吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠生长及HIF-1α/VEGF信号通路的影响

目的:探讨吴茱萸碱对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(HIF-1α/VEGF)信号通路的影响。方法:通过皮下注射Lewis肺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,建模后分为模型对照组、阳性对照组(顺铂干预)及吴茱萸碱低、高剂量组,共干预14 d。通过检测各组小鼠造模给药期间肿瘤大小,计算抑瘤率,评价吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。此外,运用定量PCR(qPCR)法检测吴茱萸碱干预14 d后各组小鼠肿瘤组织中HIF-1α及VEGF mRNA表达的影响,免疫组织化学染色评估肿瘤组织中HIF-1α、VEGF及血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达水平,计算肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著的抑制作用,阳性对照组及吴茱萸碱低、高剂量抑瘤率分别为53.13%、20.49%、38.54%;吴茱萸碱各给药剂量组可不同程度下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织HIF-1α及VEGF基因及蛋白表达(P<0.01),减少肿瘤组织中MVD(P<0.01)。结论:吴茱萸碱可抑制肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,其作用机制可能是通过减少肿瘤组织中HIF-1α及VEGF表达,抑制肿瘤中血管生成。

当归提取物对S180荷瘤模型小鼠肉瘤的抑瘤作用的实验研究

目的:探讨当归醇粗提物的抗肿瘤作用与机制。方法:昆明种小鼠60只接种腹水瘤,建立S180荷瘤模型小鼠,当归醇粗提物100、200、400 mg/kg剂量灌胃给药2周,计算模型小鼠的抑瘤率,脾指数和胸腺指数;MTT法测定当归水提物对模型小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;ELISA法测定模型小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素(IL-2)表达。结果:当归醇粗提物可显著抑制S180荷瘤模型小鼠实体瘤的生长(P<0.05),提高脾和胸腺指数(P>0.05),促进Con A诱导的脾淋巴细胞增长和血清中TNF-α及IL-2的表达。结论:当归醇粗提物对S180实体瘤模型小鼠有抑制肿瘤生长作用,其作用机制可能与其具有促进免疫功能有关。

黑蒜水提液对小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长干预

目的:探讨黑蒜水提液对人肝癌SMMC 7721细胞及小鼠肝癌Hep.A22移植性实体瘤生长的作用。方法:体外培养SMMC 7721细胞,观察黑蒜水提液干预后对细胞增殖的影响;将昆明小鼠移植H22肝癌细胞后,分阴性对照组,环磷酰胺组,黑蒜水提液低、中、高剂量组,联合加热治疗组6个组,计算黑蒜水提液对肝癌实体瘤的抑瘤率、胸腺指数和脾指数;对小鼠血清细胞因子IL-2含量测定。结果:黑蒜水提液对肝癌肿瘤均有明显的抑制生长作用,抑瘤有效率可大于40%。结论:通过确定黑蒜水提液作为纯中药抗肿瘤药物的抑瘤作用,为临床应用提供实验依据。

HLA-G参与MDSCs增殖及MI／M2巨噬细胞平衡在肿瘤免疫中的作用研究

目的探索HLA-G对C57BL／6-NCI-11446肺癌细胞荷瘤小鼠骨髓源性抑制性细胞（myelold-derired suppressor cells，MDSCs）增殖及M1／M2巨噬细胞分化的影响，进一步明确HLA．G在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法使用终浓度为lμmol／L羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记NCI-H446以及转染HLA-G的NCI-H446肺癌细胞，流式细胞术检测不同时间点细胞CFSE荧光强度，分析其增殖能力。通过C57BL／6小鼠皮下异位接种NCI-11446及HLA-G^＋NCI-H446肺癌细胞建立荷瘤小鼠模型。以注射PBS为空白对照组，每隔5d解剖取材，流式细胞术分析各组小鼠脾脏MDSCs以及M1／M2细胞比例。结果HLA-G转染的NCI-H446细胞稳定表达HLA-G蛋白（NCI-H446-G）。HLA-G表达可促进NCI-H446细胞的增殖能力（P〈0．05）。C57BL／6小鼠在移植肿瘤细胞后，5d内肿瘤生长最快，随时间增加肿瘤体积不断变小，但NCI-H446-G细胞成瘤组始终大于NCI-H446细胞组（P〈0．05），且该组肿瘤在小鼠体内被完全排斥的时间大于NCI-H446细胞组。与PBS和NCI-H446组相比．NCI-H446-G组小鼠脾脏MDSCs比例显著升高（P〈0．05），且M1／M2巨噬细胞比例显著降低（P〈0．05）。结论HLA-G可影响荷瘤鼠内MDSCs增殖以及M1／M2巨噬细胞比例，参与荷瘤小鼠肿瘤免疫逃避，具有潜在的临床意义。