点的碱基突变偏离平衡状态(P<0.01),而BstYⅠ酶切位点碱基突变达到平衡状态(P>0.05);Hae Ⅲ酶切基因型和基因频率在感染牛和健康牛中分布差异均极显著(P<0.01);BstYⅠ酶切基因型和基因频率在感染牛和健康牛中的分布差异均不显著(P>0.05)。

中国南方地区荷斯坦奶牛BoLA-DRB3.2的RFLP分析

用PCR-RFLP方法检测中国南方地区奶牛BoLA-DRB3.2的RFLP多态性。选用RsaI、HaeIII和Bst YI酶切PCR扩增产物,14%PAGE分离酶切片段。HaeIII位点检测到6种等位基因,RsaI位点检测到11种等位基因,而在BstYI位点仅检测到4种等位基因。结果表明BoLA-DRB3.2的多态性极其丰富。PCR-RFLP是BoLA-DRB3分型的一种快速而有效的方法。

荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因PCR-RFLP多态性分析

分别采用HaeⅢ和BstYI内切酶,以PCR-RFLP方法检测了新疆地区引进的澳大利亚荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因的多态性。结果显示:在HaeⅢ酶切分析中检测到6种基因型,3个等位基因,其中基因型AB频率最高,等位基因A为优势基因;在BstYI酶切分析中共检测到3种基因型,2个等位基因,其中基因型AA频率最高,等位基因A为优势基因。经χ2适合性检验,BoLA-DRB3基因的HaeⅢ酶切位点的碱基突变偏离Hardy-Weinberg(P<0.01)平衡状态,而BstYI酶切位点碱基突变达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。

中国荷斯坦奶牛CSN3基因多态性检测及其与产奶性状的关联分析

旨在研究安徽省中国荷斯坦奶牛群体κ-酪蛋白(CSN3)基因的多态性及其对奶牛生产性状及奶品质的影响。通过PCR克隆CSN3基因cDNA,使用DNA测序法检测402头中国荷斯坦奶牛CSN3基因的单核苷酸多态性(SNPs)位点,进行群体遗传信息分析并将检测出的SNPs位点基因型与奶牛产奶性能进行关联分析。结果显示:在中国荷斯坦奶牛CSN3基因CDs区序列中发现2个突变位点,即13068 bp处C/T替换,13124 bp处A/G替换。g.13068C>T位点CC型奶牛的基因型频率为0.52,日均产奶量比CT型奶牛高且差异极显著(P<0.01);TT型奶牛乳脂率最高,比CC型奶牛高且差异极显著(P<0.01),CT型奶牛乳脂率比CC型奶牛高且差异显著(P<0.05),CT型奶牛乳蛋白率最高,TT型奶牛牛奶尿素氮、群内级别指数(WHI)含量高于其他2个基因型奶牛,但差异均不显著。g.13124A>G位点AA型奶牛乳蛋白率比AG型奶牛高且差异显著(P<0.05);AG型奶牛日均产奶量比AA型奶牛高,乳脂率比AA型低,体细胞数比AA型高,牛奶尿素氮及WHI含量低于AA型,但均差异不显著。结论:g.13068C>T位点可作为中国荷斯坦奶牛产奶量及乳脂率的分子标记,g.13124A>G位点可作为中国荷斯坦奶牛乳蛋白率的分子标记,CSN3基因可能是影响中国荷斯坦奶牛产奶性能的主效或候选基因。

中国荷斯坦牛SLC35A3-66基因SNP突变与奶牛疾病及泌乳性能的相关性分析

旨在研究中国荷斯坦牛SLC35A3-66基因SNP突变与疾病及泌乳性能的相关性,为加快奶牛的育种进程提供理论基础。通过对866头中国荷斯坦牛SLC35A3基因编码区进行直接测序和飞行质谱分析,检测SLC35A3基因DNA序列第559位上核苷酸突变G>T,同时收集采样牛只疾病与泌乳性能等信息,用Logistic回归分析其与流产的相关关系,用方差分析法分析SLC35A3-66G>T突变与各胎次临床乳房炎病例数和蹄病发生次数、生产寿命及泌乳性能的相关关系,用Cox回归分析不同基因型奶牛的生存曲线。结果表明:中国荷斯坦牛SLC35A3基因编码区SNP存在1个SNP突变位点c.66G>T;SLC35A3-66G>T与乳脂率、蛋白率、脂蛋白比和总固体极显著性相关(P<0.01),与体细胞评分(SCS)和乳糖含量显著性相关(P<0.05),GT型个体各项指标均显著高于GG型个体;SLC35A3-66G>T与各胎次流产、临床乳房炎发生次数和蹄病发生次数之间无显著性相关(P>0.05);SLC35A3-66G>T与离群月龄显著性相关(P<0.05),GT型个体的离群月龄显著高于GG型个体,与生产月龄和离群胎次无显著性相关(P>0.05)。Cox回归分析表明,SLC35A3-66G>T与荷斯坦牛生产寿命显著性相关(P<0.05),GT型个体的离群月龄显著高于GG型纯合子个体;SLC35A3-66G>T与乳脂率、蛋白率、脂蛋白比和总固体极显著性相关(P<0.01),与乳糖、SCS和奶牛生产寿命显著性相关(P<0.05)。该结果为中国荷斯坦牛泌乳性能和乳房炎抗性的分子标记辅助选择提供参考。

