当归提取物对S180荷瘤模型小鼠肉瘤的抑瘤作用的实验研究

目的:探讨当归醇粗提物的抗肿瘤作用与机制。方法:昆明种小鼠60只接种腹水瘤,建立S180荷瘤模型小鼠,当归醇粗提物100、200、400 mg/kg剂量灌胃给药2周,计算模型小鼠的抑瘤率,脾指数和胸腺指数;MTT法测定当归水提物对模型小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;ELISA法测定模型小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素(IL-2)表达。结果:当归醇粗提物可显著抑制S180荷瘤模型小鼠实体瘤的生长(P<0.05),提高脾和胸腺指数(P>0.05),促进Con A诱导的脾淋巴细胞增长和血清中TNF-α及IL-2的表达。结论:当归醇粗提物对S180实体瘤模型小鼠有抑制肿瘤生长作用,其作用机制可能与其具有促进免疫功能有关。

吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠生长及HIF-1α/VEGF信号通路的影响

目的:探讨吴茱萸碱对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(HIF-1α/VEGF)信号通路的影响。方法:通过皮下注射Lewis肺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,建模后分为模型对照组、阳性对照组(顺铂干预)及吴茱萸碱低、高剂量组,共干预14 d。通过检测各组小鼠造模给药期间肿瘤大小,计算抑瘤率,评价吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。此外,运用定量PCR(qPCR)法检测吴茱萸碱干预14 d后各组小鼠肿瘤组织中HIF-1α及VEGF mRNA表达的影响,免疫组织化学染色评估肿瘤组织中HIF-1α、VEGF及血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达水平,计算肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:吴茱萸碱对肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著的抑制作用,阳性对照组及吴茱萸碱低、高剂量抑瘤率分别为53.13%、20.49%、38.54%;吴茱萸碱各给药剂量组可不同程度下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织HIF-1α及VEGF基因及蛋白表达(P<0.01),减少肿瘤组织中MVD(P<0.01)。结论:吴茱萸碱可抑制肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,其作用机制可能是通过减少肿瘤组织中HIF-1α及VEGF表达,抑制肿瘤中血管生成。

^(192)铱核素对大鼠脑胶质瘤间质内放疗作用的病理学研究

目的:研究^(192)铱脑胶质瘤间质内放疗所产生的生物学反应及对周边正常脑组织的影响,为临床应用提供可靠的理论依据。方法:采用动物实验与病理学观察相结合方法。(1)制备 G422胶质母细胞瘤株皮下荷瘤小鼠模型,接种后14天,待肿瘤生长至肉眼可见,将小鼠分为三组:2.5Gy、10Gy 照射组和不照射的对照组,每组8只,观察肿瘤生长抑制、组织学改变;(2)制备 C6胶质母细胞瘤脑内荷瘤大鼠模型,在颅内接种 C6细胞后14天,将大鼠分为三组:2.5Gy、10Gy 照射组和不照射的对照组(每组8只),观察指标为生长期延长的肿瘤组织学变化。结果:(1)G422皮下荷瘤照射6、14天后,两照射组肿瘤平均体积明显缩小,照射8h 后25Gy组有散在局灶性坏死,边缘区核胞浓集或破碎,10Gy 组以上变化更明显。电镜下2.5Gy 细胞核被挤压一侧,细胞器肿胀,胞浆内包涵体较多。10Gy 组见大量各期坏死瘤细胞。照射8h,坏死面积对照组8.4%,2.5Gy 组18.2%.10Gy 组32.7%;照射14天时,三组分别为30.6%、73.3%和75.3%。(2)C6脑内荷瘤:照射组的生存期明显延长,2.5Gy 组又较10Gy 组显著延长。光镜下:2.5Gy 组瘤组织内坏死、出血,边缘部分核浓缩和破坏。中心区结构破坏,仅残留胞膜;10Gy 组瘤内大片坏死和出血,坏死边缘小血管扩张。电镜下:2.5Gy 组见坏死瘤细胞,胞核被挤压一侧,细胞器肿胀,胞浆包涵体较多;10Gy 组见大量各期坏死瘤细胞。坏死面积对照组37.1%,2.5Gy 组80.5%,10Gy 组为61.2%。结论:(1)G422皮下荷瘤鼠模型和 G6脑内荷瘤鼠模型的制备,结果可靠,重复性好,肿瘤生长符合实验要求,可达到观察肿瘤经放疗后生长抑制的目的,是理想的间质内放疗生物学研究的动物模型;(2)本实验证实,不论皮下荷瘤还是脑内荷瘤,经瘤间质内照射治疗,可引发小鼠不同程度的生长期延长。组织学观察证明,不同剂量瘤间质内插入^(192)铱放射源可引起肿瘤细胞的凋亡及坏死性变化,2.5Gy 组为80.5%,疗效最好,而10Gy 组因引起瘤内大片坏死,周边正常脑组织也有一定程度的血管扩张、充血和脑水肿反应,因此选用分割的低剂量瘤内间质放疗法是治疗脑内恶性肿瘤的有效方法。