中草药添加剂对奶牛抗氧化能力和红细胞免疫功能的影响

试验选择30头性能相近的荷斯坦牛,随机分为3组,每组10头。分别在基础饲料中添加0、100和150g.(d-1·头-1)中草药添加剂,连续饲喂30d。结果表明:添加中草药的两个试验组与不添加中草药的对照组相比,产奶量、红细胞C3b受体花环率和超氧化歧化酶活性分别提高7.22%和6.55%、8.35%和7.90%、7.75%和6.52%(P<0.05),血清丙二醛含量分别降低8.51%和6.96%;乳脂率、乳蛋白率和免疫复合物花环率3组间差异不显著(P>0.05)。所以,中草药添加剂可以提高奶牛的抗氧化能力和红细胞免疫功能。

GnRH、PGF_(2α)诱导奶牛同期发情效果的比较

同期发情处理是牛人工授精中的一项重要技术 ,不同的方法因不同的环境而产生不同的效果。本文就同期发情的不同方法进行了比较 ,以寻找适合本地环境的同期发情方案。 1 5 3头健康经产的中国荷斯坦奶牛分为 3个组 ,用 3种不同的方法进行同期发情处理。第 1组 :注射 1次氯前列烯醇 ;第 2组 :注射 2次氯前列烯醇 ;第 3组 :注射促排 3号—氯前列烯醇—促排 3号。结果表明 :第 1组、第 2组和第 3组经不同的处理后 ,发情率分别为 3 2 .6 5 %(1 6 /49) ,45 .5 9%(3 1 /6 8)和 91 .3 0 %(42 /46 ) ,第 3组的发情率分别显著高于其它两个组 (P<0 .0 5 )。结果提示促排 3号—氯前列烯醇—促排 3号可能是较适合中国荷斯坦奶牛的同期发情方案。

奶牛早期妊娠诊断分子筛选研究

[目的]探究整合素αvβ3、TGF-β、HSP10、PAG、IL-10等妊娠因子在荷斯坦奶牛早期妊娠过程中的规律,筛选奶牛早期妊娠诊断标志因子。[方法]选取49头荷斯坦奶牛,在输精后第7、14、21、28天取外周血,采用荧光定量PCR方法分析整合素αvβ3的表达趋势和变化规律,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析TGF-β、HSP10、PAG、IL-10的表达趋势和变化规律。60 d后通过直检对50头荷斯坦奶牛进行怀孕检测。[结果]50头奶牛中有23头受孕、26头未受孕。通过分析受孕和未孕奶牛血液中整合素αvβ3基因的表达量,发现整合素αvβ3基因在受孕奶牛血液中的表达量高于未孕奶牛,特别是输精后第21、28天受孕奶牛的表达量显著增高(P<0.05);TGF-β、HSP10、PAG、IL-10蛋白质表达量变化在28 d内不能有效区分怀孕奶牛与未孕奶牛。[结论]整合素αvβ3可作为奶牛早期妊娠诊断标志因子,理论上可将孕检的时间窗口提前到早期妊娠阶段的第21天。

奶牛犊腹泻的诊治报告

1发病情况 某中型养殖场饲养荷斯坦奶牛968头，2012年月10月份开始产犊，先后产下犊牛32头。2012年11月21日部分犊牛发生腹泻，在1周时间内有26头发病，发病率8l％，先后死亡5头，病死率19％；发病最小日龄为3日龄，最大的为2月龄，2月龄以上犊牛没有发病的，以20日龄左右犊牛死亡最多。

牛α_(s2)酪蛋白、κ酪蛋白基因启动子区多态性研究

为研究牛CSN1S2、CSN3基因启动子多态性。选择品种差异较大的贵州荷斯坦奶牛和务川黑牛构建不同DNA池,设计特异性引物分别扩增2个牛种CSN1S2、CSN3基因5’调控区及第1外显子部分序列。结果表明:CSN1S2基因5’调控区存在3个SNPs位点:A-253T、A-317G、A-407G,CSN3基因5’调控区发现4个SNPs:T-79G、G-415G、T-421C、T-658G,2个牛品种在不同位点的多态性有显著差异。生物信息学软件预测CSN1S2、CSN3基因核心启动子区及转录因子结合位点,CSN1S2基因A-253T、A-317G位于预测核心启动子区。SNP位点造成CSN3基因7个转录因子结合位点消失,而产生10个新的转录因子结合位点。对于CSN1S2、CSN3基因,突变前后RNA二级结构有明显改变,目标序列均未发现CpG岛。研究结果为进一步确定其启动子功能奠定试验基础。