氢质子磁共振频谱活体检测结肠癌耐药性的初步探讨

目的探索1H-MRS活体检测结肠癌耐药性的可能性。方法 5只耐药(耐5-FU)与5只不耐药人类结肠癌SW480荷瘤裸鼠于肿瘤直径大于1.5cm时行1H-MRS检查,随后处死荷瘤鼠,切下肿瘤检测其PKC、P-gp、MRP1蛋白表达(Western Blot),观察肿瘤凋亡(TUNNEL法)。分析结肠癌耐药性与1H-MRS检测代谢物、肿瘤耐药基因表达、肿瘤凋亡的相关性。结果不耐药组人类结肠癌SW480裸鼠肿瘤的cho、lac、Lip及m I峰/cr面积比较耐药组人类结肠癌SW480/5-FU裸鼠增加,差别有统计学差异(P<0.05)。耐药组PKC、P-gp、MRP1蛋白表达明显高于不耐药组,差别有统计学差异(P<0.05)。在TUNNEL检测切片上,两组肿瘤组织均可见肿瘤细胞凋亡,两者差别无统计意义(P>0.05)。肿瘤代谢物cho、Lac、Lip、m I/cr与肿瘤耐药性呈正相关性;cho面积与肿瘤PKC表达光密度呈正相关,与肿瘤Pgp表达光密度呈正相关。结论肿瘤代谢物cho、lac、Lip的改变有可能有助于利用1H-MRS活体检测结肠癌耐药性改变。

Assistant radiotherapeutic effect of Jiaqi Mixture on tumor-bearing mice

Objective:The aim was to study the assistant radiotherapeutic effect of Jiaqi Mixture (JQM) on Ehrlich's ascites carcinoma (EAC) mice.Methods:The EAC-cancer model was made up with Kunming mice.The tumor-bearing mice were treated with whole body exposure (8 Gy) and intragastric administration of JQM,and the changes of tumor weight,the total number of white blood cells (WBC) and immune system were observed.Results:The average tumor weight,WBC,spleen coefficient,the stimulation index (SI) of Con A and LPS and the natural killing (NK) cell activity of mice decreased in some degree after radiotherapy,but the average tumor weight decreased more obviously in radiotherapy + medicine groups (compared with tumor control group,P < 0.05);and the other above indexes were much higher in radiotherapy + medicine groups than those in radiotherapy groups (P < 0.05-0.01).Conclusion:It was suggested that JQM can enhance the effect of radiation therapy and protect the normal immune system caused by radiation therapy.

黑蒜水提液对小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长干预

目的:探讨黑蒜水提液对人肝癌SMMC 7721细胞及小鼠肝癌Hep.A22移植性实体瘤生长的作用。方法:体外培养SMMC 7721细胞,观察黑蒜水提液干预后对细胞增殖的影响;将昆明小鼠移植H22肝癌细胞后,分阴性对照组,环磷酰胺组,黑蒜水提液低、中、高剂量组,联合加热治疗组6个组,计算黑蒜水提液对肝癌实体瘤的抑瘤率、胸腺指数和脾指数;对小鼠血清细胞因子IL-2含量测定。结果:黑蒜水提液对肝癌肿瘤均有明显的抑制生长作用,抑瘤有效率可大于40%。结论:通过确定黑蒜水提液作为纯中药抗肿瘤药物的抑瘤作用,为临床应用提供实验依据。

HLA-G参与MDSCs增殖及MI／M2巨噬细胞平衡在肿瘤免疫中的作用研究

目的探索HLA-G对C57BL／6-NCI-11446肺癌细胞荷瘤小鼠骨髓源性抑制性细胞（myelold-derired suppressor cells，MDSCs）增殖及M1／M2巨噬细胞分化的影响，进一步明确HLA．G在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法使用终浓度为lμmol／L羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记NCI-H446以及转染HLA-G的NCI-H446肺癌细胞，流式细胞术检测不同时间点细胞CFSE荧光强度，分析其增殖能力。通过C57BL／6小鼠皮下异位接种NCI-11446及HLA-G^＋NCI-H446肺癌细胞建立荷瘤小鼠模型。以注射PBS为空白对照组，每隔5d解剖取材，流式细胞术分析各组小鼠脾脏MDSCs以及M1／M2细胞比例。结果HLA-G转染的NCI-H446细胞稳定表达HLA-G蛋白（NCI-H446-G）。HLA-G表达可促进NCI-H446细胞的增殖能力（P〈0．05）。C57BL／6小鼠在移植肿瘤细胞后，5d内肿瘤生长最快，随时间增加肿瘤体积不断变小，但NCI-H446-G细胞成瘤组始终大于NCI-H446细胞组（P〈0．05），且该组肿瘤在小鼠体内被完全排斥的时间大于NCI-H446细胞组。与PBS和NCI-H446组相比．NCI-H446-G组小鼠脾脏MDSCs比例显著升高（P〈0．05），且M1／M2巨噬细胞比例显著降低（P〈0．05）。结论HLA-G可影响荷瘤鼠内MDSCs增殖以及M1／M2巨噬细胞比例，参与荷瘤小鼠肿瘤免疫逃避，具有潜在的临床意义。